介绍
GeneCopoeia的Luc-Pair™Duo-Luciferase HS检测试剂盒是高灵敏度检测萤火虫荧光素酶(FLuc)和雷尼利亚荧光素酶(Rluc)活性。Luc-Pair系列™ 双荧光素酶HS检测试剂盒适用于许多不同的真核细胞类型(例如哺乳动物、,无脊椎动物等),并与GeneCopoeia、Promega和许多其他Fluc和Rluc载体兼容。这个Luc-Pair™Duo-Luciferase HS检测试剂盒适用于许多应用,例如测量miRNA对靶序列的抑制作用。
优势
- 高灵敏度-针对Firefly和雷尼利亚荧光素酶信号(图1)。
- 多才多艺-设计用于使用微光板或单管光度计对多种不同真核细胞类型(例如哺乳动物、低等无脊椎动物等)进行分析。
- 低背景-非常低的背景发光。不需要从读数中减去。
- 简单—雷尼利亚荧光素酶缓冲液和底物含有萤火虫荧光素酶活性的猝灭剂(图2),实现快速发光和停止-N-流动两步分析。
- 再现性-浓度范围超过几个数量级的可靠线性结果。
- 兼容性-与Promega的Fluc和Rluc载体兼容。
GeneCopoeia还提供Luc Pair™Duo-Luciferase检测试剂盒2.0用于需要具有增强稳定性的荧光素酶读数的应用。
图1萤火虫荧光素酶活性和雷尼利亚使用GeneCopoeia Luc-Pair™Duo-luciferase HS检测试剂盒检测荧光素酶信号。用Promega pGL4.13/pGL4.75报告载体转染HEK 293细胞48小时。如程序所述,测量FLuc(FLuc-GeneCopoeia)和RLuc(RLuc-GeneCopoeia,RLuc)活性。使用Promega双荧光素酶检测试剂盒(FLuc-Promega和RLuc-Promega)进行比较。
图2。萤火虫荧光素酶活性随着Luc-H缓冲液II的添加而猝灭。用Promega pGL4.13/pGL4.75报告载体转染HEK 293细胞48小时。按程序所述测量萤火虫荧光素酶活性。接下来,将1x Luc-H缓冲液II(无基质或有基质)添加到微孔中,然后在光度计中读取计数。约99.9%的萤火虫荧光素酶活性被猝灭(中柱)。
常见问题解答
常见问题:荧光素酶分析
答案:“RLU”代表“相对光单位”。光度计不直接根据光子数测量光输出。
答案:所有GeneCopoeia荧光素酶试剂盒都与所有已知的光度计兼容。
答案:如果储存在-20°C下,所有GeneCopoeia荧光素酶试剂至少可以稳定6个月。
答案:为了防止失去活力,最好避免反复冷冻和解冻。我们建议将小份移液管移到新的、清洁的无菌试管中,并将这些小份置于-20°C。一旦你解冻了其中一份,丢弃它,而不是把它放回冰箱。
答案: The高斯(Gaussia)荧光素酶底物,柯来特拉嗪,也是雷尼利亚荧光素酶,所以它与雷尼利亚。但是,科伦特嗪不能与Firefly一起使用(萤火虫)荧光素酶,它使用荧光素作为底物。
答案:不幸的是,《基因药典》萤光素酶试剂盒的单个成分目前无法单独购买。
答案:通常在12到24小时之间。
出版物
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