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图5

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Parkin募集动力学受PINK1表达调控。

(A) 在血清中添加10µM CCCP后,在0分钟的时间点,对单独转染mCherry-Parkin(红色)或以1∶1比例转染M樱桃-帕金(红色)和PINK1-YFP的HeLa细胞进行实时成像添加CCCP后。Parkin易位开始的时间被定义为在至少三个独立实验中,六个或更多细胞的两个或多个连续图像的两个以上象限中首次出现点状突起。N.S.,无显著性。(C) 转染YFP-Parkin(绿色)或YFP-Pargin(绿色)和PINK1-myc(比例为1∶4)的HeLa细胞的活共焦图像。用TMRE(红色)负载细胞以染色极化线粒体。细胞未经CCCP处理。最后一幅图像中的比例尺表示10µm。中间面板和右侧面板中的图像是左侧面板中方框区域的扩展。(D) 按(C)所述处理的细胞在YFP-Parkin和TMRE之间的共定位进行评分。≥在三个或更多的独立实验中,对50个细胞/实验进行评分。

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