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.1997年8月8日;90(3):523-35.
doi:10.1016/s0092-8674(00)80512-7。

快速冷冻/深度接触电镜观察NSF及其膜受体复合物的结构和构象变化

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快速冷冻/深蚀刻电子显微镜观察NSF及其膜受体复合物的结构和构象变化

P I汉森等。 单元格. .
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摘要

利用吸附在云母上的重组蛋白的快速冷冻/深度追踪电子显微镜,我们发现NSF(参与膜融合的低聚物ATP酶)是一个10 x 16 nm的中空圆柱体,其构象取决于核苷酸结合。缺乏核苷酸后,NSF转化为“八字形”蛋白酶敏感构象,揭示其亚单位组成。NSF的突触膜底物是含有突触合蛋白、SNAP-25和突触短肽的三元SNARE复合物,是一个4 x 14 nm的杆,一端有一个“尾巴”,对应于突触合蛋白的N末端。使用表位标签、抗体和麦芽糖结合蛋白标记,我们发现syntaxin和syntapobrevin在复合物中平行排列,其膜锚位于杆的同一端。该SNARE杆与α-SNAP结合到NSF圆柱体的一端,形成不对称的“20S”复合物。总之,这些图像表明NSF如何分离SNARE复合物,以及复合物的结合和分离如何与膜融合相关。

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