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.2005年2月18日;280(7):5281-9.
doi:10.1074/jbc。M407236200。 Epub 2004年11月12日。

小分子热休克蛋白伴侣功能的机制:HSP27低聚物的解离是识别和结合不稳定的T4溶菌酶所必需的

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小分子热休克蛋白中伴侣功能的机制:HSP27低聚物的分离是识别和结合不稳定的T4溶菌酶所必需的

R Shashidharamurthy先生等。 生物化学杂志. .
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摘要

哺乳动物小热休克蛋白(sHSP)形成多分散的动态寡聚体,进行平衡的亚基交换。目前的伴侣活性模型假设,蛋白质非天然状态的识别和结合涉及寡聚状态的变化。等效热力学表示是一组三个耦合平衡,包括sHSP寡聚平衡、底物折叠平衡以及sHSP与底物非自然状态之间的平衡结合。为了验证这一假设并定义人类Hsp27的结合能力低聚物状态,我们扰动了前两个平衡,并定量地确定了结合的后果。底物是一组T4溶菌酶(T4L)突变体,它们在折叠状态优于展开状态10(2)-10(4)倍的条件下结合。Hsp27的浓度依赖性低聚物平衡受到突变的干扰,这些突变改变了两个主要低聚物状态的相对稳定性,包括磷酸化-小分子突变,这些突变导致在广泛浓度范围内分解为小多聚体。结合等温线与Hsp27低聚物平衡的尺寸排除色谱分析的相关性表明,多聚体是结合能态。结合通过两种模式发生,每种模式的特征是不同的亲和力和结合位点数量,并产生T4L。不同流体力学性质的Hsp27复合物。Hsp27磷酸化模拟物的突变逆转了低聚物大小的减少,也降低了T4L结合的程度。综上所述,这些结果表明寡聚体平衡在调节sHSP伴侣活性中起着核心作用。突变体识别对调节这种平衡很重要的序列特征。

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