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.2001年4月;21(2):105-13。
doi:10.1034/j.1600-0676.2001.021002105.x。

潜伏转化生长因子β结合蛋白(LTBP)亚型和剪接变异体在培养的人肝肌成纤维细胞中的表达

附属公司

潜伏转化生长因子β结合蛋白(LTBP)亚型和剪接变异体在培养的人肝肌成纤维细胞中的表达

K芒果-斯蒂芬等。 肝脏. 2001年4月.

摘要

背景/目的:肝星状细胞(HSC)激活为产生细胞外基质(ECM)的肌成纤维细胞(MFB)是人类肝纤维化的关键致病事件。潜在转化生长因子-β结合蛋白(LTBP)是促纤维化大潜伏转化生长因子(TGF)-β复合物的组成成分,对ECM中TGF-β的分泌、潜伏、储存和激活具有重要作用。本研究旨在确定所有迄今为止已知的LTBP亚型和LTBP剪接变异体以及TGF-β亚型在培养人肝MFB中的表达谱。

方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、序列分析、免疫荧光染色、代谢标记、免疫沉淀和酶联免疫吸附试验(ELISA)对培养的人MFB进行TGF-β和LTBP分析。

结果:检测到所有三种TGF-β亚型、所有四种LTBP亚型以及迄今为止已知的几乎所有LTBP-1和LTBP-4剪接变体的转录。代谢标记,然后用抗LTBP-1抗体进行免疫沉淀,显示LTBP蛋白的合成。通过大小排阻色谱证明了游离LTBP和LTBP整合到大潜伏TGF-β复合物中的分泌。通过双重免疫荧光染色观察LTBP-1和-2与纤维连接蛋白和I型胶原的协同作用。

结论:培养的人MFB表达迄今为止已知的LTBP蛋白的完整图谱表明,TGF-β在疾病肝脏中的生物活性调节中起作用。

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