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.2004年1月5日;3(1):43-50.
doi:10.1016/j.dnarep.2003.09.004。

哺乳动物成纤维细胞中钝性DNA双链断裂的端接是精确的,需要DNA-PK和XRCC4

附属公司

哺乳动物成纤维细胞中钝性DNA双链断裂的端接是精确的,需要DNA-PK和XRCC4

戴安娜·范·海姆斯特等。 DNA修复(Amst). .

摘要

非同源末端连接DNA双链断裂修复通常被认为是一种不精确的修复途径。为了研究哺乳动物成纤维细胞DNA中钝的5'磷酸化断裂的修复,我们使用大肠杆菌剪切粘贴型转座子Tn5。我们发现,在中国仓鼠细胞系中,Tn5转座子酶可以介导转座子切除。有趣的是,在野生型成纤维细胞中,钝性5'磷酸化断裂可以有效修复,而不会丢失核苷酸。DNA-dependent protein kinase(DNA-PK(CS))催化亚基缺陷使连接效率降低了四倍,但没有降低精确度,而Ku80或XRCC4突变细胞系的连接效率和准确性均受到影响。这些结果表明,NHEJ需要DNA-PK和XRCC4/连接酶IV复合物,而其他更容易出错的修复过程不能有效替代活细胞中产生的钝性断裂的连接。有趣的是,不同突变体之间末端连接缺陷的严重程度不同,这可能解释了在相应的小鼠模型中观察到的表型严重程度的差异。

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引用人

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