主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 兔单克隆抗体[E102]到PARP1 适用人群:WB、IHC-P、Flow Cyt(Intra)、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E102]至PARP1 -
宿主 兔子 -
特异性 该抗体识别PARP1的原型和p25裂解形式。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:野生型HAP1全细胞裂解物; HeLa全细胞裂解物( 约150035 ); HEK-293T细胞裂解液; IHC-P:人乳腺癌组织; ICC/IF:HeLa细胞; 流式细胞术(内):HeLa细胞,HAP1细胞。 WB:Jurkat全细胞裂解物。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 E102型 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照
应用
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靶标
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功能 参与碱基切除修复(BER)途径,通过催化参与染色质结构和DNA代谢的有限数量受体蛋白的聚(ADP-核糖基)化。 这种修饰是在DNA损伤后发生的,是导致DNA链断裂修复的检测/信号通路中的一个必要步骤。 介导APLF和CHFR的聚(ADP-核糖基)化。 积极调节MTUS1的转录,消极调节MTUS2/TIP150的转录。 -
序列相似性 包含1个BRCT域。 包含1个PARP字母数字域。 包含1个PARP催化域。 包含2个PARP型锌指。 -
翻译后修饰 通过PRKDC进行磷酸化。 DNA损伤后发生磷酸化,可能是ATM或ATR引起的。 PARP2使Poly-ADP-核糖化。 多聚ADP-核糖基化介导CHD1L向DNA损伤位点的募集。 S-亚硝基化,导致抑制转录调节活性。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 ADP核糖基转移酶(NAD+;聚ADP-核糖聚合酶)抗体 ADP核糖基转移酶抗体 ADP核糖基转移酶白喉毒素样1抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗PARP1抗体[E102](ab32138) 车道1: 野生型A549对照staurosporine(0 uM,72 h)细胞裂解液20µg 车道2: 野生型A549处理的星形孢菌素(3μM,24小时)细胞裂解物,20µg 3号车道: 20µg PARP1敲除物A549对照staurosporine(0 uM,72 h)细胞裂解液 车道4: 20µg的PARP1敲除A549处理的staurosporine(3 uM,24 h)细胞裂解液 车道5: 20µg的空细胞裂解液 车道6: HAP1处理的Staurosporine(2uM,4h)细胞裂解液,20µg 7号车道: HAP1车辆控制Staurosporine(0uM,4h)细胞裂解液(10µg) 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 113千帕 观察到的频带大小: 125千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot:抗PARP1抗体[E102](ab32138)在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度加载控制染色,以洋红色显示。 在Western blot中,ab32138被证明与PARP1特异结合。 在野生型A549细胞裂解液中在125kDa处观察到一条带,在PARP1敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约276094 (敲除细胞裂解物Abcam Pools)。 为了生成此图像,分析了野生型和PARP1敲除A549细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中5%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
流式细胞术重叠直方图显示野生型Hap1(绿线)和PARP1敲除Hap1用ab32138染色(红线)。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在含有10%正常山羊血清的1x PBS中,以阻止非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后用抗体(ab32138)(1x 10 6 100μl,0.04μg/ml(1/55750)),22°C下30分钟。 将二级抗体山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附液在1/4000的温度下于22°C孵育30分钟 同位素对照抗体重组兔IgG,单克隆[EPR25A]-同位素对照在与一级抗体相同的浓度和条件下使用(野生型Hap1-黑线,PARP1敲除Hap1-灰线)。 未标记样本也用作对照(为了简单起见,未显示此行)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
所有车道: 1/1000稀释度的抗PARP1抗体[E102](ab32138)(纯化) 车道1: 未经处理的Jurkat(人类T细胞白血病T淋巴细胞)全细胞裂解物 车道2: 1µM staurosporine处理Jurkat(人类T细胞白血病T淋巴细胞)4小时全细胞裂解物 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 113千帕 前体:116kDa; p25胱天蛋白酶裂解形式:25kDa; 蛋白水解裂解片段:58kDa和42kDa -
用纯化的ab32138在1/100稀释度(1.0µg/mL)下标记PARP1的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的免疫细胞化学分析。 细胞固定在4%多聚甲醛中,并用0.1%TritonX-100渗透。 用Ab195889抗α-微管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor ® 594)1/200(2.5微克/毫升)。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488, 约150077 )以1/1000(2µg/mL)稀释度作为二级抗体。 DAPI(蓝色)用作核染色。 用PBS代替一级抗体作为二级抗体对照。 -
车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物(20µg) 车道2: PARP1敲除HAP1全细胞裂解物(20µg) 3号车道: HeLa全细胞裂解物(20µg) 车道4: MCF7全细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在125 kDa下观察到ab32138。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 当使用PARP1敲除样品时,ab32138显示与PARP1特异性反应。 对野生型和PARP1敲除的样品进行SDS-PAGE。 ab32138和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4°C下以1/1000稀释度和1/10000稀释度孵育过夜。 在成像前,用800CW山羊抗兔和680CW山羊抗鼠二级抗体在室温下以1/10000稀释1小时制备印迹。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析用纯化ab32138在1/200稀释度(0.51µg/mL)下标记PARP1的人类乳腺癌组织切片。 热介导抗原检索是使用 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 组织用苏木精复染。 免疫组织探针一步法HRP聚合物(即用型)二级抗体以1/0稀释度使用。 使用PBS代替初级抗体作为阴性对照。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗PARP1抗体[E102](ab32138) 车道1: 野生型HEK-293T细胞裂解物 车道2: PARP1敲除HEK-293T细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 113千帕 观察到的频带大小: 113千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在113 kDa下观察到ab32138。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab32138与野生型HEK-293T细胞中的PARP1反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约266598 (敲除细胞裂解物 ab257017号 )已使用。 对野生型HEK-293T和PARP1敲除HEK-293 T细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 ab32138和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的细胞内流式细胞术分析,在1/20稀释度(10µg/mL)下用纯化的ab32138标记PARP1(红色)。 细胞用4%多聚甲醛固定,用90%甲醇渗透。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488, 约150077 )2000年1月使用二级抗体。 同位素对照-兔单克隆IgG(黑色)。 未标记对照-未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞(蓝色)。
实验方案
数据表及文件
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文献 (133)
杜Z 等。 LncRNA ANRIL通过海绵miR-7-5p调节肺癌中PARP1的表达,促进HR修复。 BMC癌症 23:130 (2023). 公共医学:36755223 Lawaetz M公司 等。 uPAR、αvβ6整合素和组织因子作为口腔鳞癌分子成像靶点的潜力:免疫组织化学对原发性肿瘤和转移中九个靶点的评价。 国际分子科学杂志 24:不适用(2023年)。 公共医学:36835265 Longarini EJ公司 等。 模块化抗体揭示了DNA损伤诱导的单ADP核糖基化作为PARP1信号的第二波。 分子电池 83:1743-1760.e11(2023)。 公共医学:37116497 高H 等。 通过氧化钨纳米电容器调节电子传输以增强放射治疗。 纳米生物技术杂志 21:205 (2023). 公共医学:37386437 阿尔布利希A 等。 通过MRE11阻断选择性杀伤BRCA2缺陷卵巢癌细胞。 国际分子科学杂志 24:不适用(2023年)。 公共医学:37446144