跳到主页面内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2012;7（7）：e41506。
doi:10.1371/journal.pone.0041506。 Epub 2012年7月31日。

神经转录因子诱导人脑胶质瘤细胞向神经元转化并抑制肿瘤发生

赵俊丽 1, 华和, 周克春, 任永刚, 紫霄石, 吴志远, 王仪征, 宜城路, Jianwei Jiao公司
附属公司

神经转录因子诱导人脑胶质瘤细胞向神经元转化并抑制肿瘤发生

赵俊丽等。 公共科学图书馆一号. 2012.

摘要

最近的研究表明，谱系特异性转录因子的过度表达导致不同细胞类型之间的细胞命运改变。例如，神经元可以由小鼠和人类成纤维细胞生成。众所周知，神经元是不分裂的终末分化细胞。因此，我们考虑如何通过引入转录因子来诱导胶质瘤细胞成为神经元。在这里，我们描述了通过感染三种转录因子：Ascl1、Brn2和Ngn2（ABN），从胶质瘤细胞中高效生成诱导神经元（iN）细胞。iN细胞表达多种神经元标记物和激发动作电位，类似于真实神经元的特性。重要的是，在体外和体内实验中，ABN过度表达后胶质瘤细胞的增殖受到显著抑制。此外，来自人脑胶质瘤细胞的In细胞在分选和体外培养时没有继续生长。诱导胶质瘤细胞成为神经元的策略可用于临床研究抑制肿瘤生长的方法。

PubMed免责声明

利益冲突声明

竞争利益：提交人声明，不存在相互竞争的利益。

数字

图1
图1。人脑胶质瘤细胞向神经元的诱导。
A、 B，感染Asc1、Brn2和Ngn2后13天，原代人脑胶质瘤细胞（GBM-1，-2）表达神经元蛋白Tuj1并显示神经元形态。根据Tuj1阳性细胞估算iN细胞生成效率。C类，过表达ABN诱导U251人脑胶质瘤细胞向神经元分化。D类，通过过度表达ABN诱导U87人脑胶质瘤细胞向神经元分化。E、 F、G、H，从原代GBM-1、GBM-2、U251和U87细胞诱导的iN细胞的定量。比例尺：100µm。误差条显示±标准偏差。
图2
图2。从人类神经胶质瘤细胞转化的iN细胞的特征。
A类感染ABN 13天后，GBM-1原代人脑胶质瘤细胞被有效诱导为神经元，并表达神经元蛋白Tuj1和MAP2。B、 C、D感染ABN三周后，iN细胞表达成熟的神经元蛋白Neurofilament、NeuN和Synapsin。E、 F、G、HGBM-2原代人脑胶质瘤细胞表达神经元蛋白Tuj1、MAP2、Neurofilament、NeuN和Synapsin。比例尺：25µm。
图3
图3。原代人脑胶质瘤细胞iN细胞的生理特性。
A类，控制胶质瘤细胞中动作电位（左）和电压依赖性膜电流（右）的代表性痕迹。B类，感染后23天in细胞中动作电位（左）和电压门控膜电流（右）的代表性痕迹。C类，感染后33天in细胞中动作电位（左）和电压门控膜电流（右）的代表性痕迹。D类，不同组电流密度的量化（对照组，n=4；iN，23天，n=6，33天，n=3）。E类，通过斜坡协议测量的代表性电流轨迹。F、 G公司，输入电阻的量化（控制，n=4；iN，23天，n=6，33天，n=3）和膜电位（对照，n=4；iN，23天，n=6，33天，n=3）。*：p<0.05，**：与对照组相比p<0.01。误差条表示±标准偏差。比例尺：25µm。
图4
图4。ABN神经转录因子抑制胶质瘤细胞增殖。
A类在感染ABN或对照病毒后2、3或4天对原发性胶质瘤细胞进行计数。细胞数量标准化为第0天的细胞数。B类在感染ABN或对照病毒后2、3或4天对U251细胞进行计数。C类在感染ABN或对照病毒后2、3或4天对U87细胞进行计数。数据代表六个独立的实验。D类从感染突触素的原代人脑胶质瘤细胞（GBM-1）中分离出Synpasin阳性细胞。将突触蛋白阳性细胞分选出来并培养1、3、5或7天。突触蛋白阳性的iN细胞没有完全生长*P<0.05。数据表示为平均值±标准差。
图5
图5。ABN神经元转录因子在长期培养后抑制神经胶质瘤细胞集落的形成，并导致细胞周期停滞在G0/G1。
A类用ABN和对照病毒感染原代胶质瘤细胞。感染后第三天，细胞以低密度镀膜并培养2周。结晶紫染色观察菌落，OD595测定菌落密度。B类用ABN和对照病毒感染U251细胞。C类用ABN和对照病毒感染U87细胞。数据代表六个独立的实验。D类，在感染ABN三天后分析原发性胶质瘤细胞的细胞周期分布。细胞与最终浓度为10 g/ml的碘化丙啶孵育。室温孵育1 h后，用FACS分析细胞周期分布情况。E类检测并分析U251细胞周期分布。F类，检测并分析U87细胞周期分布*P<0.05。数据以平均值±标准偏差表示，比例尺：1 mm。
图6
图6。脑胶质瘤细胞移植后，ABN神经转录因子延长小鼠存活时间。
A类，裸鼠脑内移植5×105脑胶质瘤细胞感染ABN或对照病毒。在胶质瘤移植后1周或3周，通过MRI获得具有代表性的肿瘤图像。B类，对肿瘤大小进行量化和分析。C类收集脑切片，HE染色。D类，通过Kaplan-Meier分析评估裸鼠（每种情况下n=6只）的存活率。从ABN处理的胶质瘤细胞中携带胶质瘤的小鼠存活时间长于那些来自对照处理细胞的小鼠*P<0.05。误差条表示±s.d.比例尺：2 mm（6A），900µm（6C）。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Dell'Albani P（2008）胶质瘤中的干细胞标记物。神经化学研究33:2407–2415。-公共医学
    1. Sukhdeo K、Hambardzumyan D、Rich JN（2011）《胶质瘤的发展：哪里出了问题？》？手机146:187-188。-公共医学
    1. Behin A、Hoang-Xuan K、Carpentier AF、Delatter JY（2003）《成人原发性脑肿瘤》。柳叶刀361:323–331。-公共医学
    1. Norden AD，Drappatz J，Wen PY（2009），高级胶质瘤的抗血管生成治疗。《Nat Rev Neurol》5:610–620。-公共医学
    1. Hadziahmetovic M，Shirai K，Chakravarti A（2011）胶质瘤多模式治疗的最新进展。未来Oncol 7:1169–1183。-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

MeSH术语

赠款和资金

这项工作得到了973计划（2011CBA00402，J.J.）、中国科学院“战略优先研究计划”（XDA01020301，J.J）、国家自然科学基金（30930094，Y.L.）和百人计划（J.J。资助者在研究设计、数据收集和分析、出版决定或手稿准备方面没有任何作用。