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.2001年7月;24(3):218-29.
doi:10.1006/meth.2001.1183。

串联亲和纯化(TAP)法:蛋白质复合物纯化的一般程序

附属公司
审查

串联亲和纯化(TAP)法:蛋白质复合物纯化的一般程序

O普伊格等。 方法. 2001年7月.

摘要

鉴定生物复合物中的成分需要将其纯化到接近同质性。纯化方法因蛋白质而异,因此不可能设计出适用于所有病例的通用纯化策略。我们开发了串联亲和纯化(TAP)方法,作为一种工具,可以在天然条件下快速纯化复合物,即使是在天然水平上表达。不需要事先了解复杂的组成或功能。TAP方法需要将TAP标签(N端或C端)与目标蛋白融合。从相对较少的细胞开始,活性大分子复合物可以被分离出来并用于多种用途。可以很容易地实现对含有两种给定成分的络合物进行特殊纯化或减去不需要的络合物的方法的变化。TAP方法最初是在酵母中开发的,但可以成功地适应各种生物。它的简单性、高产率和广泛适用性使TAP方法成为蛋白质纯化和蛋白质组研究的一个非常有用的程序。

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