跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2003年12月3日；23(35):11270-8.
doi:10.1523/JNEUROSCI.23-35-1270.2003。

突触后密度（PSD）-95和Ca2+/钙调素依赖性蛋白激酶II在PSD的分布

詹妮弗·彼得森 1, 陈晓兵, 露西娅·维纳德, 艾斯·多塞梅西, 约翰·利斯曼, 托马斯·S·里斯
附属公司

突触后密度（PSD）-95和Ca2+/钙调素依赖性蛋白激酶II在PSD的分布

詹妮弗·彼得森等。 神经科学. .

摘要

突触后密度（PSD）包含调节突触传递的蛋白质。我们使用免疫金标记、旋转阴影和电子显微镜断层扫描，确定了钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II（CaMKII）和PSD-95在分离PSD三维结构中的位置。结果表明，所有PSD在突触后膜下都有一个中央网状结构。PSD-95的标签位于该网孔的细胞质侧和裂隙侧，距裂隙侧平均12 nm。PSD-95的所有PSD标签。CaMKII标记的性质截然不同。PSD的裂隙侧几乎没有标记，但在离裂隙平均25 nm的细胞质侧可能很重。在层析图中，CaMKII全酶可以直接可视化，显示为标记的塔状结构，反映了全酶的20 nm直径。这些塔从中央网格的细胞质侧突出。似乎存在CaMKII的局部组织，这是根据CaMKIII的最近邻距离在广泛的标记密度范围内几乎不变的事实判断的。CaMKII全酶的平均密度变化很大，从零到接近紧密堆积状态的值。这种可变性明显高于PSD-95，与CaMKII的信息存储作用一致。

PubMed免责声明

数字

图1。
图1。
PSD分数。A类，快速加工大脑PSD部分的考马斯蓝蛋白染色图谱。B类用匀浆（H）、突触体（S）和PSD（P）组分的CaMKII抗体进行免疫印迹（各10μg蛋白质）。抗体识别两条带，对应于α-和β-CaMKII（箭头所示的α-CaMJII）。
图5。
图5。
CaMKII单个标签之间的最近邻距离与标签密度无关。A类，对典型PSD上CaMKII标记分布的最近邻分析。在25个具有代表性的PSD上进行了此类分析，其中标签密度从每0.1μm 25到88个粒子不等2.B类，平均最近邻距离在25个PSD的大范围标签密度上几乎没有变化。C类PSD，其中一个较大的中心区域具有稀疏标签（星号），而PSD的其余部分通常具有间隔标签，说明PSD的CaMKII标记区域中标签之间的均匀间距。比例尺，100 nm。
图2。
图2。
PSD的裂面和细胞质表面不同。A类PSD免疫金标记PSD-95的裂口表面。免疫金颗粒显示为白点（小箭头）。PSD上的金色标签计数显示在右上角。中心网格中的开口由大箭头指示。B类，PSD-95标记的PSD免疫金的细胞质表面。中心网格中的开口由箭头指示。C类，放大区域A类.粒状颗粒用箭头表示。中央网眼下面的细丝用箭头表示。D类，扩大面积B类.中心网的底层丝状物用箭头表示。E类，PSD的裂口表面标记为Shank。存在的任何标签通常位于PSD的边缘（箭头）。PSD包含一块膜（放大克).F类，PSD免疫金的细胞质表面标记为Shank。中心网格上方突出的材料用箭头表示。克，膜片（箭头）具有典型的颗粒边缘。H（H），扩大面积F类.中心网下面的细丝用箭头表示。比例尺，100 nm。
图4。
图4。
不同数量的CaMKII免疫金标记集中在PSD的细胞质表面。A类，为CaMKII标记的PSD免疫金裂面。免疫金标签显示为白点。标签（箭头）仅出现在PSD的边缘。金粒子的数量显示在右上角。B类，PSD免疫金的细胞质表面标记为CaMKII。箭头表示中央网格上方突出的材料。C类，为CaMKII标记的PSD免疫金裂面。箭头表示膜贴片。D类PSD的细胞质表面带有适量的CaMKII免疫金标记。从细胞质表面（箭头）可以看到靠近玻璃基质的膜斑。E类，PSD的裂口表面显示CaMKII的稀疏标记。F类，严重标记CaMKII的PSD的细胞质表面。箭头表示突出物上标签的集中区域。比例尺，100 nm。
图3。
图3。
CaMKII免疫金标记以不同丰度集中在PSD的细胞质表面。频率直方图比较CaMKII和PSD-95在未选择PSD的裂隙和细胞质表面的免疫金标记密度。PSD-95的免疫金通常分布在裂隙和细胞质表面，而CaMKII的所有标记基本上都位于细胞质表面上，在PSD之间差异很大。裂隙表面的CaMKII标签可忽略不计（数据未显示）
图6。
图6。
EM断层扫描显示CaMKII标记相对于PSD裂隙表面的分布。标记为CaMKII的PSD层析重建的表面渲染，显示细胞质表面（上图）和边缘视图（下图，箭头所示方向）的斜视图。位于中心位置的金颗粒标记为红色，并显示在侧视图中。选择这些粒子进行测量。测量中不包括可能在边缘受到变形的蓝色颗粒。比例尺，100纳米。
图7。
图7。
EM断层扫描检测到CaMKII和PSD-95标记明显分层。使用EM断层扫描技术比较了单个金颗粒与PSD-95或CaMKII标记的PSD裂隙表面的距离。在9个标记有CaMKII的PSD和3个标记有PSD-95的PSD中，测量了单个金粒子与PSD裂隙表面的距离，PSD裂隙面粘附在玻璃基板上。CaMKII标记的密度在PSD裂隙表面约25 nm处达到峰值，而PSD-95的密度在约12 nm处达到高峰。
图8。
图8。
CaMKII免疫金标记（而非PSD-95标记）与PSD细胞质表面的塔有关。标记为PSD-95（顶部两个面板）或CaMKII（底部四个面板）的铂阴影PSD免疫金重建横截面。约20 nm宽的塔（用条表示，20 nm）从PSD的细胞质表面向上延伸。在对CaMKII进行标记后，大多数塔都进行了标记（用深色条表示），但少数塔没有进行标记（用白色条表示）。PSD-95免疫标记后，塔未标记（白色条），标记（斜箭头）更靠近PSD的裂面。下面的黑色大箭头表示玻璃基板上裂缝表面的平面。
图9。
图9。
图表总结了隔离PSD中的结构关系。五种全酶（绿色，红色的催化域）附着在PSD小部分的细胞质侧。三个在一个典型的集群中，两个端到端堆叠。中央板的裂面被剥离了突触后膜，但没有颗粒（金），附着在玻璃载玻片上。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Barria A、Muller D、Derkach V、Griffith LC、Soderling TR（1997），CaMKII在长期增强过程中对AMPA-型谷氨酸受体的调节性磷酸化。《科学》276:2042-2045。-公共医学
    1. Carlin RK、Grab DJ、Cohen RS、Siekevitz P（1980）不同脑区突触后密度的分离和表征：不同类型突触后浓度的富集。细胞生物学杂志86:831-845。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Cohen RS，Siekevitz P（1978）《突触后密度的形式：一项连续切片研究》。细胞生物学杂志78:36-46。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Cho KO，Hunt CA，Kennedy MB（1992）大鼠脑突触后密度分数包含果蝇椎间盘大肿瘤抑制蛋白的同源物。神经元9:929-942。-公共医学
    1. Derkach V，Barria A，Soderling TR（1999）Ca2+/钙调蛋白激酶II增强α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸盐型谷氨酸受体的通道传导。美国国家科学院院刊96:3269-3274。-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型