Your browser does not have JavaScript enabled and some parts of this website will not work without it.
为了使您在阿布卡姆官网的浏览体验更顺畅,请使用最新版本的浏览器比如谷歌浏览器
看看我们的BETA网站,看看我们到目前为止做了什么。
搜索和浏览所选产品
通过您通常的经销商购买
欢迎光临
您还没有帐户?
定制化产品和商务合作加速您的诊断和治疗项目
定制化产品
与我们成为伙伴
获取路线
查看支持中心
一步一步完成您的实验
查看协议
活动说明、摘要提交、演讲者、注册方式及更多信息
查看全球活动安排
查看所有通路
查看交叉通路
伊姆比尔
需求
抗体是生命科学和临床研究中最常用的工具之一,用于研究各种生物学通路和疾病中的蛋白质及其功能。
好的抗体具有靶标特异性和灵敏度,即使在低表达水平下也能识别目的蛋白。但是,越来越多的研究表明,并非所有抗体都具有靶标特异性,也有许多抗体表现出与脱靶蛋白的交叉反应性。从而导致实验不可重复性这一公认问题。1这些非特异性抗体会导致资源浪费,并妨碍科学进步。2,3
解决方案:敲除验证
接受度最广且最受信任的抗体特异性验证过程之一是基因敲除 (KO)批准4击倒对手验证是一项非常稳健的技术,可在不表达目的蛋白的 击倒对手细胞系或组织中通过检测目的抗体来确证其特异性。
在 击倒对手细胞系中测试特异性抗体时,特异性抗体不会产生信号,但在野生型 (重量)细胞系测试特异性抗体时,特异性抗体会产生特异性靶蛋白信号。以这种方式,击倒对手验证作为真正的阴性对照,以确认抗体对目标蛋白的特异性。4,5
阿布卡姆KO倍KO系统公司CRISPR-Cas9,桑格测序鉴定。这种类型的 击倒对手细胞系提供了来自单个等位基因 击倒对手第二部分:6-8
当 击倒对手验证我们的抗体时,我们主要使用 western blot(蛋白质印迹).KO验证可产生一系列 西方印迹这是一个很好的例子
特异性抗体
图1: Cdk4 RabMAb公司®产品 (ab108357)击倒对手样本中正确分子量 (兆瓦)的预期条带消失。
所有泳道:1/1000 稀释度的Cdk4公司[EPR4513](ab108357)
泳1: 野生型 HAP1型细胞裂解液泳2:Cdk4;HAP1中国
预测条带大小:34千帕观测条带大小:34千帕内参对照品(红色条带):千分之一β(ab8226)
二抗:免疫球蛋白800(H+L)IR、680 IgG(H+L)均为 1/10,000 稀释度
外科手术-额外条带
图2:Cdk6号机组小鼠单克隆产品 (ab54576)KO兆瓦的预期条带消失;因此,抗体可识别其预期靶标。然而,在 WT和KO样本中也存在额外条带。这可能是由于抗体与其他蛋白家族成员/亚型或不相关的蛋白质有交叉反应。
所有泳道:1/1000 稀释度的Cdk6(ab54576)泳1:野生型 HAP1甜品泳2:Cdk6 HAP1甜品
预测条带大小:37千道尔顿观测条带大小:37千道尔顿
内参对照品(红色条带):1/1000 稀释度的β受体(ab8227)
二抗:IR、800型IgG(H+L)免疫球蛋白680(H+L)均为 1/10,000 稀释度
土耳其–KO公司样本中的弱信号
图三:Akt1 RabMAb公司®产品 (ab32038)击倒对手样本中存在正确 兆瓦的预期条带,但强度低于 重量样本。然而,该抗体可能与样本中分子量与目标蛋白相同的其他蛋白家族成员/亚型有交叉反应。
所有泳道:1/1000 稀释度的Akt1(ab32038)
泳1:野生型 HAP1甜品泳2:Akt1 HAP1甜品
预测条带大小:55千Da观测条带大小:55-60千帕
内参对照品(完):1/1000 稀释度的β(ab8226)
二抗:免疫球蛋白800(H+L)IR、680 IgG(H+L)均为 万分之一
非特异性抗体–KO公司样本中的信号
图4:Akt1(ab91505)击倒对手样本中仍存在预期的 MW、WT样本相同。使用基准抗体会在 重量中显示目标条带,而在 击倒对手样本中无条带。
所有泳道:Akt1(ab91505),1:1000泳1:野生型 HAP1甜品泳2:Akt1 HAP1甜品
非特异性抗体-KO公司和重量样本中均无目标条带
当看到 击倒对手验证标记时,您可以相信该抗体不仅在推荐的应用和种属中得到了验证,而且其特异性也已经通过我们内部 的击倒对手验证方法得到了确认。
查看我们的击倒对手验证抗体的完整列表。
我们应用 CRISPR-Cas9公司技术开发了广泛的 击倒对手细胞系和裂解液,从而为您提供可靠的抗体,节省您的时间和金钱。每个 击倒对手细胞系都是单独克隆并通过 桑格测序验证的,同时内附亲代 重量我觉得这是一个很好的例子
查看我们的基因敲除细胞裂解液的完整列表。
查看我们的基因敲除细胞系的完整列表。