SMYD2 targets RIPK1 and restricts TNF-induced apoptosis and necroptosis to support colon tumor growth

doi:10.1038/s41419-021-04483-0

.2022年1月12日；13(1):52.

doi:10.1038/s41419-021-04483-0。

SMYD2靶向RIPK1并限制TNF诱导的凋亡和坏死，以支持结肠肿瘤生长

附属机构

¹德国爱尔兰根纽伦堡弗里德里希·阿莱克山德大学医学系1。
²德国埃朗根91054号Deutsches Zentrum免疫治疗中心（DZI）。
^三波兰罗兹医科大学医学院生物化学系。
⁴德国爱尔兰根纽伦堡弗里德里希·阿莱克山德大学病理研究所肾脏病理学系实验性肾脏和心血管研究。
⁵德国埃尔兰根综合癌症中心，91054。
⁶德国爱尔兰根纽伦堡弗里德里希·阿莱克山德大学（FAU）外科分子和实验外科部，邮编：91054。
⁷德国爱尔兰根纽伦堡弗里德里希·阿莱克山德大学医学系1。christoph.becker@uk-erlangen.de。
⁸德国埃朗根91054号Deutsches Zentrum免疫治疗中心（DZI）。christoph.becker@uk-erlangen.de。

PMID： 35022391
预防性维修识别码： PMC8755774号
内政部： 10.1038/s41419-021-04483-0

SMYD2靶向RIPK1并限制TNF诱导的细胞凋亡和坏死以支持结肠肿瘤生长

余强余等。细胞死亡病. 2022.

.2022年1月12日；13（1）:52。

doi:10.1038/s41419-021-04483-0。

附属机构

¹德国爱尔兰根纽伦堡弗里德里希·阿莱克山德大学医学系1。
²德国埃朗根91054号Deutsches Zentrum免疫治疗中心（DZI）。
^三波兰罗兹医科大学医学院生物化学系。
⁴德国爱尔兰根纽伦堡弗里德里希·阿莱克山德大学病理研究所肾脏病理学系实验性肾脏和心血管研究。
⁵德国埃尔兰根综合癌症中心（CCC-ER-EMN），91054，埃尔兰根。
⁶德国爱尔兰根纽伦堡弗里德里希·阿莱克山德大学（FAU）外科分子和实验外科部，邮编：91054。
⁷德国爱尔兰根纽伦堡弗里德里希·阿莱克山德大学医学系1。christoph.becker@uk-erlangen.de。
⁸德国埃朗根91054号Deutsches Zentrum免疫治疗中心（DZI）。christoph.becker@uk-erlangen.de。

PMID： 35022391
预防性维修识别码： PMC8755774号
内政部： 10.1038/s41419-021-04483-0

摘要

SMYD2是组蛋白甲基转移酶，它使组蛋白H3K4和一些非组蛋白甲基化。SMYD2的失调与包括癌症在内的多种疾病有关。在本研究中，我们研究了SMYD2是否和如何可能导致结直肠癌。与无肿瘤组织相比，在人类和小鼠结肠肿瘤组织中检测到SMYD2的表达水平增加。在两个独立的实验性肿瘤模型中，结肠肿瘤细胞中SMYD2缺陷显著降低肿瘤生长。在分子水平上，SMYD2缺陷使结肠肿瘤细胞对TNF诱导的凋亡和坏死敏感，而不影响细胞增殖。此外，我们发现SMYD2靶向RIPK1并抑制RIPK1的磷酸化。最后，在转化方法中，SMYD2的药理学抑制减弱了结肠肿瘤的生长。总之，我们的数据表明，SMYD2对结肠肿瘤生长至关重要，并抑制TNF诱导的凋亡和坏死。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有相互竞争的利益。

数字

**图1。SMYD2在大肠癌中高表达，SMYD2-缺乏可降低体内结肠肿瘤的生长。**
小鼠Apc的免疫荧光染色^最小值/+(A类)或人类(B类)抗SMYD2抗体的结肠肿瘤和无肿瘤组织。使用Hoechst对细胞核进行染色。C类人或小鼠结肠肿瘤和无肿瘤组织裂解物中SMYD2的免疫印迹分析。β-肌动蛋白作为负载对照。D类,E类WT和*Smyd2公司*通过粘膜下注射将CRISPR/Cas9敲除MC-38细胞植入小鼠体内。D类结肠肿瘤的典型图像和微内镜辅助肿瘤评分。E类安乐死后结肠肿瘤体积的测量。F类CRISPR/Cas9指导的小鼠肿瘤体积*SMYD2型*皮下注射敲除或WT HT-29细胞**G公司**显示第20天小鼠的肿瘤重量(F类)以上。

**图2。SMYD2缺陷的CRC细胞增殖不受阻碍。**
WT和CRISPR/Cas9导向的SMYD2敲除MC-38细胞的两个克隆的裂解物中SMYD1、Cyclin D1和ßcatenin的免疫印迹分析(A类)或HT-29电池(C类). β-肌动蛋白作为负荷控制。流式细胞术检测WT和SMYD2 CRISPR/Cas9基因敲除MC-38细胞中的EdU(B类)或HT-29电池(D类). 图中显示了EdU-阳性细胞的定量。实验进行了三次，并给出了具有代表性的数据。数据以平均值+SD表示，并使用学生的t检验进行统计计算。N.S.，不显著。H&E、Ki67（红色）和裂解caspase 3（红色）染色MC-38肿瘤组织的代表性图像(E类)或HT-29肿瘤组织(F类). 比例尺，50 微米。中的直方图E类和F类显示了肿瘤组织中Ki67或裂解的胱天蛋白酶3阳性细胞的定量。n个（MC-38重量）=========================================================================4,n个（MC-38克*Smyd2公司*-KO2）=========================================================================5,n个（HT-29重量）=========================================================================三，n个（HT-29克*SMYD2型*-KO2）=========================================================================4

**图3。SMYD2缺乏使CRC细胞对TNF诱导的凋亡和坏死敏感。**
A类两个无性系间显著和常见调控基因间生物过程的基因本体分析*SMYD2型*HT-29缺陷植入肿瘤与WT HT-29植入肿瘤的比较。在显著上调的生物过程中，细胞对TNF的反应（突出显示为红色）。B类火山图显示了在*SMYD2型*与WT肿瘤相比，肿瘤缺乏。黑圈突出显示与TNF反应相关的基因。C类流式细胞术定量碘化丙啶（PI）染色的WT和两个不同的克隆*Smyd2公司*0.1刺激MC-38细胞缺陷 ng/ml TNF或车辆（模拟）。D类WT的LDH释放和*Smyd2公司*载体刺激的CRISPR/Cas9敲除MC-38细胞（模拟），0.1 纳克/毫升TNF，25 µM thapsigargin（TG），5 µM葡萄孢菌素（Stau），50 µM ABT737或0.5 mM小时₂O（运行）₂24小时小时。E类流式细胞术检测经0.1刺激的MC-38细胞的指定基因型的裂解caspase-3/7活性和SYTOX 纳克/毫升TNF。F类40与否处理HT-29细胞SMYD2、caspase 3和Cl-caspase 3的免疫印迹分析纳克/毫升TNF + 4 nM LCL161（TS）。β-肌动蛋白作为负荷控制。**G公司**用TS或10刺激的PI染色的HT-29细胞的流式细胞术定量纳克/毫升TNF + 1 纳克LCL161 + 20 µM Z-VAD（TSZ）。**H（H）**对上清液中的HMGB1和非还原性细胞裂解液中的pMLKL/MLKL进行免疫印迹分析。使用或不使用TSZ刺激WT和SMYD2 CRISPR/Cas9敲除HT-29细胞。β-肌动蛋白作为负荷控制。我三维培养的PI染色HT-29细胞的代表性图像。WT和*SMYD2型*用TS或不用TS刺激CRISPR/Cas9敲除HT-29细胞。使用DMSO作为对照。实验进行了三次，并给出了具有代表性的数据。数据以平均值+SD表示，学生t检验用于统计计算***P（P）* < 0.01和****P（P）* < 0.001. N.S.不显著。

**图4。SMYD2调节RIPK1的募集和磷酸化。**
标记TNF诱导的复合物-I免疫沉淀。MC-38细胞(A类)或HT-29电池(B类)用Flag-TNF（1）刺激 µg/mL），然后进行Flag免疫沉淀和免疫印迹分析。HT-29细胞用1 nM LCL161用于1 MC-38细胞的Flag-TNF刺激细胞裂解前h(C类)或HT-29电池(D类)用抗RIPK1抗体或抗SMYD2抗体免疫沉淀，然后进行免疫印迹分析。HT-29细胞用1 nM LCL161用于1 TNF刺激前h。E类WT和WT裂解液中磷酸化或总RIPK1的免疫印迹*SMYD2型*在不同时间点用TS（上面板）或TSZ（下面板）刺激缺乏的HT-29细胞。β-肌动蛋白作为负荷控制。F类描述SMYD2介导的CRC细胞死亡途径的示意图。

**图5。用AZ505或BAY-598抑制SMYD2抑制结肠肿瘤生长。**
A类−C类亚太区^最小值/+肿瘤每两天注射一次AZ505或DMSO。A类,B类使用结肠镜在指定时间点对肿瘤大小进行评分(n个=========================================================================5个/组）。C类H&E和劈开型caspase3（红色）染色Apc的代表性图像^最小值/+肿瘤切片（比例尺，25 微米）。该图显示了肿瘤组织中裂解的胱天蛋白酶3阳性细胞的定量。D类,E类将HT-29细胞皮下注射到*抹布1*^−/−老鼠。一旦测量出肿瘤的大小，每天给小鼠腹腔注射BAY-598或DMSO(n个=========================================================================6/组）。D类每隔三天用卡尺监测肿瘤的相对体积。肿瘤体积标准化为治疗开始时的体积。E类安乐死后第10天的肿瘤重量。F类H&E和劈开的caspase3（红色）染色肿瘤切片的代表性图像（比例尺，25 微米）。该图显示了肿瘤组织中裂解caspase3阳性细胞的定量。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

SMYD2通过ERBB2介导的FUT4在结肠癌中的表达促进癌细胞恶性化和异种移植瘤的发展。
Lai Y、Yang Y。 Lai Y等人。分子细胞生物化学。2022年9月；477(9):2149-2159. doi:10.1007/s11010-020-03738-2。Epub 2020年4月27日。分子细胞生物化学。2022 PMID：32342276
RIPK3或MLKL的耗竭阻断了TNF驱动的细胞凋亡，并转向延迟的RIPK1激酶依赖性细胞凋亡。
Remijsen Q、Goossens V、Grootjans S、Van den Haute C、Vanlangenakker N、Dondelinger Y、Roelandt R、Bruggeman I、Goncalves A、Bertrand MJ、Baekelandt V、Takahashi N、Berghe TV、Vandenabeele P。 Remijsen Q等人。细胞死亡疾病。2014年1月16日；5（1）：e1004。doi:10.1038/cddis.2013.531。细胞死亡疾病。2014 PMID：24434512 免费PMC文章。
组蛋白甲基转移酶SMYD2：普遍存在的疾病调节因子。
Yi X、Jiang XJ、Fang ZM。 Yi X等人。临床表观遗传学。2019年8月1日；11(1):112. doi:10.1186/s13148-019-0711-4。临床表观遗传学。2019 PMID：31370883 免费PMC文章。审查。
RIPK1通过抑制凋亡和坏死来维持上皮细胞的稳态。
Dannappel M、Vlantis K、Kumari S、Polykratis A、Kim C、Wachsmuth L、Eftychi C、Lin J、Corona T、Hermance N、Zelic M、Kirsch P、Basic M、Bleich A、Kelliher M、Pasparakis M。 Dannappel M等人。自然。2014年9月4日；513(7516):90-4. doi:10.1038/nature13608。Epub 2014年8月17日。自然。2014 PMID：25132550 免费PMC文章。
发育和疾病中的坏死。
Shan B、Pan H、Najafov A、Yuan J。 Shan B等人。基因开发，2018年3月1日；32（5-6）：327-340。doi:10.1101/gad.312561.118。基因开发2018。 PMID：29593066 免费PMC文章。审查。

查看所有类似文章

引用人

赖氨酸甲基转移酶SMYD2增强雄激素受体信号，以调节CRPC细胞对苯扎鲁胺的耐药性。
李杰，洪Z，张杰，郑S，万F，刘Z，戴B。李杰等。致癌物。2024年3月；43(10):744-757. doi:10.1038/s41388-024-02945-1。Epub 2024年1月19日。致癌物。2024 PMID：38243079
淋巴结和肿瘤相关PD-L1⁺巨噬细胞通过抑制CD8对抗树突状细胞疫苗⁺T细胞。
Sprooten J、Vanmeerbeek I、Datsi A、Govaerts J、Naulaerts S、Laureano RS、BorráS DM、Calvet A、Malviya V、Kuballa M、Felsberg J、Sabel MC、Rapp M、Knobbe-Thomsen C、Liu P、Zhao L、Kepp O、Boon L、Tejpar S、Borst J、Kroemer G、Schlenner S、De Vleeschower S、Sorg RV、Garg AD。 Sprooten J等人。 Cell Rep Med.2024年1月16日；5(1):101377. doi:10.1016/j.xcrm.2023.101377。细胞代表医学2024。 PMID：38232703 免费PMC文章。
结肠腺癌坏死相关基因预后特征的鉴定和验证。
张杰，刘Z，陈伟，刘海。张杰等。 Transl癌症研究，2023年9月30日；12(9):2239-2255. doi:10.21037/tcr-23-494。Epub 2023年8月31日。 Transl癌症研究2023。 PMID：37859737 免费PMC文章。
RIPK1在多种B细胞癌中异常表达，并与潜在的发病机制有关。
Wu B、Li J、Wang H、Liu J、Li J、Sun F、Feng DC。 Wu B等人。 Discov Oncol公司。2023年7月18日；14(1):131. doi:10.1007/s12672-023-00725-z。 Discov Oncol公司。2023 PMID：37462822 免费PMC文章。
炎症性肠病、结直肠癌和肠损伤中铁下垂、坏死和焦下垂的诱导机制。
周P，张S，王M，周J。 Zhou P等人。生物分子。2023年5月11日；13(5):820. doi:10.3390/biom13050820。生物分子。2023 PMID：37238692 免费PMC文章。审查。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. 全球疾病负担癌症C.Fitzmaurice C、Allen C、Barber RM、Barregard L、Bhutta ZA等。1990年至2015年32个癌症组的全球、区域和国家癌症发病率、死亡率、死亡年数、残疾年数和残疾调整生命年数：全球疾病负担研究的系统分析。JAMA Oncol公司。2017;3:524–48. doi:10.1001/jamancol.2016.5688。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
1. Arnold M、Sierra MS、Laversanne M、Soerjomataram I、Jemal A、Bray F.结直肠癌发病率和死亡率的全球模式和趋势。内脏。2017;66:683–91. doi:10.1136/gutjnl-2015-310912。-内政部-公共医学
1. Marmol I、Sanchez-de-Digo C、Pradilla Dieste A、Cerrada E、Rodriguez Yoldi MJ。结直肠癌：结直肠癌的概况和未来展望。国际分子科学杂志。2017;18:197.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Brown MA，Sims RJ，3rd，Gottlieb PD，Tucker PW.Smyd2的鉴定和表征：一种与Sin3组蛋白脱乙酰酶复合物相互作用的分裂的SET/MYND结构域组蛋白H3赖氨酸36特异性甲基转移酶。摩尔癌症。2006;5:26. doi:10.1186/1476-4598-5-26。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
1. Huang J、Perez-Burgos L、Placek BJ、Sengupta R、Richter M、Dorsey JA等。Smyd2介导的甲基化抑制p53活性。自然。2006;444:629–32. doi:10.1038/nature05287。-内政部-公共医学

出版物类型

行动

物质

行动
行动
行动
行动
行动
行动

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源
其他
- NCI CPTAC分析门户

[1] 全球疾病负担癌症C.Fitzmaurice C、Allen C、Barber RM、Barregard L、Bhutta ZA等。1990年至2015年32个癌症组的全球、区域和国家癌症发病率、死亡率、死亡年数、残疾年数和残疾调整生命年数：全球疾病负担研究的系统分析。JAMA Oncol公司。2017;3:524–48. doi:10.1001/jamancol.2016.5688。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[2] 全球疾病负担癌症C.Fitzmaurice C、Allen C、Barber RM、Barregard L、Bhutta ZA等。1990年至2015年32个癌症组的全球、区域和国家癌症发病率、死亡率、死亡年数、残疾年数和残疾调整生命年数：全球疾病负担研究的系统分析。JAMA Oncol公司。2017;3:524–48. doi:10.1001/jamancol.2016.5688。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[3] Arnold M、Sierra MS、Laversanne M、Soerjomataram I、Jemal A、Bray F.结直肠癌发病率和死亡率的全球模式和趋势。内脏。2017;66:683–91. doi:10.1136/gutjnl-2015-310912。-内政部-公共医学

[4] Arnold M、Sierra MS、Laversanne M、Soerjomataram I、Jemal A、Bray F.结直肠癌发病率和死亡率的全球模式和趋势。内脏。2017;66:683–91. doi:10.1136/gutjnl-2015-310912。-内政部-公共医学

[5] Marmol I、Sanchez-de-Digo C、Pradilla Dieste A、Cerrada E、Rodriguez Yoldi MJ。结直肠癌：结直肠癌的概况和未来展望。国际分子科学杂志。2017;18:197.-项目管理咨询公司-公共医学

[6] Marmol I、Sanchez-de-Digo C、Pradilla Dieste A、Cerrada E、Rodriguez Yoldi MJ。结直肠癌：结直肠癌的概况和未来展望。国际分子科学杂志。2017;18:197.-项目管理咨询公司-公共医学

[7] Brown MA，Sims RJ，3rd，Gottlieb PD，Tucker PW.Smyd2的鉴定和表征：一种与Sin3组蛋白脱乙酰酶复合物相互作用的分裂的SET/MYND结构域组蛋白H3赖氨酸36特异性甲基转移酶。摩尔癌症。2006;5:26. doi:10.1186/1476-4598-5-26。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[8] Brown MA，Sims RJ，3rd，Gottlieb PD，Tucker PW.Smyd2的鉴定和表征：一种与Sin3组蛋白脱乙酰酶复合物相互作用的分裂的SET/MYND结构域组蛋白H3赖氨酸36特异性甲基转移酶。摩尔癌症。2006;5:26. doi:10.1186/1476-4598-5-26。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[9] Huang J、Perez-Burgos L、Placek BJ、Sengupta R、Richter M、Dorsey JA等。Smyd2介导的甲基化抑制p53活性。自然。2006;444:629–32. doi:10.1038/nature05287。-内政部-公共医学

[10] Huang J、Perez-Burgos L、Placek BJ、Sengupta R、Richter M、Dorsey JA等。Smyd2介导的甲基化抑制p53活性。自然。2006;444:629–32. doi:10.1038/nature05287。-内政部-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

SMYD2靶向RIPK1并限制TNF诱导的凋亡和坏死，以支持结肠肿瘤生长

附属机构

SMYD2靶向RIPK1并限制TNF诱导的细胞凋亡和坏死以支持结肠肿瘤生长

作者

附属机构

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他