Use of an oriented peptide library to determine the optimal substrates of protein kinases

doi:10.1016/s0960-9822(00)00221-9

.1994年11月1日；4(11):973-82.

doi:10.1016/s0960-9822（00）00221-9。

利用定向肽库确定蛋白激酶的最佳底物

Z宋阳¹, S Blechner公司, N霍格兰, M F霍克斯特拉, H褐飞虱, L C坎特利

附属公司

PMID： 7874496
内政部： 10.1016/s0960-9822（00）00221-9

利用定向肽库确定蛋白激酶的最佳底物

Z松阳等。当前生物. 1994.

.1994年11月1日；4(11):973-82.

doi:10.1016/s0960-9822（00）00221-9。

作者

Z宋阳¹, S Blechner公司, N霍格兰, M F霍克斯特拉, H褐飞虱, L C坎特利

附属

¹马萨诸塞州波士顿Beth Israel医院信号转导科，邮编：02215。

PMID： 7874496
内政部： 10.1016/s0960-9822（00）00221-9

摘要

背景：蛋白激酶磷酸化是控制细胞内过程的一种重要的一般机制，在调节细胞生长的信号转导途径中发挥着重要作用，以响应细胞外信号。大量的蛋白激酶已经被发现，其生物靶点的识别仍然是一个非常活跃的研究领域。蛋白激酶必须具有适当的底物特异性，以确保信号正确传递。以前的研究已经证明了底物蛋白中的一级序列在确定蛋白激酶特异性方面的重要性，但缺乏有效的识别这些序列的方法。

结果：我们开发了一种新的技术，利用25亿多肽底物定向文库来测定蛋白激酶的底物特异性。在这种方法中，最佳底物的一致序列是通过测序在与感兴趣的激酶短暂反应期间生成的产物混合物来确定的。该技术预测的cAMP依赖性蛋白激酶（PKA）的最佳底物与已知PKA底物的序列一致。预测的细胞周期素依赖性激酶（CDKs）细胞周期素B-Cdc2和细胞周期素A-CDK2的最佳序列也与这些激酶在体内磷酸化的位点一致。此外，我们确定了SLK1的最佳底物，SLK1是迄今为止未知底物特异性的STE20蛋白丝氨酸激酶的同源物。我们还讨论了一个模型，该模型将最佳细胞周期蛋白B-Cdc2底物并入该激酶的已知晶体结构中。

结论：使用我们开发的新技术，可以快速预测蛋白激酶的序列特异性，并且可以根据这些信息确定激酶的潜在靶点。

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