Autophagy mitigates metabolic stress and genome damage in mammary tumorigenesis

doi:10.1101/gad.1565707

.2007年7月1日；21(13):1621-35.

doi:10.10101/gad.1565707。

自噬减轻乳腺肿瘤发生中的代谢应激和基因组损伤

瓦西里基·卡兰扎·沃德沃思¹, 希亚姆·帕特尔, 奥尔加·克拉夫丘克, 陈光华, 罗宾·马修, 盛侃金, 艾琳·怀特

附属公司

PMID： 17606641
预防性维修识别码：项目经理1899472
内政部： 10.1101/加元1565707

自噬减轻乳腺肿瘤发生中的代谢应激和基因组损伤

瓦西里基·卡兰扎·沃德沃思等。基因开发. 2007.

.2007年7月1日；21(13):1621-35.

doi:10.1101/gad.1565707。

作者

瓦西里基·卡兰扎·沃德沃思¹, 希亚姆·帕特尔, 奥尔加·克拉夫丘克, 陈光华, 罗宾·马修, 盛侃金, 艾琳·怀特

附属

¹美国新泽西州皮斯卡塔韦市罗伯特·伍德·约翰逊医学院新泽西医科大学内科内科肿瘤科，邮编08854。

PMID： 17606641
预防性维修识别码：项目经理1899472
内政部： 10.1101/加元1565707

摘要

自噬是一个分解代谢过程，涉及细胞器在饥饿期间的自我消化，作为细胞生存的一种手段；然而，如果它继续完成，自噬会导致细胞死亡。自噬也是乳腺肿瘤发生的一种单倍体抑癌机制，因为在乳腺癌中，必需的自噬调节因子beclin1是单等位基因缺失的。然而，自噬抑制乳腺癌的机制仍不清楚。在这里，我们发现beclin1的等位基因丢失和缺陷的自噬使乳腺上皮细胞对代谢应激敏感，并加速了乳腺腺泡腔的形成。自噬缺陷还激活体外和体内乳腺肿瘤中的DNA损伤反应，促进基因扩增，并与缺陷凋亡协同促进乳腺肿瘤的发生。因此，我们认为自噬限制了代谢应激以保护基因组，而有缺陷的自噬增加了DNA损伤和基因组不稳定性，最终促进了乳腺癌的进展。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
MMEC模型。(A类)在常规生长介质中对独立衍生的野生型iMMEC细胞系（WTA-D）中的E1A、p53DD、β-catenin、E-cadherin、CK8/18、Ep-CAM、ERα、β-casein和actin进行Western blot分析。(B)iBMK、永生化小鼠前列腺上皮细胞（iMPEC）和常规生长介质中iMMEC（WTA）中β-酪蛋白和肌动蛋白的Western blot分析。(C)相位对比度。(天)WTA细胞紧密连接蛋白的IF。(E类)内腔（CK8）和基底/肌上皮（CK14、CK5、SMA）标记物的WTA细胞IF。(F类)WTA细胞的泌乳刺激。(顶部面板）相位对比。(中部面板）β-酪蛋白IF复染。(底部面板）DAPI复染色。(*G公司*)红色油O染色。(*H（H）*)通过WTA腺泡中心的共焦横截面在常规3D形态发生培养基中生长12天，用催乳激素刺激2天，用β-酪蛋白（红色）和β-连环蛋白（绿色）进行免疫染色。WTA细胞在催乳刺激下形成的圆顶被一条黄线包围F类和*G公司*.

**图2。**
MMEC模型。(A类)Western blot显示iMMEC WTA衍生细胞系中稳定表达载体控制（V）、野生型HER2/neu（lanes）的蛋白质表达*1–7*)、H-Ras^第12版（车道*1–7*),*千里拉*-Akt（车道*1–7*)和Bcl-2（车道*1–7*). (B)通过在Matrigel中培养的WTA衍生细胞系表达载体（WTA.V）、Bcl-2（WTA.B1）、HER2/neu（WTA.H2）、Akt（WTA.A5）和H-Ras（WTA.R3）生成的乳腺腺泡延时视频捕捉到的7天3D形态发生的时间进程。(C)由上述细胞系产生的乳腺腺泡IFB图像为经β-连环蛋白（绿色）和活化caspase-3（红色）免疫染色的腺泡中心共聚焦横截面；细胞核用DAPI（蓝色）复染。图像代表了特定基因型在给定时间点的大多数腺泡，以及*右下角*每个框的角是腺泡形成管腔的百分比。(天)WTA衍生iMMEC细胞系的肿瘤生长动力学。(E类)H&E染色显示由细胞系产生的肿瘤B.

**图3。**
*贝克林1*杂合性损害自噬并增加乳腺上皮细胞对体外代谢应激的敏感性。(A类)Beclin1、E1A、p53DD、Bcl-2和肌动蛋白的Western blot分析*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−iMMEC细胞系。(B)荧光*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−具有Bcl-2（WT3.B3，BLN2.B4）并在代谢应激0、24和48小时后稳定表达EGFP-LC3的iMMEC。(C)代谢应激0、1、2和3d后稳定表达EGFP-LC3的WT3.B3和BLN2.B4中自噬（EGFP-LC3易位百分比）的定量。进行了三个独立的实验，给出了具有标准偏差的平均值。(天)的可行性*贝克林1^+/+*和*贝克林1^+/−*在代谢应激0、1、3和5天后，无Bcl-2和有Bcl-2的iMMEC。对每个基因型的四个独立细胞系进行了检测，并给出了具有标准偏差的平均值。(E类)激活caspase-3蛋白的Western blot分析*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−不含（WT3，BLN2）和含（WT3.B3，BLN2.B4）Bcl-2的iMMEC对体外代谢应激的反应。(F类)2至5天延时视频中的相同帧*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−代谢应激下无（WT3，BLN2）和有（WT3.B3，BLN2.B8）Bcl-2的iMMEC细胞系。(*G公司*,*H（H）*)克隆存活率*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−暴露于代谢应激12天后，iMMEC表达Bcl-2(*G公司*)代表性板材（WT3.B3、BLN2.8）。(*H（H）*)用标准差（SD）定量克隆存活率。*P（P）*-值由unparied计算t吨-测试和仅为具有统计意义的结果提供。

**图4。**
在3D形态发生分析中*贝克林1*加速中央腺泡细胞的死亡，代谢应激和自噬定位于此，并与DNA损伤反应激活有关。(A类)乳腺腺泡IF由*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−无（WT3，BLN2）和Bcl-2（WT3.B3，BLN2.B8）的iMMEC细胞系在Matrigel中培养。Acini用β-catenin（绿色）和活化caspase-3（红色）进行免疫染色；细胞核用DAPI（蓝色）复染。表达Bcl-2的iMMEC形成的腺泡腔中淡红的颜色代表活化caspase-3染色的背景水平。图像代表了特定基因型在给定时间点的大多数腺泡，以及*右下角*每个框的角代表腺泡形成管腔的百分比。(B)WT3.B3和BLN2.B8细胞形成的腺泡上的低氧探针IHC和IF（绿色代表低氧探针，蓝色代表细胞核）。通过共焦显微镜观察由*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−具有Bcl-2（WT3.B3，BLN2.B8）并稳定表达EGFP-LC3的iMMEC。由WT3.B3和BLN2.B4细胞形成的腺泡上的γ-H2AX IHC。(C,天)健康与环境(C)和电子显微镜*（D）*关于由*贝克林1^+/+*和*贝克林1^+/−*不带（WT3，BLN2）和带（WT3.B3，BLN2.B8）Bcl-2的iMMEC。（N）坏死细胞；（TGC）非整倍体肿瘤巨细胞；（五十）流明。

**图5。**
等位基因缺失*贝克林1*促进体内肿瘤中乳腺肿瘤的发生和DNA损伤反应的激活。(A类)肿瘤生长动力学*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−无Bcl-2和有Bcl-2的iMMEC细胞系。(B)肿瘤中的自噬定位于代谢应激区域。健康与环境(左边柱）和缺氧探针IHC(*中间的*第1天肿瘤由*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−具有Bcl-2的iMMEC（WT3.B3、BLN2.B8）。在第1天，通过共聚焦显微镜用EGFP-LC3荧光监测由*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−具有Bcl-2（WT3.B3，BLN2.B8）并稳定表达EGFP-LC3的iMMEC；呈现的区域(*正确的*柱状）位于健康细胞边缘和坏死中心之间的低氧暴露区域。(C,天)肿瘤来源于*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−在原位植入术后第15、22和36天，切除含有Bcl-2（WT3.B3、BLN2.B8）的iMMEC，并通过H&E染色进行比较*（C）*和γ-H2AX IHC（D）.插入在里面*左上角*面板，共个天代表正常的乳腺。

**图6。**
等位基因缺失*贝克林1*通过体外基因扩增促进耐药。(A类,B)用PALA电阻的标准偏差（SD）定量*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−用5×LD的PALA处理Bcl-2的iMMEC₅₀. TheP（P）-值是通过未配对计算的t吨-测试。(C)来自独立PALA的几个稳定细胞系基因组DNA的PCR^R（右）使用引物对CAD基因800-bp片段进行克隆。(天)*贝克林1*^+/+和*贝克林1*^+/−具有Bcl-2（WT3.B3，BLN2.B4）的iMMEC，在LD下经PALA处理0、24和48小时后稳定表达EGFP-LC3₅₀. (左侧面板）荧光（F）。(赖特面板）γ-H2AX IF(E类)在LD处理0、24和48小时PALA后，WT3.B3和BLN2.B4稳定表达EGFP-LC3₅₀. (左侧面板）自噬的定量（EGFP-LC3易位的百分比）。(赖特面板）γ-H2AX活化定量（γ-H2AX-阳性细胞百分比，作为亮红色细胞核的细胞数量/细胞总数）。进行了三个独立的实验，给出了具有标准偏差的平均值。*P（P）*-值由unparied计算t吨-测试。(F类)Western blot分析WT3.B3和BLN2.B4中稳定表达EGFP-LC3的γ-H2AX、GRP-78和肌动蛋白在LD处理0、24和48小时后的表达₅₀.

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

ERBB2过度表达抑制应激诱导的自噬，并使ERBB2诱导的乳腺肿瘤发生独立于单等位基因Becn1缺失。
Lozy F、Cai-McRae X、Teplova I、Price S、Reddy A、Bhanot G、Ganesan S、Vazquez A、Karantza V。 Lozy F等人。自噬。2014年4月；10(4):662-76. doi:10.4161/auto.27867。Epub 2014年1月30日。自噬。2014 PMID：24492513 免费PMC文章。
自噬在癌症中的作用和调节。
陈N，Karantza-Wadsworth V。 Chen N等。 Biochim生物物理学报。2009年9月；1793(9):1516-23. doi:10.1016/j.bbamcr.2008.12.013。Epub 2009年1月2日。 Biochim生物物理学报。2009 PMID：19167434 免费PMC文章。审查。
自噬在乳腺癌中的作用。
Karantza-Wadsworth V，White E。 Karantza-Wadsworth V等人。自噬。2007年11月至12月；3(6):610-3. doi:10.4161/auto.4867。Epub 2007年8月14日。自噬。2007 PMID：17786023 免费PMC文章。
自噬通过限制染色体不稳定性抑制肿瘤进展。
Mathew R、Kongara S、Beaudoin B、Karp CM、Bray K、Degenhardt K、Chen G、Jin S、White E。 Mathew R等人。基因开发，2007年6月1日；21(11):1367-81. doi:10.1101/gad.1545107。Epub 2007年5月17日。基因开发，2007年。 PMID：17510285 免费PMC文章。
自噬在癌症中的作用：代谢应激的管理。
Jin S、White E。 Jin S等人。自噬。2007年1月至4月；3(1):28-31. doi:10.4161/auto.3269。Epub 2007年1月3日。自噬。2007 PMID：16969128 免费PMC文章。审查。

查看所有类似文章

引用人

miRNA-介导的自噬在卵巢癌中的新作用。
丁毅，黄旭，季涛，齐C，高旭，魏瑞。丁毅等。细胞死亡疾病。2024年5月3日；15(5):314. doi:10.1038/s41419-024-06677-8。细胞死亡疾病。2024 PMID：38702325 免费PMC文章。审查。
超越自噬：癌症中自噬分子出现的自噬独立功能（综述）。
Tedesco G、Santarosa M、Maestro R。 Tedesco G等人。国际癌症杂志。2024年6月；64(6):57. doi:10.3892/ijo.2024.5645。Epub 2024年4月12日。国际癌症杂志。2024 PMID：38606507 免费PMC文章。审查。
细胞死亡，任何其他名称…。
坎杜兹M。坎杜兹M。细胞。2024年2月10日；13(4):325. doi:10.3390/细胞13040325。细胞。2024 PMID：38391938 免费PMC文章。审查。
赖氨酸去甲基酶5C抑制prefoldin亚基5的转录，激活c-Myc信号转导和结直肠癌进展。
于菲、李莉、顾毅、王S、周莉、程X、江H、黄Y、张Y、钱伟、李X、刘Z。 Yu F等人。《分子医学》2024年1月12日；30(1):9. doi:10.1186/s10020-023-00775-7。《分子医学》，2024年。 PMID：38216914 免费PMC文章。
研究自噬标记物LC3B之间的关联，SQSTM1/p62以及胶质瘤中的DRAM和自噬相关基因。
丹麦语F、Qureshi MA、Mirza T、Amin W、Sufiyan S、Naeem S、Arshad F、Mughal N。丹麦语F等人。国际分子科学杂志。2024年1月1日；25（1）:572。doi:10.3390/ijms25010572。国际分子科学杂志。2024 PMID：38203743 免费PMC文章。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Abedin M.J.、Wang D.、McDonnell M.A.、Lehmann U.、Kelekar A.、Wang D、McDonnell M.A.、莱曼U.、凯莱卡A.、麦克唐纳M.A.、雷曼U.，凯莱卡A..、凯雷卡A.、凯莱卡A.。自噬延缓DNA损伤后乳腺癌细胞的凋亡死亡。细胞死亡不同。2007;14:500–510.-公共医学
1. Aita V.M.、Liang X.H.、Murty V.V.、Pincus D.L.、Yu W.、Cayanis E.、Kalachikov S.、Gilliam T.C.、Levine B.、Liange X.H、Murty V.V.，Pincus D.L.、Yu W.，Cayanis E.、Kalacikov S..、Gillian T.C.、Murty-V.、平卡斯D.L.，Yu W.Cayanis E.、Kalaschikov S.、Gillaam T.C。，Levine B.、Yu W.、Cayanis E.、Kalachikov S.、Gilliam T.C.、Levine B.，Cayanis E.、Kala奇科夫S.、吉利亚姆T.C.、莱文B.、卡拉奇科夫S.、Gillam T.C.、列文B.、Gillian T.C.、Levine B.、列文B。染色体17q21上候选抑癌基因beclin 1的克隆和基因组组织。基因组学。1999年；59:59–65.-公共医学
1. Albertson D.G.癌症中的基因扩增。趋势Genet。2006;22:447–455.-公共医学
1. Albertson D.G.、Collins C.、McCormick F.、Gray J.W.、Collins C.、McCormick F.、Gray J.W.、McCormick F.、Gray J.W.、Gray J.W.实体瘤中的染色体畸变。自然遗传学。2003;34:369–376.-公共医学
1. Al-Kuraya K.、Schraml P.、Torhorst J.、Tapia C.、Zaharieva B.、Novotny H.、Spichtin H.、Maurer R.、Mirlacher M.、Kochli O.、Schram P.、托尔霍斯特J.、塔皮亚C.、扎哈里耶娃B.、诺沃特尼H.、斯皮希丁H.、莫雷尔R.、米拉切尔M.、科奇利O.、托尔赫斯特J.，Tapia C.、Zahrieva、Novottny H.、施皮希廷H.、莫里、米拉歇尔M.、科奇里O.、塔皮亚C。，Zaharieva B.、Novotny H.、Spichtin H.、Maurer R.、Mirlacher M.、Kochli O.、Zaharievea B.、Novotny H、Spichin H.、Mirer R.、米拉赫M.、科奇利O.、Novottny H.、斯皮希丁H.、毛瑞尔R.、米拉赫M.、科奇里O.、毛瑞尔·、米拉赫M。乳腺癌基因扩增和共扩增的预后相关性。癌症研究2004；64:8534–8540.-公共医学

出版物类型

行动
行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动
行动
行动
行动

赠款和资金

LinkOut-更多资源

[1] Abedin M.J.、Wang D.、McDonnell M.A.、Lehmann U.、Kelekar A.、Wang D、McDonnell M.A.、莱曼U.、凯莱卡A.、麦克唐纳M.A.、雷曼U.，凯莱卡A..、凯雷卡A.、凯莱卡A.。自噬延缓DNA损伤后乳腺癌细胞的凋亡死亡。细胞死亡不同。2007;14:500–510.-公共医学

[2] Abedin M.J.、Wang D.、McDonnell M.A.、Lehmann U.、Kelekar A.、Wang D、McDonnell M.A.、莱曼U.、凯莱卡A.、麦克唐纳M.A.、雷曼U.，凯莱卡A..、凯雷卡A.、凯莱卡A.。自噬延缓DNA损伤后乳腺癌细胞的凋亡死亡。细胞死亡不同。2007;14:500–510.-公共医学

[3] Aita V.M.、Liang X.H.、Murty V.V.、Pincus D.L.、Yu W.、Cayanis E.、Kalachikov S.、Gilliam T.C.、Levine B.、Liange X.H、Murty V.V.，Pincus D.L.、Yu W.，Cayanis E.、Kalacikov S..、Gillian T.C.、Murty-V.、平卡斯D.L.，Yu W.Cayanis E.、Kalaschikov S.、Gillaam T.C。，Levine B.、Yu W.、Cayanis E.、Kalachikov S.、Gilliam T.C.、Levine B.，Cayanis E.、Kala奇科夫S.、吉利亚姆T.C.、莱文B.、卡拉奇科夫S.、Gillam T.C.、列文B.、Gillian T.C.、Levine B.、列文B。染色体17q21上候选抑癌基因beclin 1的克隆和基因组组织。基因组学。1999年；59:59–65.-公共医学

[4] Aita V.M.、Liang X.H.、Murty V.V.、Pincus D.L.、Yu W.、Cayanis E.、Kalachikov S.、Gilliam T.C.、Levine B.、Liange X.H、Murty V.V.，Pincus D.L.、Yu W.，Cayanis E.、Kalacikov S..、Gillian T.C.、Murty-V.、平卡斯D.L.，Yu W.Cayanis E.、Kalaschikov S.、Gillaam T.C。，Levine B.、Yu W.、Cayanis E.、Kalachikov S.、Gilliam T.C.、Levine B.，Cayanis E.、Kala奇科夫S.、吉利亚姆T.C.、莱文B.、卡拉奇科夫S.、Gillam T.C.、列文B.、Gillian T.C.、Levine B.、列文B。染色体17q21上候选抑癌基因beclin 1的克隆和基因组组织。基因组学。1999年；59:59–65.-公共医学

[5] Albertson D.G.癌症中的基因扩增。趋势Genet。2006;22:447–455.-公共医学

[6] Albertson D.G.癌症中的基因扩增。趋势Genet。2006;22:447–455.-公共医学

[7] Albertson D.G.、Collins C.、McCormick F.、Gray J.W.、Collins C.、McCormick F.、Gray J.W.、McCormick F.、Gray J.W.、Gray J.W.实体瘤中的染色体畸变。自然遗传学。2003;34:369–376.-公共医学

[8] Albertson D.G.、Collins C.、McCormick F.、Gray J.W.、Collins C.、McCormick F.、Gray J.W.、McCormick F.、Gray J.W.、Gray J.W.实体瘤中的染色体畸变。自然遗传学。2003;34:369–376.-公共医学

[9] Al-Kuraya K.、Schraml P.、Torhorst J.、Tapia C.、Zaharieva B.、Novotny H.、Spichtin H.、Maurer R.、Mirlacher M.、Kochli O.、Schram P.、托尔霍斯特J.、塔皮亚C.、扎哈里耶娃B.、诺沃特尼H.、斯皮希丁H.、莫雷尔R.、米拉切尔M.、科奇利O.、托尔赫斯特J.，Tapia C.、Zahrieva、Novottny H.、施皮希廷H.、莫里、米拉歇尔M.、科奇里O.、塔皮亚C。，Zaharieva B.、Novotny H.、Spichtin H.、Maurer R.、Mirlacher M.、Kochli O.、Zaharievea B.、Novotny H、Spichin H.、Mirer R.、米拉赫M.、科奇利O.、Novottny H.、斯皮希丁H.、毛瑞尔R.、米拉赫M.、科奇里O.、毛瑞尔·、米拉赫M。乳腺癌基因扩增和共扩增的预后相关性。癌症研究2004；64:8534–8540.-公共医学

[10] Al-Kuraya K.、Schraml P.、Torhorst J.、Tapia C.、Zaharieva B.、Novotny H.、Spichtin H.、Maurer R.、Mirlacher M.、Kochli O.、Schram P.、托尔霍斯特J.、塔皮亚C.、扎哈里耶娃B.、诺沃特尼H.、斯皮希丁H.、莫雷尔R.、米拉切尔M.、科奇利O.、托尔赫斯特J.，Tapia C.、Zahrieva、Novottny H.、施皮希廷H.、莫里、米拉歇尔M.、科奇里O.、塔皮亚C。，Zaharieva B.、Novotny H.、Spichtin H.、Maurer R.、Mirlacher M.、Kochli O.、Zaharievea B.、Novotny H、Spichin H.、Mirer R.、米拉赫M.、科奇利O.、Novottny H.、斯皮希丁H.、毛瑞尔R.、米拉赫M.、科奇里O.、毛瑞尔·、米拉赫M。乳腺癌基因扩增和共扩增的预后相关性。癌症研究2004；64:8534–8540.-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

自噬减轻乳腺肿瘤发生中的代谢应激和基因组损伤

附属

自噬减轻乳腺肿瘤发生中的代谢应激和基因组损伤

作者

附属

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

分子生物学数据库

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

分子生物学数据库