主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[EP4969]到Raf1-N末端 适用于:流动周期(内部)、WB、ICC/IF 敲除已验证 反应:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP4969]至Raf1-N端子 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 小鼠、大鼠、人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HAP1、HeLa、K-562、RAW 264.7、C2C12、NIH/3T3和PC-12裂解物。 ICC/IF:HeLa细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP4969型 -
同种型 免疫球蛋白G -
新冠肺炎疫苗
相关产品
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替代版本 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白
美国
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靶标
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功能 参与从细胞膜向细胞核传递有丝分裂信号。 从受体到细胞核的Ras依赖性信号通路的一部分。 保护细胞免受STK3介导的细胞凋亡的影响。 -
组织特异性 在骨骼肌中,亚型1比亚型2更丰富。 -
疾病相关 RAF1缺陷是努南综合征5型(NS5)的病因[MIM:611553]。 努南综合征(NS)是一种以面部畸形、身材矮小、肥大、心脏异常、耳聋、运动迟缓和出血素质为特征的疾病。 这是一种遗传异质性和相对常见的综合征,估计每1000-2500名活产婴儿中就有1例发生。 RAF1缺陷是LEOPARD综合征2型(LEOPARD2)的病因[MIM:611554]。 LEOPARD综合征是一种与Noonan综合征相关的常染色体显性遗传病等位基因。 首字母缩写LEOPARD代表雀斑、心电图传导异常、眼球肥大、肺动脉狭窄、生殖器异常、生长迟缓和耳聋。 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 TKL Ser/Thr蛋白激酶家族。 RAF亚家族。 包含1个佛波酯/DAG型锌指。 包含1个蛋白激酶结构域。 包含1个RBD(Ras-binding)域。 -
翻译后修饰 DNA损伤后发生磷酸化,可能是ATM或ATR引起的。 Thr-269处的磷酸化增加其激酶活性。 Ser-259的磷酸化诱导与YWHAZ的相互作用并使激酶活性失活。 含有蛋白磷酸酶1、SHOC2和M-Ras/MRAS的复合物对Ser-259的去磷酸化可减轻失活,从而刺激RAF1活性。 -
细胞定位 细胞质。 细胞膜。 在细胞质和膜中与RGS14和BRAF进行配体化。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 5894 人类 Entrez基因: 110157 鼠标 Entrez基因: 24703 老鼠 Omim公司: 164760 人类 瑞士保护银行: P04049号 人类 瑞士保护银行: Q99N57号 鼠标 瑞士保护银行: 第11345页 老鼠 单基因: 159130 人类
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别名 c Raf抗体 C-raf抗体 C-Raf原癌基因、丝氨酸/苏氨酸激酶抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗-Raf1抗体[EP4969]-N末端(ab181115) 车道1: 野生型HCT 116细胞裂解物 车道2: RAF1敲除HCT 116细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 73千帕 观察到的频带大小: 73千Da Western blot:抗RAF1抗体[EP4969](ab181115)以1/1000稀释度染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab181115显示与RAF1特异结合。 在野生型HCT 116细胞裂解液中观察到73kDa的条带,在RAF1敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成此图像,分析了野生型和RAF1敲除HCT 116细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
所有车道: 1/20000稀释的抗-Raf1抗体[EP4969]-N末端(ab181115) 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: RAF1敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 73千帕 观察到的频带大小: 73千帕 车道1-2: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在73 kDa下观察到ab181115。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab181115与野生型HeLa细胞中的Raf1反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约264978 (敲除细胞裂解物 ab257126号 )已使用。 对野生型HeLa和RAF1敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab181115和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1/2000稀释度和1/2000稀释度在4°C下过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )在成像前在室温下以1/2000稀释1小时的二次抗体。 -
用纯化的ab181115在1/100稀释度(10µg/ml)下标记Raf1的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析。 细胞固定在4%的多聚甲醛中,并用0.1%的tritonX-100渗透。 用Ab195889抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor ® 594)1/200(2.5微克/毫升)。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488, 约150077 )以1/1000(2µg/ml)稀释度作为二级抗体。 DAPI(蓝色)用作核染色。 用PBS代替一级抗体作为二级抗体对照。 -
1-2车道: 稀释1/1000的抗-Raf1抗体[EP4969]-N末端(ab181115) 车道3-4: 抗β-肌动蛋白抗体[mAbcam 8226]-负载控制( 约8226 )稀释1/1000 1、3、5车道: 野生型HAP1细胞裂解物 2、4、6车道: Raf1敲除HAP1细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 73千帕 车道1和2 :来自目标的绿色信号–在74 kDa下观察到的ab181115 3号和4号车道 :来自装载控制的红色信号– 约8226 在42 kDa下观察到 车道5和6 :合并(红色和绿色)信号 使用Raf1敲除样品时,未纯化的ab181115与Raf1发生特异性反应。 对野生型和Raf1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab181115和 约8226 (β-肌动蛋白负荷控制)均稀释1/1000并在4℃下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
车道1 :野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 车道2 :Raf1敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 车道1和2: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在74 kDa处观察到目标。 红色-装载控制, 约8226 ,在42 kDa下观察到 这张western blot图像是未纯化的ab181115和竞争对手最常引用的停用兔多克隆抗体之间的比较。 -
抗-Raf1抗体[EP4969]-N-末端(ab181115),稀释度为1/1000(纯化)+PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤),全细胞裂解液浓度为20µg 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 73千帕 观察到的频带大小: 73千帕 -
所有车道: 1/1000稀释的抗Raf1抗体[EP4969]-N-末端(ab181115)(纯化) 车道1: RAW 264.7(小鼠Abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞)全细胞裂解物 车道2: C2C12(小鼠成肌细胞成肌细胞)全细胞裂解物 车道3: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 73千帕 观察到的频带大小: 73千帕 -
所有车道: 抗-Raf1抗体[EP4969]-N末端(ab181115),稀释度为1/1000(纯化) 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: K-562(人慢性粒细胞白血病淋巴细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 73千帕 观察到的频带大小: 73千帕 -
所有车道: 抗-Raf1抗体[EP4969]-N末端(ab181115),稀释度为1/1000(未净化) 车道1: HeLa细胞裂解物 车道2: K562细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG,(H+L),过氧化物酶偶联物,1/1000稀释 预测的带宽大小: 73千帕 观察到的频带大小: 73千帕 -
用未纯化的ab181115在1/250稀释度下标记Raf1,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor)标记Raf1的丙酮固定K562细胞的免疫荧光分析 ® 488)稀释1/200的二级抗体。 用达皮进行反染色。
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
文献 (3)
李杰 等。 METTL3通过COL12A1/MAPK信号通路促进食管鳞癌的肿瘤进展。 J癌症 13:1972-1984 (2022). 公共医学:35399719 金X 等。 Cinobufagin通过抑制AURKA-mTOR-eIF4E轴触发肝癌细胞纺锤体形成缺陷和Cap-Dependent翻译。 美国医学杂志 48:651-678 (2020). 公共医学:32349518 Youngworth I和Delany ME RAF1中的提前终止密码子是遗传性鸡无翅-2发育综合征的优先候选致病突变。 基因(巴塞尔) 10:不适用(2019)。 公共医学:31075853