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.1990年6月5日;265(16):9264-71.

T细胞系Jurkat中截短O-聚糖的生物合成。O-聚糖起始的定位

附属公司
  • PMID: 2140570
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T细胞系Jurkat中截短O-聚糖的生物合成。O-聚糖起始的定位

V Piller公司等。 生物化学杂志. .
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摘要

发现来自人类T白血病细胞Jurkat的糖蛋白与来自鼠尾草种子的GalNAcα1——Ser/Tr特异性凝集素结合。免疫纯化白细胞糖苷(Jurkat细胞裂解液中主要的[3H]葡萄糖胺标记糖蛋白)的O-连接糖的分析显示,主要存在GalNAcα1---Ser/Thr,只有少量(约17%)更复杂的O-聚糖。对参与O-连接碳水化合物生物合成的Jurkat和K562细胞糖基转移酶的比较表明,UDP-Gal:GalNAcα1---Ser/Thr-beta 1---3半乳糖转移酶活性显著降低,这显然是Jurkat细胞系中存在截断O-聚糖的原因。O-糖基化缺陷使Jurkat细胞成为研究O-连接糖起始的理想模型。用[35S]蛋氨酸进行的脉冲相实验表明,将GalNAc添加到白细胞糖苷中是导致成熟糖蛋白在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳上流动性降低的原因。此外,无O-聚糖前体和完全O-糖基化形式之间的生物合成中间体不能用抗白细胞糖苷抗血清或GalNAc-特异性凝集素检测到。将追踪温度降低到15℃完全抑制了GalNAc向肽核的转移,这表明O-聚糖的起始发生在第一个高尔基体元件中,而不是内质网和高尔基体之间的过渡囊泡中。此外,用莫能菌素处理细胞并没有抑制GalNAc向白细胞糖苷载脂蛋白的转移。这些结果表明,Jurkat细胞中O-糖基化的启动始于顺高尔基堆积。

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