跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.1997年3月7日；88(5):603-13.
doi:10.1016/s0092-8674（00）81903-0。

整合素α8beta1在肾脏形态发生过程中对上皮-间充质相互作用至关重要

乌穆勒 1, D王, S丹达, J J梅内塞斯, R A佩德森, L F赖夏特
附属公司

整合素α8beta1在肾脏形态发生过程中对上皮-间充质相互作用至关重要

乌穆勒等。 单元格. .

摘要

我们提出了整合素在器官发生过程中调节上皮-间充质相互作用的遗传学证据。α8基因突变的小鼠不表达整合素α8β1，肾脏形态发生严重缺陷。在野生型动物中，输尿管上皮和后肾间质之间的诱导性相互作用对肾脏形态发生至关重要。在alpha8突变纯合子中，输尿管芽的生长和分支以及间充质细胞向上皮结构的募集都有缺陷。与这些表型一致，α8在与输尿管接触的间充质细胞中被诱导表达。由于之前确定的配体似乎都不可能介导α8β1在肾脏形态发生中的基本功能，我们使用α8β1-碱性磷酸酶嵌合体在生长的输尿管中定位新的配体。这些配体的分布使它们成为肾脏形态发生调节因子的有力候选者。

PubMed免责声明

数字

图1
图1。肾脏发育示意图
（A） 在E10.5–E11.5处，输尿管芽（utb）从Wolffian导管（wd）发出。（B） 输尿管芽侵入后肾间质和分支。间质围绕输尿管分支尖端（ub）冷凝（cm）。（C） 间充质通过管前聚集物（pa）和逗号状体（C）等中间产物进行转化。（D） 间质已转化为上皮细胞，由远端小管（dt）和近端小管（pt）组成，成熟后形成排泄肾单位。st，输尿管柄。比例尺，10μm。
图2
图2。发育中肾脏整合素α8亚单位的免疫组织化学定位
野生型胚胎切片用整合素α8亚单位胞外区抗体染色。缩写如图1所示。（A和B）在E11，α8亚单位在Wolffian导管周围的间充质细胞中表达明显，在导管上皮和周围间充质上皮细胞（箭头）之间的界面处高浓度。α8亚单位也表达于生长中的输尿管芽顶端上方和输尿管芽周围的间充质细胞中（A，宽箭头）。（C–G）在E13.5，α8亚单位在分支输尿管尖端周围的凝聚间质（C和E）和管前聚集物（F）中表达，但不在逗号形小体（G）或S形小体中表达。α8亚单位在与输尿管上皮交界的间充质细胞中高水平表达，如穿过输尿管的横切面（D，箭头）和纵切面（E，箭头）所示。（H） 在E16.5，α8亚单位的表达见于浓缩间充质细胞的肾脏外层，但在分化结构（如肾小球（gl））的内部表达不多。比例尺，100μm（C和H）和10μm（A、B和D–G）。
图3
图3。α8位点的靶向
（A） α8蛋白示意图和基因组α8克隆的限制性图谱。指出了靶向结构的配置、靶向等位基因、用于筛选的探针和预期的Southern印迹片段。E、 EcoRI；H、 HindIII；D、 DpnI；B、 巴米。对于DpnI，只显示了许多限制位点中的一个。（B） 用EcoRI消化杂合小鼠杂交后代的小鼠尾部DNA，并用探针2进行Southern印迹分析。8.0kb的条带反映了野生型α8等位基因，5.8kb条带反映靶向α8轨迹。在两种基因型中均检测到2.4kb的条带。（C） 从新生野生型或纯合突变小鼠的肺组织中制备提取物。用α8胞外区特异性抗血清免疫沉淀α8蛋白，然后用第二种胞外区抗血清免疫印迹。蛋白质通过化学发光显示。指出了α8蛋白和免疫球蛋白G重链的位置。（D） 用整合素α8的细胞质（cyt）或胞外（ex）结构域抗体对野生型和纯合突变P0动物的肺切片进行染色。比例尺，50μm。
图4
图4。P0时α8-缺乏小鼠的肾脏表型
从野生型（A）或α8-缺乏型（B–D）小鼠上解剖泌尿生殖道。（A） 在野生型小鼠中，肾上腺（ad）、肾脏（k）、输尿管（u）、膀胱（b）和睾丸（t）发育良好。（B） 受影响最严重的突变株没有输尿管和肾脏，但膀胱和肾上腺未受影响。请注意，本次解剖未切除背主动脉（da）和子宫角（uh）。（C） 一个小肾脏和一个来自突变动物的雏形（装箱）。（D） 雏形的高倍视图（C框中）。星号表示肾上腺和输尿管之间未分化的间质。比例尺，100μm。
图5
图5。E11.5和E13.5α8-缺乏小鼠的肾脏表型
切片用苏木精和伊红染色。（A和B）E11.5野生型和突变型肾脏区域的切片。箭头划分了后肾间质。在野生型动物（A）中，输尿管芽（ubt）侵犯了后肾间质。在α8缺乏小鼠（B）中，输尿管芽已经发育，但尚未侵入后肾间质。（C） E13.5处野生型后肾剖面。（D–F）显示α8缺乏动物E13.5后肾发育程度的切片。在一些动物中，输尿管在间质内有分支（D）；在某些情况下，它侵入了间质（宽箭头），但没有分支（E）；而在其他情况下，它还没有到达处于退化过程中的间质（宽箭头）（F）。k、 肾脏；ad，肾上腺。比例尺，100μm。
图6
图6。p75的分析NTR公司和Pax-2在E13.5和E15.5的表达
（A和B）E13.5野生型（A）和突变型（B）动物的切片用p75抗体染色NTR公司受体。野生型和突变型动物在输尿管分支周围的浓缩间充质细胞（cm）中有明显表达。在野生型动物中，p75NTR公司在肾小泡中也观察到表达（A，宽箭头）。用Pax-2抗体对E15.5野生型（C）和突变型（D）动物的（C和D）切片进行染色，Pax-2在输尿管上皮和冷凝间质中诱导表达。只显示了野生型肾脏切片的一小部分，而可以看到α8缺乏动物的整个雏形。注意，在突变动物中，输尿管形成了很少的分支，但诱导了Pax-2的表达。比例尺，50μm。
图7
图7。新型整合素α8β1配体在肾脏中的表达
（A和B）用整合素α8（A）胞外结构域或α8β1-AP（B）特异性抗体对整个肾脏进行染色。用对照AP融合蛋白（C）、α8抗体（E和G）或α8β1-AP（D、F、H、I和K）对E13.5肾脏的（C–I和K）切片进行染色。在RGD（I）或RGE（K）肽存在的情况下进行染色。箭头表示α8β1与其新配体之间存在明显共定位的区域。（D）中的星号表示逗号形状的主体。（五十） 提取自胚胎和成人肾脏。蛋白质在6%聚丙烯酰胺凝胶上分离，转移到硝化纤维素中，并用α8β1-AP或FN抗体进行探测。箭头表示以RGD依赖方式与α8β1-AP相互作用的新蛋白质。比例尺，50μm（A和B）和10μm（C–K）。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

参考文献

    1. Aufderheide E，Chiquet-Ehrismann R，Ekblom P。发育中肾脏的上皮-间质相互作用导致间质中tenascin的表达。细胞生物学杂志。1987;105:599–608.-项目管理委员会-公共医学
    1. Bossy B、Bossy-Wetzel E、Reichardt LF。整合素α8亚单位的特征：一种新的整合素β1相关亚单位，在鸡胚的轴突和与基底层接触的细胞上显著表达。EMBO J.1991；10:2375–2385.-项目管理委员会-公共医学
    1. Cheng HJ、Flanagan JG。ELF-1的鉴定和克隆，ELF-1是Mek4和Sek受体酪氨酸激酶的发育表达配体。单元格。1994;79:157–168.-公共医学
    1. Clark EA，Brugge JS公司。整合素和信号转导途径：所走的路。科学。1995;268:233–239.-公共医学
    1. Dressler GR、Deutsch U、Chowdhury K、Nornes HO、Gruss P.Pax2，一种新的鼠对-盒基因及其在发育中的排泄系统中的表达。发展。1990年；109:787–795.-公共医学

出版物类型

MeSH术语

关联数据