主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[E83-77]抗裂解半胱氨酸蛋白酶-3 适用于:WB、ICC/IF 敲除已验证 与以下物质反应:人类,重组片段
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E83-77]至裂解半胱氨酸蛋白酶-3 -
宿主 兔子 -
特异性 小鼠、大鼠:我们有初步的内部测试数据,表明这种抗体可能不会与这些物种发生反应。 请联系我们了解更多信息。 该抗体仅检测到活性(裂解)形式的半胱氨酸蛋白酶-3,而不识别半胱氨酸酶-3的前体。 PubMedID 19789217描述了对注射到小鼠体内的人类细胞的检测。 只有在发生凋亡事件时,蛋白酶-3才被裂解。 因此,为了检测活性Caspase-3,我们强烈建议诱导样品进入凋亡途径。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人,重组片段 -
免疫原 人裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 aa 1-100(N末端)内的合成肽。 确切的顺序是专有的。 与人类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(p17亚单位的N末端)Ser29后的残基相对应的合成肽。 数据库链接: 第42574页 -
阳性对照 WB:野生型HAP1+2uM Staurosporine( 约146588 )24小时,全细胞裂解; Jurkat细胞裂解物(喜树碱处理); HeLa细胞裂解物(staurosporine处理)。 ICC/IF:Hela细胞(星形孢菌素处理); 人血管内皮细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 交付后,将等分样品储存在-20°C下。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:49%PBS、50%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 E83-77号 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 参与负责凋亡执行的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶的激活级联。 在细胞凋亡开始时,它以蛋白质水解的方式切割聚ADP-核糖聚合酶(PARP)- -Gly-217'键。 切割并激活基本螺旋-环-螺旋-亮氨酸拉链结构域和膜连接结构域之间的固醇调节元件结合蛋白(SREBP)。 劈开并激活半胱天冬酶-6、-7和-9。 参与亨廷顿蛋白的分裂。 通过RET分裂触发交感神经元的细胞粘附。 -
组织特异性 在肺、脾、心、肝和肾中高表达。 大脑和骨骼肌中含量适中,睾丸中含量较低。 在许多细胞系中也发现,在免疫系统的细胞中表达最高。 -
序列相似性 属于肽酶C14A家族。 -
翻译后修饰 颗粒酶B、caspase-6、caspase8和caspase-10裂解产生两个活性亚基。 前肽的额外加工可能是由于活化蛋白酶的自催化活性。 caspase-7蛋白酶小亚基和caspase-3大亚基之间也存在活性异二聚体,反之亦然。 在未刺激的人类细胞系中,S-亚硝酰化在其催化位点半胱氨酸上,在Fas凋亡途径激活时反硝化,与细胞内caspase活性增加相关。 因此,Fas不仅通过诱导caspase酶原裂解为其活性亚单位,而且通过刺激其活性位点硫醇的反硝化作用来激活caspase-3。 -
细胞定位 细胞质。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 活性caspase 3抗体 载脂蛋白抗体 CASP 3抗体
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图片
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所有车道: 1/500稀释的抗叶Caspase-3抗体[E83-77](ab32042) 车道1: 野生型HeLa处理的Staurosporine(2uM,4h)细胞裂解物 车道2: CASP3敲除HeLa处理的Staurosporine(2uM,4h)细胞裂解物 3号车道: 野生型HeLa车辆控制Staurosporine(0uM,4h)细胞裂解物 车道4: CASP3敲除HeLa车辆控制Staurosporine(0uM,4h)细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 32千帕 观察到的频带大小: 16.28千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot:1/500稀释的抗-CASP3抗体[E83-77](ab32042)染色,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab32042显示与CASP3特异结合。 在处理过的野生型HeLa细胞裂解液中,在16/28kDa处观察到一条带,在CASP3敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成此图像,分析了野生型和CASP3敲除HeLa细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
车道1: 野生型HAP1+DMSO 24小时,全细胞裂解物(20µg) 车道2: 野生型HAP1+2uM Staurosporine( 约146588 )24小时,全细胞裂解物(20µg) 3号车道: HAP1 CASP3 KO+DMSO 24小时,全细胞裂解物(20µg) 车道4: HAP1 CASP3 KO+2uM Staurosporine公司( 约146588 )24小时,全细胞裂解物(20µg) 车道5: HeLa+DMSO 24小时,全细胞裂解物(20µg) 车道6: HeLa+2uM Staurosporine( 约146588 )24小时,全细胞裂解物(20µg) 1-6车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在17 kDa下观察到ab32042。 红色-装载控制, 约130007 ,在130kDa下观察到。 当使用CASP3(Caspase-3)敲除样品时,ab32042显示出与CASP3的特异性反应。 对HAP1野生型和CASP3(Caspase-3)敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab32042和 约130007 (小鼠抗病毒素负荷对照)分别在4°C、500稀释度和1/10000稀释度下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 治疗前,细胞生长到汇合处。 -
高葡萄糖诱导人血管内皮细胞(VEC)凋亡。 用ab32042检测切割的天冬氨酸蛋白酶-3免疫荧光,分析VEC的凋亡反应。 用低葡萄糖(LG)或高糖(HG)处理细胞72小时,然后用100 ng/mL bFGF、1μM sp600125(sp)或1μM U0126(U)或10μM MnTmPyP处理细胞1小时。 棒材=100μm。 -
Ab32042,稀释1/100,免疫荧光染色HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞。 左图:控件。 右图:staurosporine治疗。 -
所有车道: 1/500稀释的抗叶Caspase-3抗体[E83-77](ab32042) 车道1: 20µg HeLa全细胞裂解液(2 uM Staurosporine,4Hr) 车道2: 20µg HeLa全细胞裂解液(未经处理) 3号车道: 0.1µg时的裂解半胱氨酸蛋白酶3(重组蛋白) 次要 所有车道: 800CW羊抗狂犬病IgG(1/10000稀释) 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 32千帕 其他波段位于: 17 kDa(可能成熟(加工)蛋白质) -
车道1: 抗脯氨酸半胱氨酸蛋白酶3(1/10000稀释) 车道2: 抗脯氨酸半胱氨酸蛋白酶3(1/10000稀释) 3-4车道: 1/500稀释的抗叶Caspase-3抗体[E83-77](ab32042) 车道1: Jurkat(外周血T细胞白血病细胞系)细胞裂解物 2号和4号车道: Jurkat细胞裂解物+喜树碱 3号车道: Jurkat细胞裂解物 预测的带宽大小: 32千帕 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 30千Da。 我们不确定这些额外波段的身份。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (610)
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