主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 ATM-ChIP级单克隆兔[EPR20100] 适用于:Flow Cyt(Intra)、ICC/IF、IP、ChIP、WB 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR20100]至ATM-ChIP等级 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:人睾丸裂解物; HeLa、PC-12、RAW 264.7、293和SH-SY5Y全细胞裂解物。 ICC/IF:SH-SY5Y和HeLa细胞。 流式细胞术(内部):HEK-293细胞。 IP:HEK-293全细胞裂解物。 ChIP:用1mM羟基脲处理HCT 116细胞16小时后制备的染色质。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 (伊拉克) -
克隆编号 EPR2010年 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶在双链断裂(DSB)、凋亡和基因毒性应激(如电离紫外线A光(UVA))时激活检查点信号,从而充当DNA损伤传感器。 识别组蛋白变体H2AX/H2AFX双链断裂(DSB)的底物一致序列[ST]-Q。磷酸化酶“Ser-139”,从而调节DNA损伤反应机制。 也在前B细胞等位基因排除中发挥作用,该过程导致单个免疫球蛋白重链等位基因的表达,以增强单个B淋巴细胞上表达的B细胞抗原受体(BCR)的克隆性和单特异性识别。 在一个免疫球蛋白等位基因上的RAG复合体引入DNA断裂后,通过介导第二个等位基因向着丝粒周围异染色质的重新定位,阻止对RAG复合物的接近和第二个等位基因的重组。 还参与信号转导和细胞周期控制。 可能起到抑癌作用。 激活ABL1和SAPK所必需的。 磷酸化物p53/TP53、FANCD2、NFKBIA、BRCA1、CTIP、尼伯林(NBN)、TERF1、RAD9和DCLRE1C。 可能在囊泡和/或蛋白质运输中发挥作用。 可能在T细胞发育、性腺和神经功能方面发挥作用。 在复制依赖性组蛋白mRNA降解中发挥作用。 结合DNA末端。 -
组织特异性 发现于胰腺、肾脏、骨骼肌、肝脏、肺、胎盘、大脑、心脏、脾脏、胸腺、睾丸、卵巢、小肠、结肠和白细胞。 -
疾病相关 ATM缺陷是共济失调毛细血管扩张症(AT)的原因[MIM:208900]; 也称为路易斯·巴尔综合征,包括四个互补组:A、C、D和E。这种罕见的隐性疾病的特征是进行性小脑共济失调、结膜和眼球血管扩张、免疫缺陷、生长迟缓和性发育不成熟。 AT患者有很强的癌症倾向; 约30%的患者发生肿瘤,尤其是淋巴瘤和白血病。 受影响个体的细胞对电离辐射的损伤高度敏感,对辐射后DNA合成的抑制具有抵抗力。 注:ATM缺陷导致T细胞急性淋巴细胞白血病(TALL)和T前淋巴细胞白血病(TPLL)。 TPLL的特点是白细胞计数高,以前淋巴细胞为主,脾肿大、淋巴结病、皮肤损伤和浆液性积液明显。 临床病程具有高度侵袭性,化疗反应差,生存期短。 TPLL在成人和年轻AT患者中均为散发性疾病。 注=ATM缺陷导致B细胞非霍奇金淋巴瘤(BNHL),包括套细胞淋巴瘤(MCL)。 注=ATM缺陷导致B细胞慢性淋巴细胞白血病(BCLL)。 BCLL是老年人最常见的白血病。 其特征是成熟CD5+B淋巴细胞的积聚、淋巴结病、免疫缺陷和骨髓衰竭。 -
序列相似性 属于PI3/PI4-激酶家族。 ATM子系列。 包含1个FAT域。 包含1个FATC域。 包含1个PI3K/PI4K域。 -
结构域 FATC域是与KAT5交互所必需的。 -
翻译后修饰 通过NUAK1/ARK5进行磷酸化。 Ser-367、Ser-1893和Ser-1981的自身磷酸化与DNA损伤介导的激酶激活相关。 DNA损伤时的乙酰化是激活激酶活性、二聚体-单体转化和随后Ser-1981的自磷酸化所必需的。 KAT5/TIP60体外乙酰化。 -
细胞定位 核心。 细胞质小泡。 主要是核武器。 在与β-适应素相关的内吞小泡中也发现。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 A-T突变抗体 A-T突变同源抗体 AT突变抗体
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图片
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所有车道: 抗-ATM抗体[EPR20100]-ChIP等级(ab201022),稀释度为1/1000 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: ATM敲除A549细胞裂解物 3号车道: HEK-293细胞裂解物 车道4: U-2 OS细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 351千帕 观察到的频带大小: 350千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗-ATM抗体[EPR20100]-ChIP级染色,稀释度为1/1000,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab201022显示与ATM特异结合。 在野生型A549细胞裂解物中观察到350kDa的条带,在ATM敲除细胞系中没有观察到该大小的信号 约276095 (敲除细胞裂解物 约283834 ). 为了生成此图像,分析了野生型和ATM敲除A549细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中5%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
所有车道: 抗-ATM抗体[EPR20100]-ChIP等级(ab201022),稀释度为1/1000 车道1: 野生型MCF7细胞裂解物 车道2: ATM敲除MCF7细胞裂解物 3号车道: 野生型A549细胞裂解物 车道4: ATM淘汰A549 ab283811号 细胞裂解产物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 351千帕 观察到的频带大小: 350千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 稀释1/1000的抗-ATM抗体[EPR20100](ab201022)染色,以绿色显示; 鼠抗CANX[CANX/1543]( ab238078型 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab201022显示与ATM特异结合。 在野生型MCF7细胞裂解物中观察到350kDa的条带,在ATM杂合敲除细胞系中观察到该大小的信号减少 约282630 为了生成此图像,分析了野生型和ATM杂合敲除MCF7细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与主要抗体孵育过夜之前,在TBS-0.1%吐温$®$20(TBS-T)中的3%牛奶中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000 -
抗-ATM抗体[EPR20100]-1/5000稀释时的ChIP等级(ab201022)+HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解液(10µg) 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 351千帕 观察到的频带大小: 351千帕 暴露时间: 10秒 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 抗-ATM抗体[EPR20100]-ChIP等级(ab201022),稀释度为1/1000 车道1: 人睾丸裂解物 车道2: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系)全细胞裂解物 3号车道: RAW 264.7(Abelson小鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞系)全细胞裂解物 车道4: 293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 车道5: SH-SY5Y(人骨髓神经母细胞瘤细胞系)全细胞裂解物 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 351千帕 观察到的频带大小: 351千帕 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 曝光时间:车道1和2:3分钟; 3号车道:30秒; 第四车道:5秒; 第五车道:1秒 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞的免疫荧光分析,以1/500稀释度ab201022标记ATM,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor)标记ATM ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共焦图像显示HeLa细胞系上的核染色和弱细胞质染色。 核反染为DAPI(蓝色)。 用检测到Tubulin 约195889年 (抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor ® 594)),稀释度为1/200(红色)。 仅二级抗体对照:用PBS代替一级抗体,二级抗体为山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)( 约150077 )稀释度为1/1000。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透性SH-SY5Y(人骨髓神经母细胞瘤细胞系)细胞的免疫荧光分析,在1/500稀释度下用ab201022标记ATM,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 显示SH-SY5Y细胞系细胞核和弱细胞质染色的共聚焦图像。 核反染为DAPI(蓝色)。 用检测到Tubulin 约195889年 (抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor ® 594)),稀释度为1/200(红色)。 仅二级抗体对照:用PBS代替一级抗体,二级抗体为山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)( 约150077 )稀释度为1/1000。 -
4%副甲醛固定HEK-293(胚胎肾人上皮细胞系)细胞的细胞内流式细胞术分析,以1/800稀释度(红色)ab201022标记ATM,并与兔单克隆IgG同型对照进行比较( 约172730 ; 黑色)和未标记对照(未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞;蓝色)。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)以1/2000稀释度作为二级抗体。 -
ATM由0.35 mg HEK-293(胚胎肾人上皮细胞系)全细胞裂解液和ab201022以1/40稀释度进行免疫沉淀。 使用ab201022在1/1000稀释度下对免疫沉淀物进行Western blot。 用于IP检测反应的VeriBlot(HRP)( 约131366 ),在1/10000稀释度下用于检测。 泳道1:HEK-293全细胞裂解物,10μg(输入)。 通道2:ab201022 IP在HEK-293全细胞裂解液中。 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )而不是HEK-293全细胞裂解液中的ab201022。 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:3分钟。 ATM裂解之前已有文献记载,片段模式与文献PMID:16849690中描述的一致 -
用1mM羟基脲处理HCT 116(人结直肠癌细胞系)细胞16小时,然后根据Abcam X-ChIP协议未处理,制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、2µg ab201022(蓝色)和20µl抗兔IgG sepharose珠进行ChIP。 将2μg兔正常IgG添加到珠子对照品中(黄色)。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(Sybr green方法)定量。
数据表及文件
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合格证书
文献 (4)
王毅 等。 Ser195处MAD2的磷酸化促进纺锤体检查点缺陷并使肿瘤细胞对ATM缺乏细胞的放射治疗敏感。 前电池开发生物 10:817831 (2022). 公共医学:35309941 郝J 等。 清莪丸通过ATM丝氨酸/苏氨酸激酶(ATM)和PI3K/AKT通路抑制原发性骨质疏松症成骨细胞铁下垂。 前沿药理学 13:902102 (2022). 公共医学:35865965 胡斯 等。 LINCS基因表达特征分析显示,波苏替尼通过靶向eIF4G1对乳腺癌细胞具有放射增敏作用。 国际分子医学杂志 47:不适用(2021年)。 公共医学:33693953 Yenerall P公司 等。 RUVBL1/RUVBL2 ATP酶活性驱动肺癌中PAQ小体成熟、DNA复制和放射抗性。 细胞化学生物学 27:105-121.e14(2020)。 公共医学:31883965