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.2013年10月;135(2):380-9.
doi:10.1093/toxsci/kft158。 Epub 2013年7月28日。

GSK-3β的丝氨酸9和酪氨酸216磷酸化在获得性镉抗性中差异调节自噬

附属公司

GSK-3β的丝氨酸9和酪氨酸216磷酸化在获得性镉抗性中差异调节自噬

中云公园等。 毒物科学. 2013年10月.

摘要

糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)在细胞凋亡的调控中起着重要作用。为了研究其在获得性镉(Cd)抗性中的作用,从H460肺癌细胞中建立了Cd抗性细胞(RH460)。镉抗性导致细胞凋亡和自噬的中断,这由凋亡的G1亚群、procaspase-3裂解和LC3-II诱导决定。根据3-甲基腺嘌呤或zVAD和镉处理后的时间过程实验,镉诱导的自噬先于细胞凋亡。尽管β-catenin积累,但在治疗后12小时,细胞核内磷酸化(p)-Ser/Tyr GSK-3α/β增加,然后p-Ser部分移位到细胞质。GSK-3抑制剂锂增强Cd诱导的p-Ser GSK-3α/β,其在细胞核和细胞质中积聚,并增加自噬。SB216763抑制对Ser/p-Tyr GSK-3α/β和随后的自噬。GSK-3β敲除降低Cd诱导的自噬。镉暴露于RH460细胞后,pcDNA-GSK-3β-HA过度表达,Ser(9)/Tyr(216)残基强烈磷酸化,LC3-II降低。组分活性pcDNA-GSK-3β(S9A)-HA过表达磷酸化Tyr(216)并降低LC3-II,表明对-Tyr抑制自噬。PI3K抑制剂可降低Cd诱导的p-Ser GSK-3αβ和LC3-II,而Ser/Thr磷酸酶抑制剂冈田酸可降低积聚在细胞核和胞浆中的高磷酸化Ser残基,并增强LC3-II。一般酪氨酸激酶抑制剂genistein抑制Cd诱导的对-Tyr/p-Ser GSK-3α/β和LC3-II。小鼠肺组织对长期镉暴露增加的对-Tyr、下调的LC3-II和积累的全长Bax和procaspase-3作出反应。综上所述,本研究表明,获得性镉抗性受GSK-3β磷酸化状态而非激活状态的调节,p-Ser GSK-3的胞内定位调节镉诱导的自噬和凋亡。

关键词:自噬;镉;糖原合成酶激酶-3;肺。;阻力。

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