Nerve growth factor-induced phosphorylation of SNAP-25 in PC12 cells: a possible involvement in the regulation of SNAP-25 localization

doi:10.1046/j.1471-4159.2000.0742058.x

.2000年5月；74(5):2058-66.

doi:10.1046/j.1471-4159.2000.0742058.x。

神经生长因子诱导PC12细胞中SNAP-25磷酸化：可能参与SNAP-25定位的调控

M Kataoka先生¹, R库瓦哈拉, S川崎, Y Shoji-Kasai公司, M高桥

附属公司

PMID： 10800949
内政部： 10.1046/j.1471-4159.2000.0742058.x

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神经生长因子诱导PC12细胞中SNAP-25磷酸化：可能参与SNAP-25定位的调控

M Kataoka先生等人。神经化学杂志. 2000年5月.

免费文章

.2000年5月；74(5):2058-66.

doi:10.1046/j.1471-4159.2000.0742058.x。

作者

M Kataoka先生¹, R Kuwahara村, S川崎, 加赛将司, M高桥

附属

¹日本东京三菱生命科学研究所项目研究中心。

PMID： 10800949
内政部： 10.1046/j.1471-4159.2000.0742058.x

摘要

25 kDa突触相关蛋白（SNAP-25）是神经递质释放所必需的t-SNARE蛋白，在细胞蛋白激酶C被佛波醇12-肉豆蔻酸13-醋酸盐激活后，在Ser187处磷酸化。然而，神经元活动或内源性配体是否诱导SNAP-25磷酸化尚不清楚。在这里，我们使用在Ser187磷酸化的SNAP-25特异性抗体研究了PC12细胞中SNAP-25的磷酸化。当细胞在没有神经生长因子（NGF）的情况下生长时，一小部分SNAP-25被磷酸化。用足以激活有丝分裂原激活的蛋白激酶信号转导通路的NGF进行短暂治疗，不会增加SNAP-25的磷酸化；然而，与NGF长期孵育后，磷酸化上调。上调是暂时的，在添加NGF后的36到48小时内达到最大磷酸化（比基础磷酸化增加四倍）。免疫荧光显微镜显示，SNAP-25主要定位在质膜上，尽管细胞质中也存在大量SNAP-25。定量微荧光分析显示，长期使用NGF处理导致SNAP-25在质膜中优先定位。一项使用绿色荧光蛋白融合蛋白作为标记的突变研究表明，Ser187对Ala的点突变消除了NGF依赖性重定位。在Ser187点突变为Glu时，质膜中SNAP-25的数量没有增加；然而，随着NGF处理时间的延长，其增加，这表明SNAP-25磷酸化对于NGF诱导的迁移到质膜是必要的，但还不够。我们的结果表明，SNAP-25磷酸化上调及其重新定位与NGF诱导PC12细胞分化之间存在密切的时间关系。

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