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1990年7月24日;29(29):6851-7。
doi:10.1021/bi00481a014。

前转化生长因子β1的前结构域在独立表达时是成熟生长因子的功能性结合蛋白

附属公司

前转化生长因子β1的前结构域在独立表达时是成熟生长因子的功能性结合蛋白

L E绅士等。 生物化学

摘要

转化生长因子β1(TGF-β1)是从390个氨基酸前体分子(称为前TGF-贝塔1)的羧基末端通过蛋白质水解获得的。先前的研究表明,前前TGF-β1的前体可能在形成一种无活性的潜在复合物中发挥重要作用。这些潜在形式被认为在TGF-β1活性的调节中很重要。为了更详细地了解这种潜在的复合物,我们在组织培养细胞中表达了不依赖于成熟生长因子的前TGF-β1的前结构域。通过将Arg-278密码子从CGA改为stop密码子TGA,将一个终止密码子基因工程到前TGF-beta 1的cDNA中。生成的蛋白质在成熟生长因子的氨基末端丙氨酸残基之前截短。瞬时表达研究和免疫印迹表明,该片段很容易被COS-1细胞制造和分泌;通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表达的前体的主要形式表现为二硫键二聚体(Mr 80000)。利用水貂肺指示细胞进行的生物测定表明,前结构域与外源性添加的成熟TGF-β1形成一种非活性复合物。用热或酸处理该复合物会导致活性TGF-β1的释放,表明其体外结构类似于天然潜伏TGF-α1复合物。TGF-β1的前体也被发现与两个密切相关的家族成员TGF-α1.2和TGF-γ2形成潜在结构

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