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.1997年12月19日;272(51):32547-50.
doi:10.1074/jbc.272.51.32547。

雷帕霉素的哺乳动物靶点磷酸化具有(Ser/Thr)-Pro基序的位点,并被其COOH末端附近区域的抗体激活

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雷帕霉素的哺乳动物靶点磷酸化具有(Ser/Thr)-Pro基序的位点,并被其COOH末端附近区域的抗体激活

G J布伦等。 生物化学杂志. .
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摘要

真核生物起始因子4E(eIF4E)结合蛋白PHAS-I在与[gamma-32P]ATP和雷帕霉素(mTOR)哺乳动物靶点孵育时迅速磷酸化,雷帕霉素靶点是用抗体mTAb1免疫沉淀的,靶点位于mTOR的COOH末端附近的区域。通过与其他抗体免疫沉淀或使用雷帕霉素/FKBP12树脂亲和纯化获得的mTOR,PHAS-I磷酸化速度较慢。将mTAb1添加到mTOR的任何一种制剂中都会使PHAS-I磷酸化增加几倍,表明mTAb1-激活mTOR蛋白激酶。mTAb1激活的mTOR磷酸化PHAS-I中的Thr36、Thr45、Ser64、Thr69和Ser82。所有这五个位点都符合(Ser/Thr)-Pro基序,并在大鼠脂肪细胞中对雷帕霉素进行去磷酸化。因此,我们的研究结果表明,Pro是mTOR蛋白激酶特异性的决定因素,并且mTOR有助于细胞内PHAS-I的磷酸化。

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