跳到主页面内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2022年12月31日；23(1):243-253.
doi:10.1080/15384047.2022.2054244。

NEDD4L通过诱导ENO1泛素化和降解抑制口腔鳞癌中癌细胞的糖酵解和增殖

张广平 1, 赵欣（音译） 2, 刘伟贤 1
附属公司

NEDD4L通过诱导ENO1泛素化和降解抑制口腔鳞癌中癌细胞的糖酵解和增殖

张广平等。 癌症生物治疗. .

摘要

糖酵解有助于细胞代谢，促进口腔鳞状细胞癌（OSCC）的细胞增殖，OSCC是最常见的口腔癌类型。了解OSCC细胞糖酵解的调控机制可能会提供重要的治疗启示。用免疫组织化学方法检测人口腔鳞癌组织中的蛋白定位模式，并用Western blot检测蛋白水平。慢病毒转导用于过度表达或沉默感兴趣的基因。通过细胞计数试剂盒（CCK）-8测定法评估细胞增殖，同时通过测量细胞外酸化率、耗氧率、乳酸和ATP产生来检测糖酵解。体内用小鼠肿瘤生长模型评估肿瘤的发展。与正常组织相比，OSCC组织NEDD4L表达降低。NEDD4L表达与患者5年生存率呈正相关，表明NEDD4L可能是OSCC的预后标志物。NEDD4L过度表达抑制OSCC细胞的增殖、细胞周期转换和糖酵解，并抑制体内肿瘤生长。UbiBrowser确定ENO1（一种催化糖酵解的酶）为NEDD4L的底物。NEDD4L的过度表达导致ENO1的泛素化和随后的降解，而ENO1过度表达逆转了NEDD4L过度表达的功能效应，恢复了OSCC细胞的增殖、细胞周期转换和糖酵解。NEDD4L通过刺激ENO1泛素化和降解，抑制OSCC细胞增殖、细胞周期转换和糖酵解，从而诱导肿瘤抑制功能。我们的结果揭示了一个对OSCC细胞生存和代谢至关重要的信号轴，它可以作为潜在的治疗靶点。

关键词：细胞周期；ENO1；糖酵解；增殖。

PubMed免责声明

利益冲突声明

提交人没有报告任何潜在的利益冲突。

数字

在OSCC组织中，NEDD4L的mRNA和蛋白水平较低，NEDD4高表达患者的5年生存率远高于低表达患者（p<0.05）。
图1。
NEDD4L在口腔鳞癌组织中的表达水平较低，与预后相关。对第1或2期口腔鳞癌组织（I/II）、第3或4期口腔鳞状细胞癌组织（III/IV）和邻近非肿瘤组织（正常）的石蜡切片进行评估。（a） NEDD4L mRNA水平的平均值±标准偏差和各点**p<0.01***与正常值相比，p<0.001##与I/II相比，p<0.01；通过方差分析进行评估，然后进行Tukey检验。（b） 典型的Western blot图像显示组织中NEDD4L的蛋白表达水平。（c） 代表性免疫组织化学（IHC）图像显示NEDD4L在NEDD4L-低和高肿瘤组织中的分布。（d） 使用Log-rank检验比较NEDD4L表达水平高或低的患者生存概率。
在OSCC细胞中过表达NEDD4L抑制细胞增殖（CCK8测定）并触发细胞周期停滞，抑制糖酵解（ECAR、OCR、乳酸和ATP）。
图2。
OSCC细胞过度表达NEDD4L抑制细胞增殖，触发细胞周期阻滞，抑制糖酵解。（a） Western blot结果显示用控制载体或NEDD4LOE转导的OSCC细胞系（SCC15和CAL27）中NEDD4L表达水平。（b） 含或不含NEDD4LOE转导的OSCC细胞增殖试验结果。（c） 细胞周期分析结果显示了DNA含量水平的流式细胞术评估（左侧；绿色、黄色和青色分别代表G0/G1、S和G2/M期的细胞）以及不同期细胞亚群的计算分数（右侧）。（d） Western blot结果显示，无论有无NEDD4LOE转导，OSCC细胞中p21和p27的表达水平。（e-f）有或没有NEDD4LOE转导的OSCC细胞中细胞外酸化速率（ECAR）（e）和耗氧速率（OCR）（f）的平均值±S.e.M。（g-h）含或不含NEDD4LOE转导的OSCC细胞的乳酸（g）和ATP（h）生成量的平均值±S.E.M**p<0.01***p＜0.001，通过双尾Student t检验进行评估。
NEDD4L过表达抑制体内肿瘤生长，注射NEDD4LOE-trasninduced SCC15细胞的小鼠比注射正常SCC15的小鼠存活时间更长。
图3。
NEDD4L过度表达抑制小鼠肿瘤生长。裸鼠皮下注射有或无NEDD4LOE转导的SCC15细胞。（a） 从第12天到第33天跟踪肿瘤体积。（b） 第33天的肿瘤图片（顶部）和体重（底部；个人得分和平均值±S.D.）。（c） 显示Ki67分布的代表性IHC图像。（d） Western blot结果显示NEDD4L、p21和p27在代表性肿瘤组织中的表达水平。（e） NEDD4L过表达与否小鼠存活概率的比较*p<0.05***p<0.001，通过双尾Student t检验进行评估。
NEDD4L与ENO1结合并诱导其泛素化，在OSCC样本中NEDD4L和ENO1表达水平呈负相关。
图4。
NEDD4L与ENO1结合并诱导其泛素化。（a） 共免疫沉淀结果显示NEDD4L和ENO1之间存在直接关联。（b） 有或无NEDD4LOE转导的OSCC细胞中ENO1蛋白（顶部）和mRNA（底部）水平。（c） 有或无NEDD4L干扰的OSCC细胞中ENO1蛋白（左）和mRNA（右）水平。（d） Western blot结果显示，有或没有NEDD4LOE转导以及有或没有MG132处理的OSCC细胞中ENO1蛋白水平。（e） 含或不含NEDD4LOE的OSCC细胞ENO1的Western blot结果。（f） 患者石蜡切片IHC分析，ENO1和NEDD4L染色。案例1代表高ENO1和低NEDDL4，而案例2代表低ENO1与高NEDDL3（上部）。使用Fisher精确检验（底部）确定ENO1和NEDD4L表达之间呈负相关。
ENO1过表达逆转了在OSCC细胞中NEDD4L过表达的功能效应。
图5。
ENO1过度表达逆转了NEDD4L过度表达的功能效应。（a） Western blot结果显示仅转导ENO1OE或同时转导NEDD4LOE和ENO1EE的OSCC细胞中ENO1蛋白水平。（b-c）NEDD4LOE和/或ENO1OE转导的OSCC细胞的细胞增殖试验（b）和细胞周期分析（c）。（d） NEDD4LOE和/或ENO1OE转导的OSCC细胞ECAR和OCR（顶部）以及乳酸和ATP生成（底部）的平均值±S.E.M**p＜0.01***与Vector组相比，p<0.001##与NEDD4LOE组相比，p<0.01；通过方差分析和Tukey检验进行评估。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. 阿拉斯加州马科普洛斯。口腔鳞状细胞癌的现状。开放牙科杂志。2012;6:126–130. doi:10.2174/1874210601206010126。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Campbell CD、Mohajeri K、Malig M、Hormozdiari F、Nelson B、Du G、Patterson KM、Eng C、Torgerson DG、Hu D等。来自创始人群的个体的全基因组测序确定了哮喘的候选基因。请给我一个。2014年；9:e104396。doi:10.1371/journal.pone.0104396。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Lee DE、Yoo JE、Kim J、Kim S、Kim S.、Lee H、Cheong H.NEDD4L通过调节ULK1和谷氨酰胺转运体下调自噬和细胞生长。细胞死亡与疾病。2020;11:38. doi:10.1038/s41419-020-2242-5。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Ye X，Wang L，Shang B，Wang Z，Wei W.NEDD4：一个有希望的癌症治疗靶点。当前癌症药物目标。2014年；14:549–556。doi:10.2174/1568009614666140725092430。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Yang Q，Zhao J，Cui M，Gi S，Wang W，Han X.与卵巢非癌组织相比，Nedd4L在卵巢上皮癌组织中的表达降低。《妇产科研究杂志》。2015;41:1959–1964. doi:10.1111/jog.12808。-内政部-公共医学

赠款和资金

作者报告说，没有与本文所介绍的工作相关的资金。