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1997年3月7日;272(10):6146-50.
doi:10.1074/jbc.272.10.6146。

蛋白激酶C-zeta介导血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ激活ERK1/2

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蛋白激酶C-zeta介导血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ激活ERK1/2

D F廖等。 生物化学杂志
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摘要

血管紧张素II(angII)对44和42kDa细胞外信号调节激酶(ERK)1/2的激活在血管平滑肌细胞(VSMC)功能中起着重要作用。双特异性有丝分裂原活化蛋白激酶/ERK激酶(MEK)激活ERK1/2以响应angII,但MEK激活激酶仍不明确。Raf是一个候选的MEK激酶。然而,Raf以外的激酶似乎负责angII介导的信号转导,因为我们之前表明,用1μM佛波醇12,13二丁酸盐(PDBU)处理24小时完全阻断了VSMC中Raf-Ras的结合,但没有抑制angII对MEK和ERK1/2的激活。我们假设缺乏佛波酯结合域的非典型蛋白激酶C(PKC)亚型介导血管紧张素Ⅱ激活ERK1/2。用PKC异构体特异性抗体对大鼠主动脉VSMC进行Western blot分析,显示PKC-α、-β1、-δ、-ε和-zeta的相对丰度。除PKC-zeta外的所有亚型均被1 microM PDBU下调24小时,表明PKC-zeta负责血管紧张素II介导的ERK1/2活化。为了应对angII,PKC-zeta与Ras相关,PKC-zeta与抗H-Ras抗体共同沉淀。为了进一步表征PKC-zeta的作用,通过反义PKC-zeta-寡核苷酸转染特异性地耗尽PKC-zeta蛋白。反义PKC-zeta寡核苷酸处理显著降低PKC-zeta-蛋白表达(对其他PKC亚型无影响)和血管紧张素II介导的ERK1/2活化,呈浓度依赖性。相反,血小板衍生生长因子和佛波酯对ERK1/2的激活没有显著抑制。这些结果表明血管紧张素II与血管平滑肌细胞中PDGF和佛波酯的信号转导存在重要差异,并提示PKC-zeta和Ras在血管紧张素Ⅱ刺激ERK1/2中起关键作用。

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