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.1996年4月12日;271(15):8966-70.
doi:10.1074/jbc.271.15.8966。

淀粉样蛋白beta40和beta42在培养的人类神经元细胞内生成,并且随着成熟分泌增加

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淀粉样蛋白beta40和beta42在培养的人类神经元细胞内生成,并且随着成熟分泌增加

R S特纳等。 生物化学杂志. .
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摘要

先前的研究已经通过稳态代谢放射标记和免疫沉淀证实了人类胚胎癌细胞系(NT2)衍生的神经元(NT2N)中存在淀粉样β(Abeta)。我们在这里表明,Abeta存在于细胞内,因为4℃下完整NT2N细胞的胰蛋白酶消化并没有消除细胞裂解液中回收的Abeta。为了确定Abeta40和Abeta42是否在细胞内产生,使用COOH末端特异性抗Abeta单克隆抗体进行定量夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。夹心ELISA在NT2N细胞裂解液中以3:1的比例检测到细胞内Abeta40和A++beta42,而分泌的Abeta400和Abeta42在NT2N细胞条件培养基中以大约20:1的比例恢复。代谢稳态和脉冲相标记研究表明,培养基中细胞相关Abeta40/Abeta42的检测延迟了2小时,表明Abeta在分泌前以缓慢的速率在细胞内生成。最后,随着NT2N细胞在培养中的成熟,Abeta40和Abeta42的分泌在7周内增加了5倍以上。作为时间的函数,NT2N细胞中Abeta40/Abeta42分泌的这种增加可能会重现衰老大脑中的类似现象。

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