抗-NF-kB p65(ab16502)
主要功能和细节
兔多克隆至NF-kB p65 适用于:ICC/IF、IHC-P、WB、IP 敲除已验证 反应对象:老鼠、人类 同位素:IgG
选择批间可重复性更高的重组抗体
研究可靠 —— 各批次间结果一致且可重复 长期批量供应 —— 采用重组技术,可实现快速生产 首次实验即可成功 —— 经过大量验证确认了特异性 符合伦理标准 —— 产品不含动物成分
概述
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产品名称 -
描述 兔多克隆抗体 至NF-kB p65 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 预测可用于: 大鼠、印度麂、黑头鼠 -
免疫原 与人类NF-kB p65 aa 500相对应的合成肽与钥匙孔帽贝血蓝蛋白偶联的C末端(C末端)。 (肽可用作 公元16636年 ) -
常规说明 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:98.98%PBS,1%BSA 浓度<1mg/ml的该产品批次可添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们将乐于提供帮助。 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 多克隆 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
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检测试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
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应用
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靶标
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功能 NF-kappa-B是一种多效性转录因子,存在于几乎所有细胞类型中,参与炎症、免疫、分化、细胞生长、肿瘤发生和凋亡等多种生物过程。 NF-kappa-B是由类Rel结构域蛋白RELA/p65、RELB、NFKB1/p105、NFKB1/p50、Rel和NFKB2/p52形成的同二聚体或异二聚体复合物,其中异二聚物p65-p50复合物最为丰富。 二聚体结合在其靶基因DNA中的kappa-B位点,并且单个二聚体对不同的kappa-B位点有不同的偏好,它们可以以不同的亲和力和特异性结合。 不同的二聚体组合分别作为转录激活物或阻遏物。 NF-kappa-B受翻译后修饰和亚细胞分隔的各种机制以及与其他辅因子或辅抑制因子的相互作用控制。 NF-kappa-B复合物被保存在细胞质中,处于与NF-kampa-B抑制剂家族成员复合的非活性状态。 在传统的激活途径中,IκB被IκB激酶(IKKs)磷酸化以响应不同的激活剂,随后被降解,从而释放出转移到细胞核的活性NF-κ-B复合物。 NF-kappa-B异二聚体p65-p50和p65-c-Rel复合物是转录激活物。 NF-kappa-B p65-p65复合物似乎参与了侵袭素介导的IL-8表达激活。 I-κB对NF-κB的抑制作用主要通过与p65的相互作用发挥。 p65显示一个弱的DNA结合位点,该位点可能直接参与NF-kappa-B复合体中的DNA结合。 通过与DDX1的关联与NF-kappa-B启动子区域的染色质关联。 -
序列相似性 包含1个RHD(Rel-like)域。 -
结构域 9aaTAD基序是存在于大量酵母和动物转录因子中的反式激活域。 -
翻译后修饰 泛素化,导致其蛋白酶体降解。 NF-kappa-B响应终止需要降解。 SETD6在Lys-310处单甲基化。 Lys-310的单甲基化被EHMT1的ANK重复序列识别,并促进靶基因受抑制染色质的形成,导致NF-kappa-B转录因子活性的下调。 Ser-311的磷酸化破坏了与EHMT1的相互作用,但未阻止Lys-310的单甲基化,并减轻了靶基因的抑制。 Ser-311的磷酸化破坏与EHMT1的相互作用并促进转录因子活性(通过相似性)。 Ser-536上的磷酸化刺激Lys-310上的乙酰化以及与CBP的相互作用; 磷酸化和乙酰化形式显示出增强的转录活性。 可逆乙酰化; 乙酰化似乎由CBP介导,而脱乙酰化则由HDAC3介导。 Lys-122处的乙酰化增强了DNA结合并损害了与NFKBIA的结合。在不影响DNA结合和NFKBIA结合的情况下,Lys-310处的乙酰基化是完整转录活性所必需的。 乙酰化还可以降低DNA结合并导致核出口。 与BRMS1的相互作用促进“Lys-310”的脱乙酰化。 -
细胞定位 核心。 细胞质。 核,但在细胞质中也发现了与抑制剂(I-kappa-B)复合的非活性形式。 TNF-α诱导后在细胞核中用RELA染色。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 禽网状内皮增生病病毒(vrel)癌基因同源物A抗体 MGC131774抗体 NF-κB p65delta3抗体
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图片
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所有车道: 1/1000稀释的抗NFκB p65抗体(ab16502) 车道1: 野生型HAP1细胞裂解物 车道2: NF-kB p65敲除HAP1细胞裂解物 3号车道: HeLa细胞裂解物 车道4: A431细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( ab216773号 )稀释度为1/10000 预测的带宽大小: 60千Da 车道1 :野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 2号车道 :NFκB p65敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 3号车道 :HeLa细胞裂解物(20µg) 4号车道 :A431细胞裂解液(20µg) 1-4车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在70 kDa下观察到ab16502。 红色- 约8245 37 kDa时观察到的负载控制。 在野生型HAP1细胞中,ab16502与NFκB p65反应,并伴有额外的交叉反应带。 使用NFκB p65敲除样品时未观察到条带。 对野生型和NFκB p65敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab16502(NFκB p65)和 约8245 (GAPDH的负荷控制)均稀释1/1000并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
所有车道: 1/1000稀释的抗NFκB p65抗体(ab16502) 车道1: 人胎脑裂解物 车道2: 人胎儿肾脏裂解物 3号车道: 人胎肺裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 60千Da 观察到的频带大小: 65千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 暴露时间: 1号车道15秒,2号和3号车道3秒 正常大脑可能表达低水平的p65(PMID:21479220) -
Leica BOND上福尔马林固定石蜡包埋人乳腺癌切片中抗-NF-kB p65抗体染色的IHC图像 TM(TM) 系统使用标准协议。 用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下将切片与ab16502(1ug/ml)孵育15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 -
ab16502染色的人HeLa细胞的ICC/IF图像。 细胞被甲醇固定(5分钟),并在室温下与抗体(ab16502,1µg/ml)孵育1小时。 二级抗体(绿色)为Alexa Fluor®488山羊抗兔IgG(H+L),以1/1000稀释度使用1h。 图像-iT TM(TM) FX信号增强剂被用作主要阻断剂,5%BSA(TBS-T)用于所有其他阻断步骤。 DAPI染色细胞核(蓝色)。 Alexa Fluor®594阴茎肽用于标记F-actin(红色)。 -
Villin的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析 Cre公司 ; 数据链1 上下 用ab16502(棕色)标记NF-kB p65的小鼠结肠组织切片。 阿尔西安蓝用于复染。 在99°C的柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)中,利用加压脱色室在4μm福尔马林固定石蜡包埋切片上进行热诱导表位检索18分钟。对于亮场显微镜,在添加一级抗体(ab16502)之前,将载玻片暴露于过氧化物酶阻断溶液中。 在4°C下与一级抗体孵育过夜后,将载玻片孵育在过氧化物酶共轭聚合物中。 -
Dclk1的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析 上下 用ab16502(棕色)标记NF-kB p65的小鼠结肠组织切片。 阿尔西安蓝用于复染。 在99°C的柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)中,利用加压脱色室在4μm福尔马林固定石蜡包埋切片上进行热诱导表位检索18分钟。对于亮场显微镜,在添加一级抗体(ab16502)之前,将载玻片暴露于过氧化物酶阻断溶液中。 在4°C下与一级抗体孵育过夜后,将载玻片孵育在过氧化物酶共轭聚合物中。 -
ab16502染色的MCF7细胞的ICC/IF图像。 将细胞固定在4%PFA中(10分钟),然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体(ab16502,1µg/ml)在+4°C下孵育过夜。 次级抗体(绿色)为山羊 防兔DyLight®488 (IgG-H&L,预吸附)( 约96899 )以1/250的稀释度使用1h。 Alexa Fluor®594 WGA用于在1:200稀释度下标记质膜(红色)1小时。 DAPI用于染色浓度为1.43µM的细胞核(蓝色)。 -
所有车道: 1µg/ml时的抗-NF-kB p65抗体(ab16502) 车道1: 脾脏(小鼠)组织裂解物 车道2: HeLa(人上皮癌细胞系)全细胞裂解液 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊多克隆至兔IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP),稀释度为1/3000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 60千Da 观察到的频带大小: 64千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 8分钟 -
ab16502用免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)染色小鼠腹膜肿瘤细胞NF-kB p65。 用多聚甲醛固定组织,并在室温下用1%牛血清白蛋白封闭60分钟。 样品与一级抗体(1/1000)孵育2小时。 未稀释的Alexa面粉 ® 以647-结合山羊抗兔IgG多克隆作为二级抗体。 -
1µg/ml的抗-NF-kB p65抗体(ab16502)+10µg的HeLa(人上皮癌细胞系)全细胞裂解液 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )50000毫克/毫升 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 60千Da 观察到的频带大小: 64千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 4分钟 该印迹是在MOPS缓冲系统下使用4-12%双三凝胶生成的。 凝胶在200V下运行50分钟,然后在30V下转移到硝化纤维膜上70分钟。 然后使用2%牛血清白蛋白封闭膜一小时,然后在4°C下与ab16502孵育过夜。 使用与HRP结合的抗兔抗体检测抗体结合,并使用ECL显影液进行可视化 约133406 -
所有车道: 0.5µg/ml时的抗-NF-kB p65抗体(ab16502) 车道1: Hela全细胞裂解物 车道2: A431全细胞裂解物 3号车道: 人NF-kB p65肽Hela全细胞裂解液( 公元16636年 )浓度为1µg/ml 车道4: 人NF-kB p65肽A431全细胞裂解液( 公元16636年 )浓度为1µg/ml 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 稀释度为1/5000的Alexa Fluor山羊兔IgG多克隆抗体 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 60千Da 观察到的频带大小: 64千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
ab16502,1/500稀释染色,免疫细胞化学法检测非同步和副甲醛固定(4%)HeLa细胞。 抗体与细胞孵育30分钟,然后使用Cy3结合的山羊抗鼠IgG(H+L)抗体检测。 此图片由Abreview提供 柯克·麦克马纳斯 提交日期: 2006年2月27日。
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文献 (1222)
安Q 等。 MCPIP1通过抑制TLR4/TRAF6/NF‑κB通路来抑制神经炎症,从而减轻小鼠的抑郁样行为。 分子医学代表 29:不适用(2024年)。 公共医学:37975259 姜浩 等。 针刺通过调节TLR4信号通路介导的神经炎症改善慢性束缚应激大鼠的抑郁样行为。 摩尔神经生物醇 61:2606-2619 (2024). 公共医学:37917302 李·T 等。 GPNMB通过调节SAH后AMPK/NFκB信号通路改善小鼠神经炎症。 神经免疫药理学杂志 18:628-639 (2023). 公共医学:37919457 Nakai K公司 等。 Wnt激活通过NF-κB-MMP21途径干扰细胞竞争并导致转化细胞的扩散侵袭。 国家公社 14:7048 (2023). 公共医学:37923722 灵X 等。 Irf7调节Srg3的表达,铁下垂轴加重脓毒症诱导的急性肺损伤。 细胞分子生物学实验 28:91 (2023). 公共医学:37946128