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.2021年12月;12(1):4452-4463.
doi:10.1080/21655979.2021.1956672。

登德罗宾通过上调microRNA miR-381-3p降低caspase-4抑制内质网应激诱导的细胞凋亡

附属公司

登德罗宾通过上调microRNA miR-381-3p降低caspase-4抑制内质网应激诱导的细胞凋亡

荆蒙等。 生物工程. 2021年12月.

摘要

据报道,登德罗宾可以降低血脂水平和细胞凋亡。本研究旨在利用血管内皮细胞观察石斛碱在ERS模型中的作用,并揭示石斛素治疗AS的生物学机制和途径,采用溴脱氧尿苷染色和流式细胞术检测HUVEC的增殖和凋亡。通过双荧光素酶报告物分析验证了靶结合关联。研究发现,TM处理导致miR-381-3p的低表达。石斛滨治疗不仅促进TM诱导的HUVEC增殖,而且抑制其凋亡。石斛碱治疗后,还观察到78-kDa葡萄糖调节蛋白、肌醇需要酶1、caspase-4、C/EBP同源蛋白和caspase-3的表达降低。登德罗宾通过增加miR-381-3p的表达,减少ERS模型中内皮细胞的凋亡,并部分恢复细胞增殖水平。在miR-381-3p的表达被阻断后,这种作用显著降低。总的来说,本研究表明,石斛碱上调miR-381-3p的表达,以抑制ERS诱导的HUVEC凋亡,该过程由caspase-4介导。本研究的结果可能为研究AS期间内皮细胞凋亡的原因提供新的见解,并揭示石斛碱对AS的有效治疗作用。

关键词:登德罗宾;细胞凋亡;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-4;内质网应激;miR-381-3p;增殖。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明,他们没有相互竞争的利益。

数字

无
图形摘要
图1。
图1。
石斛碱对HUVEC增殖的影响。(a) 细胞计数试剂盒-8分析结果。(b) BrdU染色评价HUVEC增殖。Dend-L:石斛的低浓度,1µM;Dend-M:石斛的中等浓度,5µM;Dend-H:石斛的高浓度,10µM。人脐静脉内皮细胞;溴脱氧尿苷***P<0.001 Vs控制,$P<0.05与TM+Dend-L相比,@@P<0.01 VS TM(型号)
图2。
图2。
石斛碱对细胞凋亡的影响。(a和b)凋亡的TUNEL染色结果***P<0.001 Vs控制###P<0.001 Vs TM(模型),$$$P<0.001 Vs TM+Dend-L,&&&P<0.001 Vs TM+Dend-M,@@@P<0.01 VS TM(型号)
图3。
图3。
用突胶质细胞滨治疗后内质网应激相关蛋白水平的评估。GRP78、Ire1、caspase-4、CHOP和caspase3表达的western blot分析结果。GRP78,78-kDa葡萄糖调节蛋白;Ire1,肌醇需要酶1;CHOP,C/EBP同源蛋白***P<0.001 Vs控制#P<0.05 Vs TM(模型),$P<0.05,$$$P<0.001或Vs TM+Dend-L,&P<0.05,&&P<0.01或&&&P<0.001 Vs TM+Dend-M,@@@P<0.01 VS TM(型号)
图4。
图4。
石斛治疗后miR-381-3p表达的评估。miR-381-3p表达的逆转录定量PCR分析结果。miR,microRNA***P<0.001 Vs控制#P<0.05 Vs TM(模型),$$P<0.01或Vs-TM+Dend-L,&&P<0.01 Vs TM+Dend-M,@@@P<0.01 VS TM(型号)
图5。
图5。
miR-381-3p与caspase-4的3ʹ非翻译区结合。(a) starBase预测的结合位点。(b) 双核糖核酸酶报告子分析结果。miR,micoRNA***P<0.001 Vs WT+Caspase4+NC模拟
图6。
图6。
miR-381-3p影响caspase-4的蛋白水平。(a) miR-381-3p水平的逆转录定量PCR分析。(b) miR-381-3p模拟物或抑制剂转染后胱天蛋白酶4的mRNA水平。(c) miR-381-3p模拟物或抑制剂转染后caspase-4的蛋白水平。miR,microRNA***P<0.001 Vs miR-381-3p NC,### P<0.001 Vs miR-381-3p模拟
图7。
图7。
miR-381-3p模拟物或抑制剂对细胞增殖和凋亡的影响。(a) 细胞计数试剂盒-8对miR-381-3p模拟物或抑制剂转染后细胞增殖的检测结果。(b和c)miR-381-3p模拟物或抑制剂转染后细胞凋亡的TUNEL染色结果。miR,microRNA
图8。
图8。
miR-381-3p模拟物或抑制剂对TM诱导后细胞增殖和凋亡的影响。(a) 细胞计数试剂盒-8分析结果。(b和c)通过TUNEL测定评估细胞凋亡。(d) 通过western blot分析检测ERS相关蛋白水平。TM,衣霉素;内质网应激;miR,microRNA***P<0.001 Vs控制,### P<0.001 Vs TM+miR-381-3p NC,<0.05,$$$P<0.001 Vs TM+Dend-M

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工具书类

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出版物类型

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赠款和资金

本研究获得上海市科学技术委员会医学指导(中医药)科技支撑项目(编号17401933700)、上海市卫生和计划生育委员会科研项目(编号201640039)的批准上海中医药大学高峰高原课题(临床人才专项)(NO.171319)。