跳到主页面内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2014年5月15日；5(9):2853-63.
doi:10.18632/目标1854。

硒代半胱氨酸（一种调节ROS介导信号的协同剂）增强阿霉素对人肝细胞癌的治疗效果的策略

Cundong Fan公司 1, 郑文杰, 傅晓燕, 李晓玲, 黄玉成, 陈天峰
附属公司

硒代胱氨酸（一种调节ROS介导的信号传导的增效剂）增强阿霉素对人肝细胞癌治疗效果的策略

Cundong Fan公司等人。 Oncotarget公司. .

摘要

以阿霉素为基础的化疗是抗击人类癌症的最有效方法之一。然而，其临床应用受到严重副作用的限制。硒代半胱氨酸（SeC）是一种天然有效的硒氨基酸，具有新颖的抗癌功效。在本研究中，我们使用SeC使HepG2人肝细胞癌（HCC）细胞对DOX敏感，并在体内外实现抗癌协同作用。DOX剂量依赖性治疗通过启动细胞凋亡和强烈的G2/M期细胞周期阻滞降低HepG2细胞活力。机理研究表明，SeC对DOX的敏化是通过激活ERK和AKT的失活以及通过活性氧（ROS）过度产生引起DNA损伤来实现的。ERK和AKT抑制剂的预处理显著增强了联合治疗诱导的细胞杀伤，表明联合治疗以ERK-和AKT依赖的方式诱导HCC细胞杀伤。此外，抑制ROS可有效减轻联合治疗诱导的DNA损伤以及ERK和AKT的失活。此外，通过在体内诱导细胞凋亡，联合治疗也有效抑制了异种移植肝细胞癌的生长。综上所述，我们的结果表明，联合使用SeC和DOX的策略可能是实现抗肝癌协同作用的高效方法。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明，他们没有相互竞争的利益。

数字

图1
图1。SeC通过增强细胞内DOX摄取增强DOX诱导的HepG2细胞生长抑制
DOX（A）和SeC（B）对HepG2细胞的细胞毒性作用。HepG2细胞（2×10三细胞/孔）接种在96-well板中并预孵育24h。孵育后，用指示浓度的DOX处理细胞24h或用SeC处理细胞48h。用MTT法检测细胞活力。（C，D）联合治疗增强了SeC和DOX诱导的HepG2细胞生长抑制。用10μM SeC预处理细胞（0、2、4、8、12和24 h），并与100 nM DOX共同孵育24 h。用MTT法测定细胞活力。用荧光显微镜（C）和荧光微板阅读器（D）检测细胞内DOX摄取。用SeC 24 h和/或DOX预处理细胞24 h，并用荧光显微镜（放大倍率，100×）和荧光微孔板阅读器进行分析，如方法部分所述。不同特征的棒材在P<0.05水平上有统计学差异。
图2
图2。SeC或/和DOX诱导的细胞凋亡和细胞周期阻滞
A.DOX以剂量依赖的方式触发HepG2细胞中的G2/M细胞周期停滞。HepG2细胞用10μM SeC预处理24小时，用100 nM DOX联合处理24小时。收集处理后的细胞，70%乙醇固定后用PI溶液染色。然后用流式细胞仪分析细胞。通过量化亚G1峰来测量亚二倍体DNA含量的凋亡细胞。凋亡细胞（C）和细胞周期群体（E和F）的统计分析。D.半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3活性。对处理后的细胞进行裂解，并使用细胞蛋白使用特定荧光底物测定caspase-3活性。
图3
图3。ERK和AKT通路在联合治疗诱导HepG2细胞生长抑制中的作用
A.SeC协同DOX诱导的ERK和AKT失活。免疫印迹法检测保护性表达。简单地说，用10μM SeC预处理HepG2细胞24小时，并用100 nM DOX联合处理24小时。然后用SDS-PAGE分离细胞和总蛋白，并用特定的一级抗体进行免疫印迹。通过剥离免疫印迹和重制β-肌动蛋白来确认等负荷。B.ERK（U0126）和AKT（LY294002）抑制剂增强联合治疗诱导的对HepG2细胞的生长抑制。在与SeC和DOX联合处理之前，用10μM U0126或10μM LY294002预处理细胞1h。MTT法检测细胞活力。C.SeC对HepG2细胞中p-AKT和p-ERK表达的时间依赖性影响。D.AKT抑制剂（LY294002）增强联合治疗诱导的AKT失活。E.ERK抑制剂（U0126）增强联合治疗诱导的ERK失活。
图4
图4。SeC通过ROS过度产生协同DOX诱导的DNA损伤
A.SeC增强DOX诱导的ROS积累。HepG2细胞（105个细胞/孔）用10μM SeC预处理1h，再与100 nM DOX共孵育1h，然后用荧光探针DCFH-DA.B.测定ROS生成的时间进程。SeC增强DOX诱导的p53和组蛋白磷酸化。用10μM SeC预处理HepG2细胞24 h，并用100 nM DOX联合处理24 h。然后对细胞进行裂解，并用western blotting方法检测蛋白表达。C.抑制ROS可提高联合治疗诱导的细胞活力。在联合治疗前，用5 mM GSH或NAC预处理细胞2 h。台盼蓝染色用于量化细胞死亡。补充D.GSH可以减轻DOX诱导的DNA损伤以及ERK和AKT的失活。蛋白质表达用western blotting法检测。
图5
图5。SeC增强DOX诱导的肿瘤异种移植物生长抑制
联合治疗抑制裸鼠HepG2人肝癌移植瘤的肿瘤体积（A，B）和肿瘤重量（C），但不影响小鼠的体重（D）。
图6
图6。联合治疗在体内引发DNA损伤和ERK和AKT失活
A.通过体内蛋白质印迹检测蛋白质表达。B.HE和IHC法对异种移植瘤进行染色。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Cervello M、McCubrey JA、Cusimano A、Lampiasi N、Azzolina A、Montalto G。肝细胞癌的靶向治疗：即将出现的新药物。Oncotarget公司。2012;3(3):236–260.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Lee JS，Hong EK。猴头菌增强阿霉素诱导的人肝癌细胞凋亡。癌症快报。2010;297(2):144–154.-公共医学
    1. Llove JM、Burroughs A、Bruix J.肝细胞癌。柳叶刀。2003;362(9399):1907–1917.-公共医学
    1. Noto A、De Vitis C、Roscilli G、Fattore L、Malpicci D、Marra E等。与抗ErbB3单克隆抗体和EGFR TKIs联合治疗可有效抑制非小细胞肺癌。Oncotarget公司。2013;4(8):1253–1265.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Llovet JM。肝细胞癌最新治疗方法。胃肠病学杂志。2005;40(3):225–235.-公共医学

出版物类型

MeSH术语