Establishment of an immortalized human hepatic stellate cell line to develop antifibrotic therapies

doi:10.3727/000000003108747064

.2003;12(5):499-507.

doi:10.3727/000000003108747064。

建立永生化人肝星状细胞系以开发抗纤维化治疗

Norikuni Shibata公司¹, 渡边塔卡玛, Teru Okitsu公司, 坂口正彦, 武智子（Michihiko Takesue）, 武米·库涅达, 大本健二, 山本信一郎, 田中诺丽姬, 小林直彦（Naoya Kobayashi）

附属公司

PMID： 12953924
内政部： 10.3727/000000003108747064

免费文章

建立永生化人肝星状细胞系以开发抗纤维化治疗

Norikuni Shibata公司等人。细胞移植. 2003.

免费文章

.2003;12(5):499-507.

doi:10.3727/000000003108747064。

作者

Norikuni Shibata公司¹, 渡边塔卡玛, Teru Okitsu公司, 坂口正彦, 武智子（Michihiko Takesue）, 武米·库涅达, 大本贤治, 山本信一郎, 田中诺丽姬, 小林直彦（Naoya Kobayashi）

附属

¹川崎医学院内科消化科，577 Matsushima，Kurashiki 701-0114，日本。

PMID： 12953924
内政部： 10.3727/000000003108747064

摘要

由于人类肝星状细胞（HSC）在肝纤维化的进展中起着至关重要的作用，因此建立一种具有HSC特性并在组织培养中生长良好的永生化人类细胞系对于发展抗纤维化治疗具有重要价值。因此，我们通过逆转录病毒诱导人端粒酶逆转录酶（hTERT）进入从人肝间充质瘤建立的LI 90细胞，构建了永生化人肝星状细胞（HSC）系TWNT-4。亲本LI 90进入复制性衰老，而TWNT-4则表现出端粒酶活性，增殖超过群体倍增水平（PDL）200而没有任何危机。TWNT-4表达血小板衍生生长因子-β受体（PDGF-betaR）、α-平滑肌肌动蛋白（alpha-SMA）和I型胶原（alpha1），被认为是HSC的激活形式。用100 U/ml IFN-gamma或1 ng/ml雷帕霉素（Rapa）处理TWNT-4细胞14天，导致RNA和蛋白质水平的I型胶原（alpha1）表达降低。将TWNT-4细胞暴露于IFN-gamma（10 U/ml）和Rapa（0.1 ng/ml）中14天，可有效降低I型胶原（alpha1）、PDGF-betaR和alpha-SMA的表达，并抑制TWNT-3细胞TGF-beta1的分泌。我们通过腺病毒载体Ad/GT-TRAIL和Ad/PGK-GV-17将TNF-相关凋亡诱导配体（TRAIL）导入TWNT-4细胞成功诱导凋亡。这些发现表明永生化活化HSC细胞系TWNT-4将是开发抗纤维化治疗的有效手段。

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