主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 10月4日至ChIP级的兔单克隆抗体[EPR17929] 适用于:WB、ICC/IF、IP、IHC-P、ChIP-sequencing、ChIP、Flow Cyt(Intra) 反应对象:老鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR17929]至10月4日-ChIP等级 -
宿主 兔子 -
土耳其 Oct4在未分化胚胎干细胞和癌干细胞样细胞中高度表达(PMID:2601316221826175)。 即使稀释1:200,该抗体也无法在低表达Oct4的未分化癌细胞系中检测到靶带,如HeLa、HEK-293、MDA-MB-231、HepG2、Huh7、HCT-116和PANC-1(PMID:21975933、29789579、2562591、26059097、23928699、27344963、25837691、29254202、28854261、27996162)。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 预测可用于: 鼠、羊、马、牛、猪、普通狨猴 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:NCCIT、F9和NTERA-2 cl.D1全细胞裂解物。 IHC-P:卵巢组织的人精原细胞瘤和无性细胞瘤。 ICC/IF:NCCIT细胞。 IP:NCCIT全细胞提取物。 ChIP:由F9细胞制备的染色质。 ChIP-seq:NCCIT细胞。 流式细胞仪(内部):NCCIT细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 运输温度为4°C。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油、0.05%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR17929 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
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应用
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靶标
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功能 与八聚体基序(5'-ATTTGCAT-3')结合的转录因子。 与DNA上的SOX2形成三聚体复合体,并控制许多参与胚胎发育的基因的表达,如YES1、FGF4、UTF1和ZFP206。 对早期胚胎发生和胚胎干细胞多能性至关重要。 -
组织特异性 在发育中的大脑中表达。 在皮层、嗅球、海马体和小脑的特定细胞层中含量最高。 成人组织中表达水平低。 -
序列相似性 属于POU转录因子家族。 5类亚科。 包含1个同源盒DNA-结合域。 包含1个POU特定域。 -
发展阶段 在未分化胚胎干细胞中高表达,在类胚体(EB)形成后表达逐渐减少。 -
结构域 POU特异性域介导与PKM2的相互作用。 -
翻译后修饰 氨酰化增强了蛋白质的稳定性、DNA结合和反式激活活性。 增强YES1表达需要Sumoylation。 泛素化; 通过WWP2进行“Lys-63”连接的多泛素化,导致蛋白酶体降解。 -
细胞定位 核心。 以弥散和略带标点符号的模式表达。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 282316 奶牛 Entrez基因: 5460 人类 Entrez基因: 18999 鼠标 Entrez基因: 100127461 清管器 Entrez基因: 294562 大鼠 Omim公司: 164177 人类 瑞士保护银行: O97552号 奶牛 瑞士保护银行: Q01860问题 人类
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别名 八聚体结合转录因子4抗体 MGC22487抗体 10月3日抗体
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图片
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流式细胞术重叠直方图显示左侧NCCIT阳性细胞和右侧阴性HeLa经ab181557染色(红线)。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在含有10%正常山羊血清的1x PBS中,以阻止非特异性蛋白-蛋白质相互作用,随后使用抗体(ab181557)(1x 10 6 在22°C下,以0.2μg/ml(1/10300)的浓度在100μl中放置30分钟。 将二级抗体山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附液在1/4000的温度下于22°C孵育30分钟 同位素对照抗体(黑线)为重组兔IgG,单克隆[EPR25A]-同位素对照,使用的浓度和条件与主要抗体相同。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体在相同条件下用80%甲醇(5分钟)/0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟的NCCIT Fixed中发出阳性信号。 -
染色质是根据Abcam X-ChIP协议从F9(鼠胚睾丸癌细胞系)细胞中制备的。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、5µg ab181557(红色)和20µl抗兔IgG sepharose珠进行ChIP。将5μg兔正常IgG添加到珠对照(灰色)中。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(Sybr green方法)定量。 “pro”代表启动子区,“NC2”代表阴性对照,即启动子区的阴性位点。 -
所有车道: 1/2000稀释的抗Oct4抗体[EPR17929]-ChIP等级(ab181557) 车道1: 人多能干胚胎癌上皮细胞全细胞裂解物 车道2: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 3号车道: HEK-293(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: MDA-MB-231(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道5: HepG2(人肝癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道6: Huh7(人肝癌上皮细胞)全细胞裂解物 7号车道: HCT 116(人结直肠癌上皮细胞)全细胞裂解物 第8车道: PANC-1(人胰腺上皮样癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 39千帕 观察到的频带大小: 45千帕 为什么实际频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3秒 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST Oct4在未分化胚胎干细胞和癌干细胞样细胞中高度表达(PMID:2601316221826175)。 ab181557在低表达Oct4的未分化癌细胞系中,如HeLa、HEK-293、MDA-MB-231、HepG2、Huh7、HCT-116和PANC-1(PMID:21975933、29789579、2562591、26059097、23928699、27344963、25837691、29254202、28854261、27996162),即使稀释度为1:200,也无法检测到靶带。 -
对4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透性NCCIT(人类多能干胚胎癌)细胞(阳性细胞系)或NIH/3T3(小鼠embyro成纤维细胞)细胞(阴性细胞系)进行免疫荧光分析,在1/250稀释度下用ab181557标记Oct4,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488)( 约150077 )1/400稀释度的二级抗体(绿色)。 共聚焦图像显示NCCIT细胞系上的核染色和弱细胞质染色。 NIH/3T3细胞株呈阴性表达。 核反染为DAPI(蓝色)。 用检测到Tubulin 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/500 ab150120型 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/500(红色)。 阴性对照如下: -ve对照1:ab181557,1/250稀释,然后 ab150120型 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/500。 -ve控制2: 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/1000,然后 约150077 (Alexa Fluor®488山羊抗兔IgG H&L),1/4稀释。 -
染色质是从NCCIT(人类多潜能胚胎癌细胞系)细胞中制备的。 使用10^7个NCCIT细胞和8µg ab181557[EPR17929]进行ChIP。 ChIP DNA在Illumina NovaSeq 6000上进行测序,深度为3000万次。 可以下载映射读取的其他屏幕截图 在这里 . -
ab181557通过ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)对人胚胎干细胞中的Oct4进行染色。 用甲醛固定细胞,用0.1%Triton在PBS中渗透1小时,用10%血清在25°C下封闭1小时。 样品与一级抗体(1/200,PBS中含有0.1%吐温20)在4°C下孵育16小时。 一种单克隆山羊抗兔Alexa Fluor ® 594作为次级抗体,稀释度为1/200。 -
Oct4从1mg NCCIT(人类多能性胚胎癌)全细胞提取物中以1/50稀释的ab181557进行免疫沉淀。 使用ab181557在1/10000稀释度下对免疫沉淀物进行Western blot。 抗抗体IgG(HRP)是针对非还原型IgG的,以1/1500稀释度作为二级抗体。 通道1:NCCIT全细胞提取物10µg(输入)。 第2通道:NCCIT全细胞提取物中的ab181557 IP。 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )而不是NCCIT全细胞提取物中的ab181557。 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:3分钟 -
所有车道: 抗Oct4抗体[EPR17929]-ChIP等级(ab181557),稀释度为1/1000 车道1: NCCIT(人类多潜能胚胎癌)全细胞裂解物 车道2: F9(小鼠胚胎-睾丸癌细胞系)全细胞裂解物 3号车道: NTERA-2 cl.D1(人类恶性多潜能胚胎癌)全细胞裂解物 车道4: 小鼠睾丸裂解物 车道5: 人海马裂解物 车道6: 人小脑裂解物 7号车道: 人睾丸裂解物 第8车道: NIH/3T3(鼠胚成纤维细胞)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 39千帕 观察到的频带大小: 45千帕 为什么实际频带大小与预测的不同? 暴露时间: 5秒 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 成人组织低表达 -
ab181557通过细胞内流式细胞术对人类细胞系NCCIT(人类多能干胚胎癌)中的OCT-4进行染色。 用4%多聚甲醛固定细胞,并将样品与一级抗体以1/70的稀释度孵育。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488),稀释度为1/2000,用作二级抗体(红色)。 同位素对照:兔IgG单克隆[EPR25A] 约172730 (黑色)。 未标记对照:未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞(蓝色)。
数据表及文件
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合格证书
文献 (106)
严S 等。 用费莫氧醇对仿生水凝胶诱导的人类间充质干细胞球体进行细胞外磁标记,用于MRI追踪。 生物活性物质 19:418-428(2023年)。 公共医学:35574059 张XZ 等。 叶酸挽救了丙戊酸钠诱导的人多能干细胞神经玫瑰花结的形态发生抑制。 前细胞神经科学 16:888152 (2022). 公共医学:35651759 巴纳达SM 等。 基因组特征是SVA转座子作为人类多能干细胞中的顺调控元件相互作用的基础。 公共科学图书馆-基因 18:e1010225(2022)。 公共医学:35704668 陈X 等。 载VEGF的肝素化凝胶-羟基磷灰石-磷酸三钙支架通过增强成骨-血管生成耦合加速骨再生。 Front Bioeng生物技术 10:915181 (2022). 公共医学:35757798 高X 等。 成纤维细胞生长因子12的耗竭抑制结直肠癌的生存能力、干细胞和运动能力。 生物识别识别 2022:9948461 (2022). 公共医学:35860801