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2001年11月9日;276(45):42445-54.
doi:10.1074/jbc。M105917200。 Epub 2001年9月6日。

内皮素,一种内体FYVE结构域蛋白

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内皮素,一种内体FYVE结构域蛋白

L F西特等。 生物化学杂志
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摘要

KIAA0305是FYVE结构域蛋白家族的一个无特征成员。它与SARA密切相关,在羧基末端800-氨基酸区域约有50%的同源性。使用针对KIAA0305的多克隆抗体的间接免疫荧光显微镜显示,其在早期内体中富集。Myc-tagged版本也忠实地针对早期内体。我们暂时将其命名为KIAA0305内酯(内酯体相关FYVE域蛋白)。由于缺乏FYVE中央指基序的缺失突变体分布在细胞质中,因此内脏与内体的结合由其FYVE-结构域介导。此外,半胱氨酸残基753(C753S)处的FYVE手指基序的单点突变足以消除其内体关联。其内胚体定位也对磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂沃特曼敏感。使用体外脂质体结合试验,我们证明Myc-tagged endofin优先与磷脂酰肌醇3-磷酸结合,而C753S点突变则无法做到这一点。我们还发现,内酯与SARA共定位,但它们在一个共同的复合物中没有关联,因为它们在共表达细胞中不能共同免疫沉淀。Endofin在影响转化生长因子-β信号传导方面也与Smad2无关,也不像SARA那样表现。在高表达水平下,内切酶和SARA均可引起内切酶体聚集/融合效应。在能够支持高水平外源蛋白表达的COS7细胞中,这两种蛋白还可以导致内吞途径中的其他结构异常,如扩大的囊泡结构。这些内吞体聚集/融合积累了内吞的表皮生长因子。综上所述,本报告提供了证据表明,内切酶和高度相关的SARA是内切酶体蛋白,在调节膜交通方面具有潜在作用。

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