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.1991年7月;60(1):149-59.
doi:10.1016/S0006-3495(91)82038-0。

模拟蛋白激酶C假底物区的肽与膜中的酸性脂质结合

附属公司

模拟蛋白激酶C假底物区的肽与膜中的酸性脂质结合

M Mosor先生等。 生物物理学J. 1991年7月.

摘要

蛋白激酶C(PKC)的细胞质形式是非活性的,可能是因为其调节域中的假底物区域阻断了其激酶域中的底物结合位点。钙离子导致细胞膜移位:最大程度的活化需要负脂质,如磷脂酰丝氨酸(PS)和中性脂质二酰甘油(DAG),但PS和DAG激活PKC的机制尚不清楚。PKC-β的假底物区19-36有六个碱性和一个酸性氨基酸,19-29有五个碱性和非酸性氨基酸。由于假底物区域的碱性残基与膜中的酸性脂质的任何结合都会稳定PKC的活性形式,因此我们研究了氨基酸相当于PKC-β残基19-36和19-29的肽是如何与磷脂囊泡结合的。我们进行了平衡透析、过滤和电泳迁移率测量。结合肽的分数是膜中负脂质摩尔分数的陡峭S形函数,这是根据一个简单的理论模型预测的,该模型假设基本残基提供相同的独立结合位点。对于在0.1 M KCl中形成的含25%负脂质的膜,结合肽/面积的数量与体水相中肽的浓度之间的比例常数为1微米。等效地,肽与膜的结合常数为10(4)M-1,或净结合能为6 kcal/mol。因此,假底物区的碱性残基与膜中酸性脂质的相互作用可以提供6 kcal-mol的自由能,以稳定PKC的活性形式。

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