主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 兔单克隆[EP1238Y]到Notch1 适用于:IHC-P、流式细胞仪(内部)、WB、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:老鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP1238Y]至槽口1 -
宿主 兔子 -
特异性 80%与缺口2一致,81%与缺口3一致 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 预测可用于: 奶牛 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HeLa、HAP1、MOLT-4、HEK-293细胞裂解物。 小鼠脑裂解物。 IHC-P:人脑组织。 ICC/IF:HeLa细胞。 流动Cyt(内部):HeLa细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油、0.05%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP1238Y型 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白
应用
靶标
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功能 作为膜结合配体Jagged1、Jagged2和Delta1的受体,调节细胞脂肪测定。 通过释放的缺口细胞内结构域(NICD)进行配体激活后,它与RBPJ/RBPSUH形成转录激活物复合物,并激活分裂基因座增强子的基因。 影响分化、增殖和凋亡程序的实施。 可能对正常淋巴细胞功能很重要。 以改变的形式,可能有助于某些T细胞肿瘤的转化或进展。 参与胸腺中CD4+和CD8+细胞的成熟。 可能对卵泡分化和卵泡内的细胞命运选择很重要。 在小脑发育过程中,可能作为神经元DNER的受体,并可能参与Bergmann胶质细胞的分化。 -
组织特异性 胎儿组织中最丰富的是脾脏、脑干和肺。 也存在于大多数成人组织中,主要见于淋巴组织。 -
疾病相关 NOTCH1缺陷是导致二叶主动脉瓣(BAV)的原因[MIM:109730]。 主动脉瓣的一种常见缺陷,有两个而不是三个瓣叶。 它通常与主动脉瓣钙化和功能不全有关。 在极端情况下,血流可能会受到限制,导致左心室无法生长,从而导致左心发育不良综合征。 -
序列相似性 属于NOTCH家族。 包含5个ANK重复。 包含36个类EGF域。 包含3个LNR(Lin/Notch)重复。 -
翻译后修饰 在内质网中合成为一种非活性形式,在到达质膜之前,由反高尔基网络中的呋喃样转化酶进行蛋白质水解裂解,生成一种活性的配体可获得形式。裂解产生C末端片段N(TM)和N末端碎片N(EC)。 配体结合后,它被TNF-α转化酶(TACE)裂解,产生一个膜相关的中间片段,称为notch胞外截断(NEXT)。 然后,该片段被早老素依赖性γ-分泌酶裂解,从膜上释放出包含细胞内结构域(NICD)的缺口衍生肽。 磷酸化。 在EGF-like结构域上进行O-糖基化。 包含O-连接岩藻糖和O-连接葡萄糖。 泛素化; 进行ITCH催化的“Lys-29”连接的多泛素化。 -
细胞定位 细胞膜和细胞核。 在蛋白质水解过程之后,NICD转移到细胞核。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 9930111A19Rik抗体 AOS5抗体 AOVD1抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗Notch1抗体[EP1238Y](ab52627) 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: NOTCH1敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在110 kDa下观察到ab52627。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab52627与野生型HeLa细胞中的Notch1反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约261762 (敲除细胞裂解物 ab257006号 )已使用。 对野生型HeLa和NOTCH1敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab52627和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
使用稀释度为1/150的纯化ab52627对用4%PFA固定的HeLa(来自宫颈腺癌的人上皮细胞系)细胞进行免疫荧光染色。 Alexa Fluor公司 ® 以555只山羊抗兔血清为次级,用DAPI染色。 Alexa Fluor公司 ® 555只山羊抗兔药以1/500的稀释度作为 阴性对照 和显示在右下面板中。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗Notch1抗体[EP1238Y](ab52627) 车道1: 野生型HL-60细胞裂解物 车道2: NOTCH1敲除HL-60细胞裂解物 3号车道: 野生型HAP1细胞裂解物 车道4: NOTCH1敲除HAP1细胞裂解物 车道5: MOLT-4细胞裂解物 车道6: HepG2细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot:抗-NOTCH1抗体[EP1238Y](ab52627)在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度加载控制染色,以洋红色显示。 在Western blot中,ab52627显示与NOTCH1特异结合。 在野生型HL-60细胞裂解液中观察到100kDa的条带,在NOTCH1敲除细胞系中未观察到这种大小的信号。 为了生成此图像,分析了野生型和NOTCH1敲除HL-60细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在TBS-0.1%吐温®20(TBS-T)中的3%牛奶中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
所有车道: 1µg/ml时的抗Notch1抗体[EP1238Y](ab52627) 车道1: 40µg的野生型HAP1细胞裂解物 车道2: 40µg NOTCH1敲除HAP1细胞裂解液 3号车道: 20µg的MOLT-4细胞裂解液 车道4: 20µg的HepG2细胞裂解液 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 105千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在105 kDa下观察到ab52627。 红色-装载控制, 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 western blot显示ab52627与野生型HAP1细胞中的Notch1反应。 使用NOTCH1剔除样品时,观察到信号丢失。 对野生型和NOTCH1敲除HAP1细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在用ab52627和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])分别以1µg/ml和1:20000稀释液在4°C下过夜。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
1/2000稀释(纯化)的抗Notch1抗体[EP1238Y](ab52627)+10µg的小鼠大脑 次要 HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 观察到的频带大小: 125千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 -
1/2000稀释(纯化)的抗Notch1抗体[EP1238Y](ab52627)+10µg的HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)细胞裂解液 次要 HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 观察到的频带大小: 125千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 -
通过对小鼠中人类黑色素瘤(MeWo)异种移植物实验的皮下肿瘤和肺转移中Notch 1表达的免疫组织化学分析验证基因表达阵列数据。 MeWo(人类恶性黑色素瘤细胞系)细胞的皮下肿瘤和肺转移(两组)中Notch1表达的免疫组织化学染色(ab52627,红色)。 所有比例尺:50μm。 -
用稀释1/150的纯化ab52627对石蜡包埋人脑进行免疫组织化学染色。 将兔IgG的HRP预稀释聚合物用作次要试剂,并用苏木精对样品进行染色。 使用PBS代替一级抗体作为 阴性对照 ,和如插图所示。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
用稀释度为1/100的未纯化ab52627对石蜡包埋人脑进行免疫组织化学染色。 将兔IgG的HRP预稀释聚合物用作次要试剂,并用苏木精对样品进行染色。 使用PBS代替一级抗体作为 阴性对照 ,和如插图所示。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
使用稀释度为1/100的未纯化ab52627对用4%PFA固定的HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞进行免疫荧光染色。 Alexa Fluor公司 ® 以555只山羊抗兔血清为次级,用DAPI染色。 Alexa Fluor公司 ® 555只山羊抗兔药以1/500的稀释度作为 阴性对照 和显示在右下面板中。 -
用纯化的ab52627在1/200稀释度下对渗出的HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞(2%PFA,粉红色)进行细胞内流式细胞术分析,或 阴性对照 兔单克隆IgG(绿色)。 二级抗体为FITC山羊抗兔抗体
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
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文献 (201)
张伟 等。 单细胞测序显示SATB2/NOTCH1信号传导促进甲状腺乳头状癌上皮细胞恶性进展。 摩尔癌 63:22-33 (2024). 公共医学:37877736 穆克吉D 等。 胎儿肺动脉高压:在绵羊模型中,失调的microRNA-34c-Notch1轴导致血管生成受损。 儿科研究 93:551-558 (2023). 公共医学:35717485 胡HJ 等。 高压氧对小鼠重度一氧化碳中毒后Notch信号通路的影响。 Med Gas Res公司 13:23-28 (2023). 公共医学:35946219 裴勇俊 等。 表观遗传调节因子KDM4A激活Notch1-NICD-依赖性信号传导,以驱动乳腺癌的肿瘤发生和转移。 Transl Oncol公司 28:101615 (2023). 公共医学:36592610 顾NX 等。 Frizzled7调节高脚杯和Paneth细胞的命运,并维持小鼠肠道内的稳态。 开发 150:不适用(2023年)。 公共医学:36691900