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.2007年7月;293(1):C55-63。
doi:10.1152/ajpcell.00330.2006。 Epub 2007年2月28日。

ASCT2沉默调节人肝癌细胞中哺乳动物靶向拉帕霉素的生长和生存信号

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ASCT2沉默调节人肝癌细胞中哺乳动物靶向拉帕霉素的生长和生存信号

布莱恩·C·富克斯等。 美国生理学杂志细胞生理学. 2007年7月.
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摘要

系统ASC氨基酸转运蛋白-2(ASCT2)先前被证明对人类肝癌细胞的生长和生存至关重要,因为其通过诱导的反义RNA表达沉默,通过一种超越其在氨基酸传递中作用的机制,在48小时内导致完全凋亡。为了从机理上了解癌肝细胞对ASCT2的依赖性,本研究的目的是确定其沉默对预测凋亡的生长和生存信号的早期后果。SK-Hep1细胞中诱导的反义ASCT2 RNA在6小时内导致ASCT2 mRNA抑制>90%,在8小时内抑制哺乳动物靶向罗帕霉素(mTOR)/猛禽(mTORC1)信号传导,表现为p70核糖体蛋白S6激酶-1和真核起始因子-4E(eIF4E)结合蛋白-1磷酸化减少,尽管帽结合蛋白eIF4G或细胞核糖体蛋白含量没有明显下降,但蛋白质合成率下降了近50%。mTORC1信号减弱发生在ASCT2活性显著降低之前,但与细胞ASCT2总蛋白下降30%相一致。ASCT2沉默后12小时,蛋白合成速率和ASCT2蛋白及活性进一步降低,每一个降低约50%,而mTOR/rictor(mTOR复合物-2;mTORC2)发出信号被丝氨酸473上的Akt/PKB激酶和丝氨酸136上的促凋亡底物Bad的磷酸化增强所刺激。这些结果表明,ASCT2沉默抑制了mTORC1向翻译机制的信号传导,随后是mTORC2启动的生存反应,从而在氨基酸转运蛋白表达和mTOR功能之间建立了联系。

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