抗-GFP(ab290)
主要功能和细节
GFP兔多克隆 适用于:ELISA、IHC-Fr、ICC、IHC-P、IP、WB、IHCFoFr、IHC-FrFl、电子显微镜 反应:物种无关 同位素:IgG
选择批间可重复性更高的重组抗体
研究可靠 —— 各批次间结果一致且可重复 长期批量供应 —— 采用重组技术,可实现快速生产 首次实验即可成功 —— 经过大量验证确认了特异性 符合伦理标准 —— 产品不含动物成分
(美国)
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产品名称 -
描述 兔多克隆抗体 至GFP -
宿主 兔子 -
土耳其 抗GFP抗体(ab290)是一种高度通用的抗体,比其他可用的抗GFP抗体提供更强的信号。 在Western blot上,抗体检测表达重组GFP融合蛋白的细胞提取物中的GFP部分,并已证明对福尔马林固定的小鼠切片有用。 在免疫细胞化学中,抗体对COS细胞中表达的重组YES-GFP嵌合物发出非常好的信号(McCabe等人,1999年和下图)。 它被常规用于免疫沉淀(IP)和IP-Western方案。 GFP抗体对所有的 维多利亚多管发光水母 GFP,如S65T-GFP、RS-GFP、YFP、CFP、RFP和EGFP。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 物种无关 -
免疫原 与GFP相对应的重组全长蛋白。 维多利亚蓝绿色荧光蛋白(GFP)。 数据库链接: 第42212页 -
阳性对照 重组A.victoria GFP蛋白( 约84191 )任何其他纯化的重组GFP,任何证实过表达GFP的细胞系。 ICC:NIH3T3、U2OS和腺胃细胞。 IHC:小鼠大脑和狗心脏组织。 WB:样品:COS7和LNCaP全细胞裂解物-转染GFP-Eml4。
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常规说明 总IgG浓度已确定为5 mg/mL。具体IgG含量未知。 本产品在短期储存期间应始终冷藏。 使用消毒设备将减少细菌污染的风险。 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否符合您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存温度为-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.05%叠氮化钠 成分:1.25%氯化钠 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 全抗血清 -
纯化说明 这种抗体是作为完整的抗血清提供的。 由于除感兴趣的抗体外,整个血清还含有许多其他宿主血清蛋白,因此不可能确定准确的抗体浓度。 -
克隆 多克隆 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
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兼容的辅助设备 -
同种型对照 -
重组蛋白 -
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应用
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靶
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相关性 功能: 能量转移受体。 其作用是通过能量转移将蛋白质的蓝色化学发光转换为绿色荧光。 在体内接受钙的能量时发出荧光 2+ -活化的光蛋白aequorin。
子单元结构: 单体。
组织特异性: 光电管。
翻译后修改: 包含由修饰氨基酸残基组成的发色团。 发色团由Ser-65和Gly-67之间的自催化主链缩合以及Tyr-66氧化为二氢酪氨酸形成。 生色团的成熟只需要分子氧。
生物技术应用: 绿色荧光蛋白已被工程化以产生大量不同颜色的突变体、融合蛋白和生物传感器。 荧光蛋白及其突变的等位基因形式,蓝色、青色和黄色,已经成为制造嵌合蛋白的有用且普遍的工具,它们在嵌合蛋白中起到荧光蛋白标签的作用。 通常,它们能耐受N端和C端与多种蛋白质的融合。 它们已在大多数已知的细胞类型中表达,并在活细胞和生物体中用作非侵入性荧光标记物。 它们在细胞谱系示踪剂、基因表达报告器或蛋白质相互作用的测量方面具有广泛的应用。 也可用作分子温度计,可以精确测量流体中的温度。 测量过程依赖于使用荧光相关光谱检测GFP闪烁。
序列相似性: 属于GFP家族。
生物物理化学特性: 吸收:Abs(max)=395 nm 在470 nm处显示较小的吸收峰。 荧光发射光谱在509 nm处达到峰值,肩部在540 nm处。 -
别名 GFP抗体 绿色荧光蛋白抗体
图片
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GFP直接荧光追踪胃上皮内肿瘤基质组织中的骨髓来源浸润细胞。 ( 一个 )普通GFP(−)对照小鼠腺胃的正常组织。 ( B类 )GFP(+)转基因对照小鼠腺胃的正常组织; ( C、 E、D、F )骨髓移植小鼠中诱导的胃上皮内瘤变(GIN)。 通过定位于GIN基质组织的直接荧光追踪GFP(+)BMDC如图所示 C类 和 电子 荧光观察后H&E染色的同一GIN病变载玻片如所示 D类 和 F类 .DAPI( A–C 和 电子 )和苏木精( D类 和 F类 )分别用于可视化细胞核。 图像的位置 C类 和 D类 在图像中 电子 和 F类 、和图像 电子 在图像中 F类 用相应的颜色标记。 胃腺和基质细胞也被标记。 -
用ab290标记GFP的小鼠脑组织切片的免疫组织化学(游离漂浮)分析。 用4%PFA固定组织,用10%的正常山羊血清+驴抗鼠IgG Fab片段(0.1 mg/ml)在室温下封闭30µm冰冻切片1小时。 将切片与一级抗体在TBS+0.25%Triton-X中以1/1000的稀释度在4°C下孵育16小时。 A Cy2型 ® -用稀释度为1/200的结合驴抗兔IgG(H+L)作为二级抗体。 图中显示GFP-cre的抗NeuN(红色)、DAPI(蓝色)和抗GFP染色(绿色、黄色,NeuN共定位)。 -
IHC-P对ab290染色的犬心脏组织切片(Adv-GFP注射液)进行PFA固定,并在柠檬酸(Ph6.0,0.05%吐温20)中进行热介导抗原回收,然后用10%的血清在37°C下封闭30分钟。 将初级抗体在PBS中稀释1/1000,并在25°C下与样品孵育1小时。 HRP共轭次级类 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)(ab205718) 已使用。 -
免疫荧光图像显示Yes-GFP(Yes-PTK的前10个aa融合到GFP的N末端)与全长Yes-PTK的定位相似。 A: 使用小鼠抗Yes抗体检测到Yes的分布,然后是德克萨斯红结合抗鼠抗体B:使用兔抗GFP抗体(Abcam ab290)检测到嵌合GFP,然后是FITC-结合抗兔抗体。 图片由L.G.Berthiaume提供 摘自J.McCabe和L.G.Berthiaume,脂肪酰化氨基末端结构域在亚细胞定位中的功能作用, 细胞分子生物学 10 :3771-3786, 1999 -
表达GFP的HEK293核裂解物中的ab290免疫沉淀GFP。 将20µg裂解液与一级抗体(1µg/mg裂解液)和基质(蛋白g)在4°C的AFC低盐缓冲液中孵育16小时。 对于western blotting,使用ab290(1/5000)来确认免疫沉淀成功。 泳道1:表达GFP输入的HEK293核裂解物。 通道2:表达GFP的HEK293核裂解物的IP。 通道3:没有GFP的细胞。 -
ab290染色GFP转染NIH3T3细胞中的GFP。 细胞用4%甲醛固定(10min),然后用0.1%PBS-Tween中的1%BSA/0.3M甘氨酸封闭1h。 然后在+4°C下用ab290在1/200稀释度下培养细胞过夜,然后用 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)(ab150081) 1μg/ml,持续1小时。 在相同的实验条件下,与转染NIH3T3细胞中GFP表达的基础水平相比,应用ab290的细胞在488通道中发出更强的信号,表明ab290与GFP结合,从而引发信号放大。 ab290也用于非GFP转染的NIH3T3细胞,其未产生阳性染色,表明GFP的特异性。 核DNA用1.43μM DAPI(蓝色)标记。 -
转染Annexin1-GFP的人HEK293细胞中的ab290免疫沉淀物。 将25µg细胞裂解液与一级抗体和基质(蛋白g)在1%TX-100、10%甘油、1X PBS中于4℃孵育16小时。 在Western blotting中,使用稀释度为1/5000的抗兔HRP结合二级抗体。 通道1:表达Annexin1-GFP融合蛋白的HEK293细胞裂解物。 通道2:带抗GFP的IP。 车道3:非绑定分数。 -
ab290用ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)染色表达TRF2-GFP融合蛋白的U2OS细胞中的GFP。 细胞用甲醛固定,用NP40透化,并在21°C下用3%BSA封闭1小时。 样品与一级抗体(PBS中的1/1000+3%BSA)在4°C下孵育12小时。 一个 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)(ab150077) 以1/500的稀释度作为二级抗体。 绿色-GFP。 蓝色-DAPI。 -
1/2500稀释度的抗-GFP抗体(ab290)+ 重组维多利亚A.victoria GFP蛋白( 约84191 )0.01微克 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)预吸附( 约97080 )稀释1/5000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 27千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 30秒 -
所有车道: 1/5000稀释度的抗-GFP抗体(ab290) 车道1: LNCaP全细胞裂解物-pEGFP空载体 车道2: LNCaP全细胞裂解物-pEGFP-PKD1转染 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP-结合山羊抗兔IgG(1/10000稀释) 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 暴露时间: 10秒 在23°C下用5%的牛奶封闭1小时。 在4°C下与一级抗体孵育16小时。 -
所有车道: 1/5000稀释度的抗-GFP抗体(ab290) 车道1: COS7全细胞裂解物-转染GFP-Eml4 车道2: 转染GFP的COS7全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP-结合猪抗兔IgG 1/5000稀释 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 30千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 10秒 在20°C下用5%的牛奶封闭1小时。 在含2%牛奶和1%吐温的TBS中,在4°C的温度下用一级抗体培养18小时。 Eml4~120 kDa的预测MW。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (3088)
阿卜杜勒巴基A 等。 重温APC/CFZR1靶向所需的人类AURKA中的degron基序。 生命科学联盟 6:不适用(2023年)。 公共医学:36450448 Nieuwenhuis B公司 等。 改善腺相关病毒(AAV)载体介导的视网膜神经节细胞转基因表达:五种启动子的比较。 基因疗法 不适用:不适用(2023年)。 公共医学:36635457 巴比里G 等。 Sec61通道亚单位Sbh1/Sec61β通过次优靶序列促进蛋白质的内质网移位,并通过磷酸化进行微调。 生物化学杂志 299:102895 (2023). 公共医学:36639027 吉宁YK 等。 导致脊髓小脑共济失调34的ELOVL4突变不同程度地改变了超长链脂肪酸的生物合成。 脂质研究杂志 64:100317 (2023). 公共医学:36464075 史密茨DJ 等。 CLEC16A与逆转录酶和TRIM27相互作用,其丢失会损害内体运输和神经发育。 人类遗传学 142:379-397 (2023). 公共医学:36538041