主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[SP6]抗Ki67-BSA和无叠氮化合物 适用人群:WB、mIHC、Flow Cyt(Intra)、IHC-P、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [SP6]至Ki67-无BSA和叠氮化物 -
宿主 兔子 -
特异性 Ki67主要在增殖细胞中表达。 对于正常组织样本(例如,肝脏、肾脏),由于低水平的增殖和Ki67的少量表达,通常可以观察不到染色。 对于恶性组织样本(例如结肠癌、乳腺癌),更容易在这些组织的增殖细胞中发现Ki67(PMID:62061311065359734183782)。 关于特异性的更多信息 (中文版) -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 预测可用于: 普通狨 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
表位 C端 -
阳性对照 WB:野生型A549,HeLa细胞裂解物。 IHC-P:人扁桃体、大鼠和小鼠脾组织。 人类结肠癌。 ICC/IF:HeLa和HAP1细胞。 流式细胞仪(内部):HAP1细胞。 mIHC:人类扁桃体
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常规说明 ab197547是无载波版本的 公元16667年 . 我们的 无载体 抗体通常以只含PBS的配方提供,纯化后不含BSA、叠氮化钠和甘油。 无载体缓冲液和高浓度可提高共轭效率。 这种可结合的形式设计用于荧光染料、金属同位素、寡核苷酸和酶,这使它们成为抗体标记、功能性和基于细胞的分析、基于流式分析(如质谱仪)和多重成像应用的理想选择。 使用我们的 接合试剂盒 抗体结合物在20分钟内即可使用,动手时间<1分钟,抗体回收率100%:可用于荧光染料、HRP、生物素和金。 此产品与Maxpar兼容 ® Fluidigm抗体标记试剂盒,无需抗体制备。 Maxpar公司 ® 是Fluidigm Canada Inc.的商标。 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下几个优点: -高批次一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 请看这里 . 本产品仅供研究使用。 如需商业用途,请联系 partnerships@abcam.com。
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
存储溶液 pH值:7.20 成分:PBS -
无载体 是 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 SP6标准 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本
应用
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靶标
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功能 核膜解体后,需要维持分散在细胞质中的单个有丝分裂染色体(PubMed:27362226)。 与有丝分裂染色体的表面、染色体周层相关,并覆盖染色体表面的大部分(PubMed:27362226)。 通过形成空间电荷和静电电荷屏障,防止染色体塌陷成单个染色质团:蛋白质具有高净电荷,充当表面活性剂,分散染色体并实现独立的染色体运动(PubMed:27362226)。 结合DNA,优先选择超螺旋DNA和富含AT-的DNA(PubMed:10878551)。 对有丝分裂染色体的内部结构没有贡献(通过相似性)。 可能在染色质组织中起作用(PubMed:24867636)。 然而,尚不清楚它是在染色质组织中起直接作用,还是维持有丝分裂染色体分散功能的间接结果。 -
序列相似性 包含1个FHA域。 包含16个K167R重复序列。 包含1个PP1-绑定域。 -
发展阶段 表达优先发生在细胞周期的晚期G1、S、G2和M期,而在G0期细胞中无法检测到抗原(在蛋白水平)(PubMed:6206131)。 在G2期和有丝分裂期间(蛋白质水平)出现最高水平。 在间期,在核仁周围的纤维蛋白缺乏区域形成纤维状结构(PubMed:2674163,PubMed:8799815)。 -
翻译后修饰 磷酸化。 有丝分裂中的高磷酸化(PubMed:10502411,PubMed:10653604)。 高磷酸化形式不结合DNA。 -
细胞定位 染色体。 核心。 细胞核,核仁。 与有丝分裂染色体的表面、染色体周层相关,并覆盖有丝分裂的染色体表面的很大一部分(PubMed:27362226)。 与G1期卫星DNA相关(PubMed:9510506)。 在间期与染色质紧密结合,当染色质结合在浓缩染色体表面时,有丝分裂中染色质结合减少(PubMed:15896774,PubMed:22002106)。 主要定位于核周区的G1期,在后期,也可在整个核内部检测到,主要定位于细胞核基质(PubMed:22002106)。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 4288 人类 Entrez基因: 17345 鼠标 Entrez基因: 246042 老鼠 Omim公司: 176741 人类 瑞士保护银行: 第46013页 人类 瑞士保护银行: E9PVX6型 鼠标 瑞士保护银行: 数量61769 鼠标 尤尼金: 689823 人类
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别名 单克隆抗体Ki 67抗体鉴定的抗原 单克隆抗体Ki-67抗体鉴定的抗原 抗原KI-67抗体
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图片
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所有车道: 抗Ki67抗体[SP6]( 公元16667年 )稀释1/500 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: MKI67敲除A549细胞裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 358千帕 观察到的频带大小: 359千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot:抗MKI67抗体[SP6]( 公元16667年 )1/500稀释液染色,以绿色显示; 鼠抗CANX[CANX/1543]( ab238078型 )1/2000稀释度下的加载对照染色,以品红色显示。 在Western blot中, 公元16667年 显示与MKI67特异结合。 在野生型A549细胞裂解液中在359 kDa处观察到一条带,在MKI67敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成此图像,分析了野生型和MKI67敲除A549细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
用浓度为5µg/ml的ab197547对福尔马林固定石蜡包埋的人扁桃体Ki67进行免疫组织化学分析。在Ventana DISCOVERY ULTRA(Roche Tissue Diagnostics)仪器上用OptiView DAB IHC检测试剂盒进行免疫染色。 使用ULTRA细胞调节液(CC1 pH8.5)进行热介导抗原回收32分钟。 ab197547抗Ki67抗体在37℃孵育16分钟。 切片用苏木精II复染。 图像插页显示仅二级抗体对照组无染色。 -
所有车道: 抗Ki67抗体[SP6]( 公元16667年 )稀释度为1/100 车道1: Ramos细胞裂解物 车道2: 野生型HeLa细胞裂解物 3号车道: MKI67敲除HeLa细胞裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 358千帕 观察到的频带大小: 359千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 公元16667年 ). 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 公元16667年 在359 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约130007 在125 kDa时观察到。 公元16667年 显示在野生型HeLa中与Ki67发生反应。 剔除样品时观察到信号丢失 约263762 已使用。 对野生型和Ki67基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 公元16667年 和抗V菊糖抗体VIN-54]( 约130007 )分别在4°C下以1/100稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 公元16667年 ). 福尔马林固定石蜡包埋人扁桃体切片标记Ki67的免疫组织化学分析 公元16667年 浓度为1/200(0.156µg/mL)。 图像A : 二级抗体是一种现成的山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP聚合物) 人类扁桃体组织与 公元16667年 在+4°C下过夜。 热介导抗原检索 约93678 (柠檬酸缓冲液,pH 6.0)。 人类扁桃体上的核染色。 该部分是与 公元16667年 在+4°C下过夜。 图片B: 二级抗体是现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection) 人类扁桃体组织与 公元16667年 徕卡生物系统债券 ® RX仪器。 用柠檬酸缓冲液(pH 6.0,表位检索溶液2)进行20分钟的热介导抗原检索。 -
该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 公元16667年 ). 正常人扁桃体组织的荧光多重免疫组织化学分析(福尔马林固定石蜡包埋切片)。 抗PD1融合染色( ab237728号 ; 橙色; Opal™520),抗PDL1( ab237726号 ; 绿色; Opal™540),抗CD68( 约192847年 ; 黄色的; Opal™570),抗CD3( 公元16669年 ; 红色; Opal™620),抗Ki67( 公元16667年 ; 浅蓝色; Opal™650)和抗PanCK( 约7753 ; 灰色; Opal™690)。 在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色 ® 带有Opal™7色自动IHC套件的RX仪器(NEL821001KT,Akoya Biosciences ® ). 切片在六轮染色中培养; 按照…的顺序 ab237728号 (1/500稀释), ab237726号 (1/500稀释), 约192847年 (1/300稀释), 公元16669年 (1/300稀释), 公元16667年 (1/200稀释)和 约7753 (1/200稀释); 每个使用单独的荧光酪酰胺信号放大系统。 柠檬酸钠抗原回收(Leica ER1,pH6.0,30分钟)用于酪胺信号扩增的两轮之间,以从前一轮中去除抗体,以避免任何交叉反应。 DAPI(深蓝色)用作核反染剂。 使用Vectra Polaris对单个Opal™染料进行显微镜和假染色。 这张图片是从杂交瘤版本生成的。 -
此数据是使用 公元16667年 ,相同的抗体克隆在不同的缓冲液配方中。 人类扁桃体标记PD1的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析 约243644 在1/500稀释度(1.02µg/mL)(D)下,Ki67 公元16667年 1/200稀释度(0.15μg/ml)(B)和PD-L1 约228462 稀释度为1/100(0.52μg/ml)(C)。 蛋白石聚合物HRP Ms+Rb用作二级抗体,DAPI用于核反染。 用柠檬酸缓冲液(pH 6.0,表位检索溶液1)进行20分钟的热介导抗原检索。 图A:抗Ki67(品红色;Opal™690)、抗PD-L1(红色;Opal™570)和抗PD-1(绿色;Opal™520)在人类扁桃体上的合并染色。 B组:增殖细胞核抗Ki67染色。 C组:参与T细胞抑制的细胞膜上的抗PD-L1染色。 D组:抗原刺激T细胞上的抗PD1染色。 切片经过三轮染色培养:按照 公元16667年 持续10分钟, 约243644 30分钟 约228462 在室温下保持10分钟。 每一轮之后都有一个单独的荧光酪胺信号放大系统。 免疫染色在莱卡生物系统BOND®RX仪器和Opal™4色试剂盒上进行。 使用徕卡SP8共焦显微镜进行图像采集。 -
该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 公元16667年 ). 公元16667年 野生型HAP1细胞中Ki67染色(顶部面板)和Ki67敲除HAP1的细胞(底部面板)。 细胞用100%甲醇固定5分钟,用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 公元16667年 稀释1/250 约195889年 以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下进一步培养1小时 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附(ab150081)二级抗体 浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 这张图片是从杂交瘤版本生成的。 -
此数据是使用 公元16667年 ,相同的抗体克隆在不同的缓冲液配方中。 标记Ki67的100%甲醇固定、非渗透亲代HAP1细胞的免疫荧光分析 公元16667年 稀释1/1000,然后 约150077 羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)抗体,稀释度为1/1000(2µg/mL)(绿色)。 亲本HAP1细胞系核仁染色的共焦图像 约195889年 使用抗α-Tubulin小鼠单克隆抗体-微管标记(Alexa Fluor®594)在1/200稀释度(2.5µg/mL)下对微管蛋白进行反染色(红色)。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150077 1000稀释度(2µg/mL)的山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)。 -
此数据是使用 公元16667年 ,相同的抗体克隆在不同的缓冲液配方中。 100%甲醇固定、非渗透HeLa细胞标记Ki67的免疫荧光分析 公元16667年 稀释1/1000,然后 约150077 羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)抗体,稀释度为1/1000(2µg/mL)(绿色)。 HeLa细胞系核仁染色的共焦图像 约195889年 使用抗α-Tubulin小鼠单克隆抗体-微管标记(Alexa Fluor®594)在1/200稀释度(2.5µg/mL)下对微管蛋白进行反染色(红色)。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150077 1000稀释度(2µg/mL)的山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)。 -
该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 公元16667年 ). IHC图像 公元16667年 使用标准方案F在徕卡BONDTM系统上对福尔马林固定石蜡包埋的正常人扁桃体*切片进行Ki67染色。该切片使用柠檬酸钠缓冲液(pH 6.0,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后将该部分与 公元16667年 1/200稀释,室温下15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作发色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 *从人类研究组织库获得的组织,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持 这张图片是从杂交瘤版本生成的。
实验方案
数据表及文件
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数据表下载
文献 (2)
硅氢合金 等。 Celastrol通过circ_SLIT3/miR-223-3p/CXCR4轴对肝癌的抗肿瘤作用。 癌症管理研究 13:1099-1111 (2021). 公共医学:33574707 詹毅 等。 敲除长非编码RNA HOTAIR通过靶向miR-149-5p/双皮质激素样激酶1轴抑制顺铂抵抗、细胞增殖、迁移和DDP-耐药NSCLC细胞的侵袭。 癌症管理研究 12:7725-7737 (2020). 公共医学:32943921