CatD保护CRC细胞免受氧化应激。(一和b条)CatD催化活性的特异性抑制剂PstA对醋酸处理的RKO细胞活性氧水平的影响。PstA(100 μM) 预孵16天 h,然后与醋酸共聚24小时 小时(一)超氧阴离子(O)的积累2−)用二氢乙硫酸氢钠(DHE)检测RKO细胞,并用流式细胞术定量。(b条)H的积累2O(运行)2在RKO细胞中检测到H2DCF-DA使用荧光微孔板阅读器。(c(c)和d日)CatD沉默对醋酸(110)处理的RKO细胞线粒体超氧化物和总超氧化物产生的影响 mM)或依托泊苷(50 μM) 用于48 h.作为对照,RKO细胞未转染(空白)、未转染干扰对照siRNA或未转染CatD siRNA2O(运行)2(1 mM)作为ROS产生的阳性对照。(c(c))用MitoSOX检测RKO细胞线粒体超氧化物的积累,并用流式细胞术定量。(c(c))CatD的下调导致线粒体超氧化物生成显著增加,并将其归一化为时间0(T型0)在110处理的RKO细胞中 mM醋酸盐和(d日)总超氧化物的显著积累,归一化为T型0个单元格。数值代表平均值±S。至少三个独立实验的E.M*P(P)≤0.05, **P(P)≤0.01时***P(P)≤0.001和****P(P)与对照细胞相比≤0.0001。#P(P)≤0.05和##P(P)醋酸处理与醋酸/PstA或醋酸处理与乙酸/CatD siRNA的比较≤0.001