概述
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产品名称 -
亲本细胞系 U-2操作系统 -
有机体 人类 -
突变描述 通过CRISPR/Cas9实现敲除; X=1 bp插入; 移帧:99% -
通道编号 <20 -
淘汰验证 下一代测序(NGS) -
生物安全水平 1 -
常规说明 建议控制: 人野生型U-2 OS细胞系( 约263976 ). 请注意,剔除细胞株订单中不会自动包含野生型细胞株,如果需要,请使用代码WILDTYPE-TMTK1免费添加推荐的野生型细胞系。 低温保存细胞培养基: 细胞冷冻介质-DMSO无血清培养基,在补充甲基纤维素的MEM中含有8.7%的DMSO。 培养基: McCoY5a+10%FBS 初始处理指南: 到达后,小瓶应储存在液氮气相中,而不是-80°C。 在-80°C下储存可能会导致生存能力丧失。 1.在37°C水浴中解冻小瓶约1-2分钟。 2.将细胞悬液(0.8 mL)转移到含有8.4 mL预热培养基的15 mL/50 mL锥形无菌聚丙烯离心管中,用额外的0.8 mL培养基(总体积10 mL)清洗小瓶以收集剩余细胞,并在室温下以201 x g(rcf)离心5分钟。 10 mL代表建议的最小稀释度。 20 mL代表建议的最大稀释度。 3.将细胞颗粒重新悬浮在5 mL预热培养基中,并使用血细胞仪或其他细胞计数方法进行计数。 根据细胞计数,将种子细胞置于密度为2x10的适当细胞培养瓶中 4 细胞/厘米 2 。播种密度仅供参考,应根据各个实验室的时间表进行调整。 4.在37°C培养箱中用5%CO培养 2 。应每天监测培养物。 亚文化指南: 所有播种密度应基于通过既定方法获得的细胞数。 引导播种密度为2x10 4 细胞/厘米 2 建议使用。 如果需要,在继代培养前24小时更换部分培养基可能有助于促进生长。 当细胞达到80-90%的汇合时,应进行传代。
本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . 我们将提供复苏时增殖的活细胞。
性能
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单元格数量 1 x 10 6 细胞/小瓶,1 mL -
粘附/悬浮 粘附剂 -
组织 骨骼 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 骨肉瘤 -
性别 女性 -
无支原体 是的 -
存放说明 干冰运输。 储存在液氮中。 -
存储溶液 成分:8.7%二甲基亚砜、2%纤维素、甲醚 -
研究领域
靶
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功能 I型胶原蛋白是I组胶原蛋白(形成纤维的胶原蛋白)的成员。 -
土耳其 形成肌腱、韧带和骨骼的原纤维。 骨骼中的纤维被钙-羟基磷灰石矿化。 -
疾病相关 COL1A1缺陷是Caffey病(CAFFD)的病因[MIM:114000]; 也称为婴儿皮质骨质增生。 Caffey病的特征是婴儿期大量骨膜下新骨形成,通常累及长骨、下颌骨和锁骨的骨干。 受累的骨骼也可能出现炎症,伴随着疼痛的肿胀和全身发热,通常伴随着疾病。 骨骼变化通常在5个月大之前开始,在2岁之前解决。 COL1A1缺陷是Ehlers-Danlos综合征1型(EDS1)的病因[MIM:130000]; 也称为Ehlers-Danlos综合征。 EDS是一种结缔组织疾病,其特征是皮肤过度伸展,组织脆弱和关节过度松弛导致皮肤萎缩瘢痕。 EDS1是典型的Ehlers-Danlos综合征的严重形式。 COL1A1缺陷是7A型Ehlers-Danlos综合征(EDS7A)的病因[MIM:130060]; 也称为常染色体显性Ehlers-Danlos综合征VII型。 EDS是一种结缔组织疾病,其特征是皮肤过度伸展,组织脆弱和关节过度松弛导致皮肤萎缩瘢痕。 EDS7A以双侧先天性髋关节脱位、关节过度松弛和复发性部分脱位为特征。 COL1A1的缺陷是1型成骨不全(OI1)的原因[MIM:166200]。 一种显性遗传性结缔组织病,以骨质脆弱和巩膜发蓝为特征。 1型成骨不全症是指身高正常或轻度矮小且无畸形,无牙本质形成不全症。 COL1A1缺陷是2A型成骨不全症(OI2A)的原因[MIM:166210]; 也称为先天性成骨不全。 一种以骨质脆弱为特征的结缔组织疾病,有许多围产期骨折、长骨严重弯曲、矿化不足以及围产期因呼吸功能不全而死亡。 COL1A1缺陷是3型成骨不全(OI3)的原因[MIM:259420]。 一种结缔组织疾病,特征是骨骼逐渐变形、身材矮小、三角脸、严重脊柱侧凸、巩膜灰白和牙本质发育不全。 COL1A1缺陷是4型成骨不全症(OI4)的原因[MIM:166220]; 也称为正常巩膜的成骨不全。 一种结缔组织疾病,特征是身材矮小、轻度至中度脊柱侧凸、巩膜灰白和牙本质发育不全。 COL1A1基因变异是骨质疏松症易感性的一个原因[MIM:166710]; 也称为退化性或老年性骨质疏松症或绝经后骨质疏松症。 骨质疏松症的特点是骨量减少,骨微结构破坏,骨组成没有改变。 骨质疏松的骨骼更容易骨折。 注=在隆起性皮肤纤维肉瘤中发现涉及COL1A1的染色体畸变。 用PDGF易位t(17;22)(q22;q13)。 -
美国 属于纤维胶原家族。 包含1个纤维胶原NC1结构域。 包含1个VWFC域。 -
翻译后修饰 三肽重复单元(G-X-Y)第三位置的脯氨酸残基在部分或全部链中羟基化。 三肽重复单元(G-X-Y)第二位置的脯氨酸残基在一些链中羟基化。 O-连接聚糖由一个Glc-Gal二糖组成,该糖与翻译后添加的羟基的氧原子结合。 -
细胞定位 分泌>细胞外间隙>细胞外基质。 -
UniProt提供的信息
产品
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KO细胞裂解物
图片
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CRISPR/Cas9实现的淘汰; X=1 bp插入; 移帧:99% -
该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约138492 )。 约138492 野生型U2OS细胞(顶部面板)和COL1A1敲除型U2OS细胞(底部面板)中胶原α-1链染色(ab273846)。 用100%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 约138492 浓度为0.4μg/ml 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共聚焦显微镜(Leica Microsystems TCS SP8)拍摄图像。
数据表及文件
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SDS下载 -
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