Nitrosative stress drives heart failure with preserved ejection fraction

doi:10.1038/s41586-019-1100-z

.2019年4月；568(7752):351-356.

doi:10.1038/s41586-019-1100-z。 Epub 2019年4月10日。

亚硝化应激导致射血分数保持不变的心力衰竭

附属公司

¹美国得克萨斯州达拉斯得克萨斯大学西南医学中心内科心内科。
²意大利那不勒斯费德里科二世大学高级生物医学科学系心脏病学系。
^三美国马里兰州巴尔的摩约翰霍普金斯医学院医学部心脏科。
⁴智利圣地亚哥智利大学化学与药物科学学院和医学院慢性病高级中心（ACCDiS）。
⁵智利圣地亚哥智利大学医学院生物医学科学研究所细胞分子研究中心。
⁶美国德克萨斯州达拉斯市德克萨斯大学西南医学中心内科心脏科。joseph.hill@utsouthwestern.edu。
⁷美国德克萨斯州达拉斯德克萨斯大学西南医学中心分子生物学系。joseph.hill@utsouthwestern.edu。

PMID： 30971818
预防性维修识别码： PMC6635957型
内政部： 10.1038/s41586-019-1100-z

亚硝化应激导致射血分数保持不变的心力衰竭

加布里埃尔·G·希亚塔雷拉等。自然. 2019年4月.

.2019年4月；568(7752):351-356.

doi:10.1038/s41586-019-1100-z。 Epub 2019年4月10日。

附属公司

¹美国得克萨斯州达拉斯得克萨斯大学西南医学中心内科心内科。
²意大利那不勒斯费德里科二世大学高级生物医学科学系心脏病学系。
^三美国马里兰州巴尔的摩约翰霍普金斯医学院医学部心脏科。
⁴智利圣地亚哥智利大学化学与药物科学学院和医学院慢性病高级中心（ACCDiS）。
⁵智利圣地亚哥智利大学医学院生物医学科学研究所细胞分子研究中心。
⁶美国德克萨斯州达拉斯市德克萨斯大学西南医学中心内科心脏科。joseph.hill@utsouthwestern.edu。
⁷美国德克萨斯州达拉斯德克萨斯大学西南医学中心分子生物学系。joseph.hill@utsouthwestern.edu。

PMID： 30971818
预防性维修识别码： PMC6635957型
内政部： 10.1038/s41586-019-1100-z

摘要

射血分数保持性心力衰竭（HFpEF）是一种常见的高发病率和高死亡率综合征，目前尚无循证治疗方法。在这里，我们报告了通过结合高脂肪饮食和使用N^ω-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）-概括了人类HFpEF的许多系统和心血管特征。在我们的啮齿类动物模型和HFpEF患者的心肌中，一种未折叠蛋白反应效应器（X-box-binding protein 1（XBP1s）的剪接形式）的表达降低。从机理上讲，XBP1的减少是由于诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性的增加和内切酶肌醇需要蛋白1α（IRE1α）的S-亚硝化作用，最终导致XBP1剪接缺陷。iNOS的药理学或遗传学抑制，或XBP1s的心肌细胞限制性过表达，均改善了HFpEF表型。我们报道iNOS驱动的IRE1α-XBP1通路的失调是HFpEF心肌细胞功能障碍的关键机制。

PubMed免责声明

利益冲突声明

竞争利益声明。G.G.S.、T.G.G.和J.A.H.是2017年6月提交的专利申请（PCT/US/2017/037019）的共同发明人（2016年6月临时提交）。该专利涉及用于建立HFpEF模型的饮食。

数字

**扩展数据图1。不同饮食方案五周或十五周后小鼠的系统和心脏表型。**
一，不同实验组小鼠在饮食五周或十五周后的体重（BW）（每个时间点每组10只小鼠）。b条，五周或十五周饮食后的腹膜内葡萄糖耐量试验（ipGTT）（五周n=10只/组；十五周n=5只/组）。**c（c）**，条形图描述了5周和15周时间点ipGTT实验曲线下的面积（五周n=10只/组；十五周n=5只/组）。d日收缩压（SBP）和电子治疗5周或15周后，不同实验组的舒张压（DBP）（每个时间点每组10只小鼠）。**（f）**、左室射血分数百分比（LVEF%），克，LV整体纵向应变（GLS），小时，二尖瓣E波与A波比值（E/A），我，二尖瓣E波与E’波的比值（E/E’），j个，湿肺和干肺重量之比（LW），k个、心脏重量与胫骨长度之比（HW/TL）和我，饮食五周后小鼠运动疲劳试验期间的跑步距离（LVEF%、E/A比率、E/E’比率、HW/TL比率、跑步距离和LW湿/LW干比率，每组10只小鼠。LV GLS，每组5只小鼠）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。**a、 c-l公司**单向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。b条，双向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。**a、 c-l公司**方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。**b、持续五周**15’ ****P（P）*=0.0003 CHOW与HFD****P（P）*=0.0004 CHOW vs.HFD+L-NAME；30’ ****P（P）*=0.0008 CHOW与HFD***P（P）*=0.006 CHOW vs.HFD+L-NAME；45’ **P（P）*=0.010 CHOW相对于HFD****P（P）*=0.0008 CHOW vs.HFD+L-NAME；60’ **P（P）*=0.049 CHOW与HFD***P（P）*=0.0096 CHOW与HFD+L-NAME相比。**十五周**, 15’ ***P（P）*=0.008 CHOW与HFD*****P（P）*<0.0001 CHOW vs.HFD+L-NAME；30’ ***P（P）*=0.005 CHOW与HFD*****P（P）*<0.0001 CHOW vs.HFD+L-NAME；45’ ***P（P）*=0.009 CHOW与HFD*****P（P）*<0.0001 CHOW vs.HFD+L-NAME；60’ **P（P）*=0.028 CHOW与HFD***P（P）*=0.0020 CHOW vs.HFD+L-名称。

**扩展数据图2。不同饮食方案五周后小鼠的心脏形态和血管特征。**
一、不同实验组小鼠左心室横切面苏木精伊红（H&E）、麦胚凝集素（WGA）、马森三色（MT）和凝集素染色的代表性图像。图像是四个独立执行的实验的代表，具有类似的结果。比例尺：H&E为500μm；比例尺：WGA、MT和凝集素为50μm。b条，心肌细胞横截面积的WGA定量（每组4只小鼠）。**c（c）**，MT染色横切面的纤维化面积百分比（每组4只小鼠）。d日，心肌毛细血管密度（每组4只小鼠）。电子、不同实验组小鼠的主动脉脉搏波速度（PWV）（n=5只/组）。**（f）**，CHOW（顶面板）和HFD+L-NAME（底面板）小鼠在基础状态下（左侧面板–异氟烷，Iso 1.5%）和充血刺激后（右侧面板–Iso 3%）冠状动脉血流的典型脉搏波多普勒描记。这些图片代表了五只独立的老鼠。克冠状动脉血流储备（CFR）定量（每组5只小鼠）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。**b-d、e、g**单因素方差分析后进行Sidak的多重比较检验。方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。

**扩展数据图3。不同饮食方案五周后小鼠骨骼肌的组织学和功能分析。**
一CHOW和HFD+L-NAME小鼠比目鱼肌和腓肠肌/跖肌（G/P）的苏木精和曙红（H&E）、小麦胚芽凝集素（WGA）、异染ATP酶（ATPase）、马森三色（MT）和苦味酸红（PSR）染色的代表性图像。图像是三个独立执行的实验的代表，具有类似的结果。比例尺：50μm。b条CHOW和HFD+L-NAME小鼠比目鱼肌肌球蛋白亚型（MyHC-1、MyHC-2A、MyHC-2-X）和G/P的mRNA水平（每组5只小鼠）。**c（c）**，CHOW和HFD+L-NAME小鼠分离比目鱼肌的松弛曲线（每CHOW组5只小鼠；每HFD+L-NAME组6只小鼠）。体内前肢d日，后肢电子以及不同实验组小鼠的握力测量（n=8只/CHOW组；n=4只/HFD组；n=3只/L-NAME组；n=6只/HFD+L-NAME小组）。**（f）**CHOW和HFD+L-NAME小鼠比目鱼肌的最大强直应激（n=5只/CHOW组；n=6只/HFD+L-NAME组）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。**b、 c、f**双尾未成对学生的t吨-测试（CHOW vs.HFD+L-NAME soleus；CHOW对HFD+L-NAME G/P）。**d、 e（电子）**单因素方差分析后进行Sidak的多重比较检验。方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。

**扩展数据图4。20周龄ZSF1-O型大鼠不同饮食方案5周后成年小鼠心室肌细胞收缩力、功能特征和IRE1α-Xbp1s轴。**
一，基线肌群长度（每CHOW组4只小鼠，35个细胞；每HFD组3只小鼠，30个细胞；每个L-NAME组3只鼠，30个电池；每个HFD+L-NAME小组3只小鼠和31个电池）。b条，达到峰值的时间（每个CHOW组4只小鼠，36个细胞；每个HFD组3只小鼠，30个细胞；每L-NAME组3只鼠，30个电池；每HFD+L-NAME小组3只小鼠和31个细胞）。**c（c）**最大返回速度（每个CHOW组4只小鼠，36个细胞；每个HFD组3只小鼠，29个细胞；每L-NAME组3只鼠，30个细胞；每组HFD+L-NAME，3只小鼠和31个细胞）。d日，与基线相关的肉瘤长度变化（Δ）（每CHOW组4只小鼠，36个细胞；每HFD组3只小鼠，30个细胞；每个L-NAME组3只鼠，30个电池；每个HFD+L-NAME小组3只小鼠和31个电池）。电子最大离开速度（每CHOW组4只小鼠，35个细胞；每HFD组3只小鼠，30个细胞；每个L-NAME组3只鼠，29个细胞；每组HFD+L-NAME，3只小鼠和28个细胞）。**（f）**，起搏期间心肌细胞收缩/舒张的典型轨迹。每个轨迹描述一个代表每个实验组平均值的细胞。克，体重（BW），小时，左心室射血分数百分比（LVEF%），我，二尖瓣E波与A波比值（E/A），j个，二尖瓣E波与E’波的比值（E/E’），k个、心脏重量与胫骨长度（HW/TL）比值，以及我，20周龄Wistar Kyoto（WKY）和ZSF1肥胖大鼠的肺重量（LW）/TL比率（BW、LVEF%、E/A比率、E/E'比率和LW/TL比率n=5只/组；HW/TL比率n=5只/WKY组和n=4只/ZSF1肥胖组）。米，WKY和ZSF1-O型大鼠LV样本中剪接（s）和未剪接（u）Xbp1转录物的电泳分析。采用经膜霉素处理的新生大鼠心室肌细胞（TUN）作为阳性对照（n=3只/组）。n个WKY和ZSF1-Obese大鼠（每组5只大鼠）的Xbp1s的LV mRNA水平。**o（o）**WKY和ZF1-肥胖大鼠（每组5只大鼠）LV样本的pIRE1α、IRE1β和GAPDH蛋白的免疫印迹图像。第页，pIRE1α和IRE1β蛋白带之间的密度分析比率（每组5只大鼠）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。**a-e公司**单向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。**g-l、n、p**双尾未成对学生的t吨-测试。方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。凝胶源数据见补充图1。

**扩展数据图5。严重横主动脉收缩一周后，小鼠的功能特征和未折叠蛋白反应激活。**
一，实验设计。将C57BL/6N雄性小鼠暴露于假手术（对照组）或严重横贯主动脉缩窄（sTAC）手术（填充三角），一周后进行评估（空三角）。b条、左室射血分数百分比（LVEF%），**c（c）**，二尖瓣E波与A波比值（E/A），d日，二尖瓣E波与E’波的比值（E/E’），电子、湿肺重量与干肺重量之比（LW）和**（f）**，假对照组和sTAC小鼠的心脏重量和胫骨长度（HW/TL）之比（n=5只/组）。克假手术组和sTAC小鼠LV Xbp1s mRNA水平（假手术组n=4只小鼠；sTAC组n=5只小鼠）。小时假手术和sTAC小鼠LV样本中GRP94、GRP78和GAPDH蛋白的免疫印迹图像。图像是三个独立执行的实验的代表，具有类似的结果。箭头表示调节带。我假手术小鼠和sTAC小鼠LV切片的KDEL（Lys-Asp-Glu-Leu）序列免疫荧光染色。赫斯特染色细胞核。比例尺：50μm。图像是三个独立执行的实验的代表，具有类似的结果。结果以平均值±S表示。E.M.公司。**b至g**双尾未成对学生的t吨-测试。方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。凝胶源数据见补充图1。

**扩展数据图6。横主动脉收缩后小鼠的功能特征和IRE1α-Xbp1s轴，以及心肌细胞限制型Xbp1s转基因小鼠的表型。**
一，实验设计。将C57BL/6N小鼠暴露于假手术（对照组）或横主动脉缩窄（TAC）手术（填充三角形），并随访5周（空三角形）。b条，二尖瓣E波与A波比值（E/A），**c（c）**，二尖瓣E波与E’波的比值（E/E’），d日、左室射血分数百分比（LVEF%），电子、心脏重量与胫骨长度之比（HW/TL），以及**（f）**、不同实验组小鼠肺重量与体重（LW/BW）的比值（E/A比值、E/E'比值和LVEF%n=10只/Pre-TAC组、TAC 1wk组和TAC 3wk组；n=5只/TAC 5wk组小鼠；HW/TL比值和LW/BW比值n=10两只/TAC 1wk和TAC 3 wk组鼠；n=6只/Pham和TAC 5wks组鼠）。克假手术和TAC 3周后LV Xbp1s mRNA水平（每组5只小鼠）。小时、假手术组和TAC 3周组小鼠（每组3只小鼠）LV样本的pIRE1α、IRE1β和GAPDH蛋白的免疫印迹图像。我，实验设计。对照（CTR）和Xbp1s转基因小鼠（TG）暴露于CHOW或HFD+L-NAME饮食（绿色填充三角形）。五周后，进行超声心动图评估，并从饮用水中去除多西环素（Doxy）以诱导转基因表达（灰色填充三角形）。转基因诱导两周后（蓝色填充三角形），对小鼠进行功能分析和组织收获。j个随着时间的推移，不同实验队列的LVEF%（n=5只小鼠/CHOW CTR和CHOW TG组；n=7只小鼠/HFD+L-NAME CTR和HFD+L-NAME TG组。在所有三个时间点对每只小鼠进行分析）。k个喂食CHOW或HFD+L-NAME饮食七周的CTR和Xbp1s TG小鼠的LV Xbp1smRNA水平（每组3只小鼠）。我，LV mRNA水平*无核功率放大器*和*正常灌注压突破*基因和米研究结束时，HW/TL（每个CHOW CTR和CHOW TG组5只小鼠；每个HFD+L-NAME CTR和HFD+L-NAME TG组7只小鼠）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。**b-f型**，单向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。克双尾未成对学生的t吨-测试。**j-m公司**双向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。凝胶源数据见补充图1。

**扩展数据图7。不同饮食方案五周后小鼠的心肌亚硝化应激和炎症标记物。**
一,顶部：CHOW和HFD+L-NAME小鼠血浆样本中的细胞因子/趋化因子抗体阵列，目视评估不同含量的细胞因子。每个图像代表两个独立执行的实验，结果相似。底部：抗体阵列膜代表的细胞因子和趋化因子列表。b条CHOW和HFD+L-NAME小鼠（每组5只小鼠）的左心室（LV）TNFα、IL1β和IL6 mRNA水平。**c（c）**CHOW和HFD+L-NAME小鼠LV样本中的iNOS和GAPDH。感染小鼠iNOS腺病毒（AdiNOS；100倍感染）的新生大鼠心室肌细胞被用作iNOS带的阳性对照。箭头表示调节带（每组3只小鼠）。d日不同实验组小鼠eNOS的LV mRNA水平（每CHOW组4只小鼠；每HFD、L-NAME和HFD+L-NAME组6只小鼠）。电子、不同实验组小鼠（每组3只小鼠）的nNOS、eNOS和GAPDH蛋白的免疫印迹图像。**（f）**CHOW和HFD+L-NAME饮食五周后野生型（WT）和iNOS敲除（iNOS KO）小鼠LV样品中亚硝基半胱氨酸（Cys-SNO）和GAPDH蛋白的免疫印迹图像（W/B：无阻断。-Asc：无抗坏血酸。GSNO：S-亚硝基谷胱甘肽）（每组3只小鼠）。克，Cys-SNO/GAPDH蛋白质之间的密度分析比率（n=3只小鼠/组）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。b条，双尾未成对学生的t吨-测试。d日单向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。克，双向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。凝胶源数据见补充图1。

**扩展数据图8。心肌细胞中iNOS过度表达可降低IRE1α激活和Xbp1s水平，而不会影响心肌细胞的生存能力。**
一感染α-半乳糖苷酶腺病毒（AdLacZ）或iNOS腺病毒（AdiNOS）增加感染倍数（MOI）24小时的新生大鼠心室肌细胞iNOS和GAPDH蛋白的免疫印迹图像。图像是三个独立执行的实验的代表，具有类似的结果。b条，随着AdlacZ或AdiNOS的MOI增加24小时转导的新生大鼠心室肌细胞中iNOS mRNA水平（n=4个生物独立实验）。**c（c）**，随着AdlacZ或AdiNOS MOI增加24小时转导的新生大鼠心室肌细胞中亚硝酸盐/硝酸盐浓度（n=4个生物独立实验）。d日24小时内，随着AdlacZ或AdiNOS的MOI增加，新生大鼠心室肌细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放（n=3个生物独立实验）。电子用AdlacZ或AdiNOS转导的NRVM中Cys-SNO、iNOS和GAPDH蛋白24小时（100 MOI）的免疫印迹图像。图像是三个独立执行的实验的代表，具有类似的结果。**（f）**在存在或不存在衣霉素（TUN）的情况下，随着AdlacZ或AdiNOS的MOI增加转导的新生大鼠心室肌细胞中pIRE1α、IRE1β、iNOS和GAPDH蛋白的免疫印迹图像。图像代表了三个独立进行的实验，结果相似。克在TUN存在或不存在的情况下，用100 MOI的AdlacZ或AdiNOS转导24小时的新生大鼠心室肌细胞的Xbp1s mRNA水平（n=3个生物独立实验）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。**b-d，克**单因素方差分析后进行Sidak的多重比较检验。方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。凝胶源数据见补充图1。

**扩展数据图9。不同饮食方案五周后iNOS基因敲除小鼠的表型。**
一野生型（WT）和iNOS敲除（iNOS KO）小鼠的DNA基因分型。该签名用于基因分型。b条，实验设计。将WT和iNOS KO小鼠暴露于CHOW或HFD+L-NAME饮食中五周（填充三角形）。随后，对小鼠进行功能分析和组织收获（空三角形）。**c（c）**、左室射血分数百分比（LVEF%），d日，体重（BW），电子，收缩压（SBP），**（f）**、舒张压（DBP）和克、不同实验组小鼠的腹腔内葡萄糖耐量试验（ipGTT）（LVEF%n=10只/组；BW、SBP、DBP和ipGTT n=5只/组）。小时，描绘ipGTT实验曲线下面积的条形图（每组5只小鼠）。我、不同实验组小鼠（n=5只/组）的心脏重量与胫骨长度之比（HW/TL）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。**c-i型**双向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。**c-f、h、i**方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。克, 15’ ****P（P）*=0.0002周重量vs.HFD+L名称重量*****P（P）*<0.0001 CHOW WT vs.HFD+L-NAME iNOS KO；30’ ****P（P）*=0.0002周重量vs.HFD+L名称重量*****P（P）*<0.0001 CHOW WT vs.HFD+L-NAME iNOS KO；45’ *****P（P）*<0.0001 CHOW重量vs.HFD+L名称重量****P（P）*=0.0002 CHOW WT vs.HFD+L-NAME iNOS KO；60’ *****P（P）*<0.0001 CHOW重量vs.HFD+L名称重量*****P（P）*<0.0001 CHOW WT vs.HFD+L-NAME iNOS KO；120英寸***P（P）*=0.010周重量vs.HFD+L名称重量***P（P）*=0.007周重量vs.HFD+L名称iNOS KO。凝胶源数据见补充图1。

**扩展数据图10。iNOS抑制剂治疗小鼠的功能特征和Xbp1s心肌水平。**
一，实验设计。将C57BL/6N小鼠暴露于CHOW或HFD+L-NAME饮食（棕色填充三角形）中五周，然后以80 mg/kg体重或载量每天两次的剂量（蓝色填充三角形）腹腔内（i.p.）注射L-N6-（1-亚氨基乙基）赖氨酸（L-NIL），持续三天。之后，对小鼠进行功能分析和组织收获（红色填充三角形）。b条，用溶媒或L-NIL治疗的HFD+L-NAME小鼠的尿亚硝酸盐/硝酸盐浓度（每组5只小鼠）。**c（c）**收缩压（SBP），d日、舒张压（DBP），电子，左心室射血分数百分比（LVEF%），**（f）**，二尖瓣E波与A波比值（E/A），克，二尖瓣E波与E’波的比值（E/E’），小时、运动疲劳试验期间的跑步距离我、不同实验组小鼠Xbp1s的LV mRNA水平（亚硝酸盐/硝酸盐水平、SBP、DBP、LVEF%、E/A、E/E'和跑步距离n=5只小鼠组；Xbp1s水平n=3/组）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。b条双尾未成对学生的t吨-测试。**c-i型**双向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。

**图1。对小鼠进行为期15周的HFD+L-NAME饮食方案，总结了临床HFpEF的关键变化。**
一，实验设计。C57BL/6N小鼠维持不同的饮食方案（填三角形），并随访15周（空三角形）。b条，典型的左心室（LV）M型超声心动图描记。这些图片代表了15只独立的老鼠。**c（c）**，左心室射血分数百分比（LVEF%）（每组15只小鼠）。d日，LV全局纵向应变（GLS）（每组10只小鼠）。电子，代表性的脉冲波多普勒（顶部）和组织多普勒（底部）跟踪。这些图片代表了15只独立的老鼠。**（f）**，二尖瓣E波和E’波的比值（E/E’）（n=15只/组）。克，湿肺重量与干肺重量之比（LW）（n=15只/组）。小时，心脏重量与胫骨长度之比（HW/TL）（每组n=15只小鼠）。我，运动疲劳试验期间的跑步距离（n=8只/组）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。**c（c）**,d日,**f-i型**单向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。

**图2。IRE1α-Xbp1s信号通路在实验中不活跃，人HFpEF和心肌细胞中Xbp1s过度表达可改善实验性HFp EF**
一、不同实验组小鼠（n=5只/组）的Xbp1s、Bip、ATF6、ATF4、CHOP的左心室（LV）mRNA水平。b条CHOW和HFD+L-NAME小鼠（每组3只小鼠）LV样本中PERK、ATF6和GAPDH蛋白的免疫印迹图像。**c（c）**，CHOW和HFD+L-NAME小鼠LV样本中剪接（s）和未剪接（u）Xbp1转录物的电泳分析。用膜粘连蛋白处理的新生大鼠心室肌细胞（TUN）作为阳性对照。图像是三个独立执行的实验的代表，具有类似的结果。d日CHOW和HFD+L-NAME小鼠中Xbp1s、Bip、CHOP的成年小鼠心室肌细胞（AMVMs）mRNA水平（每CHOW组4只小鼠；每HFD+L-NAME组5只小鼠。AMVMs是从单个小鼠中分离出来的）。电子CHOW和HFD+L-NAME小鼠（每组3只小鼠）LV pIRE1α、IRE1β和GAPDH蛋白的免疫印迹图像。**（f）**，pIRE1α和IRE1α蛋白带之间的密度分析比率（每组n=3只小鼠）。克非衰竭（CTR）、HFpEF和HFrEF受试者（CTR组n=15名受试者、HFpEF组n=13名（Xbp1s）和n=14名（Xbp1u）受试者和HFrEF组n=15名）的人心肌活检中Xbp1和Xbp1u的mRNA水平。小时，CTR、HFpEF和HFrEF受试者（每组8名受试者）人心肌活检中pIRE1α和IRE1β蛋白的免疫印迹图像。我，pIRE1α和IRE1β蛋白带之间的密度分析比率（n=8名受试者/组）。j个，二尖瓣E波和A波的比值（E/A）和k个对照组（CTR）和Xbp1s转基因小鼠（TG）的二尖瓣E波和E’波（E/E’）的比值随时间的推移而喂食CHOW或HFD+L-NAME饮食（n=5只小鼠/CHOW CTR和CHOW TG组；n=7只小鼠/HFD+L-NAME CTR和HFD+L NAME TG组。在所有三个时间点对每只小鼠进行分析）。我、运动疲劳试验期间的跑步距离米，研究结束时湿肺重量与干肺重量（LW）的比值（n=5只小鼠/周CTR和周TG组；n=7只小鼠/HFD+L-NAME CTR和HFD+L-NAME TG组）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。**a、 g、i**单向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。d日,**（f）**，双尾未成对学生的t吨-测试。**j-m公司**双向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。凝胶源数据见补充图1。

**图3。HFpEF和心肌细胞中iNOS依赖性IRE1α亚硝化。**
一、不同实验组小鼠左心室iNOS mRNA水平（每CHOW组4只小鼠；每HFD、L-NAME和HFD+L-NAME组6只小鼠b条，iNOS CHOW和HFD+L-NAME小鼠的成年小鼠心室肌细胞（AMVM）mRNA水平（每组n=5只小鼠。AMVM从单个小鼠中分离）。**c（c）**WKY和ZSF1-O基础大鼠（每组5只）的iNOS的LV mRNA水平。d日非衰竭（CTR）、HFpEF和HFrEF受试者的人心肌活检中iNOS mRNA水平（每个CTR组11名受试者，每个HFpEF-组11名受试者，每HFrEF-组10名受试人）。电子CHOW或HFD+L-NAME饮食五周后，野生型（WT）和iNOS敲除（iNOS KO）小鼠LV样品中S-亚硝基IRE1α（SNO-IRE1）、IRE1β和GAPDH蛋白的免疫印迹图像。图像是四个独立执行的实验的代表，具有类似的结果。（-Asc：不含抗坏血酸，+Asc：含抗坏他酸GSNO:S-亚硝基谷胱甘肽）**（f）**，各组SNO-IRE1α+抗坏血酸蛋白带密度分析（每组4只小鼠）。克α-半乳糖苷酶腺病毒（AdLacZ）或iNOS腺病毒（AdiNOS）感染增加24小时后转导的新生大鼠心室肌细胞的Xbp1s mRNA水平（n=4个生物独立实验）。小时用腺病毒转导IRE1α野生型（AdIRE1 a-WT）或在两个靶亚硝化位点（AdIREαM1+M2）和AdlacZ或AdiNOS突变的AdIRE1-α野生型腺病毒转染24小时的新生大鼠心室肌细胞中SNO-IRE1和IRE1 a蛋白的免疫印迹图像（-Asc:无抗坏血酸。GSNO:S-亚硝基谷胱甘肽）。图像是三个独立执行的实验的代表，具有类似的结果。我，SNO-IRE1α和IRE1β蛋白带强度之间的密度分析比值（n=3个生物学独立实验）。j个用AdIRE1αWT或AdIRE1-αM1+M2和AdlacZ或AdiNOS转导24小时的新生大鼠心室肌细胞的Xbp1s mRNA水平（n=5个生物独立实验）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。**a、 d、g、i、j**单向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。**b、 c（c）**双尾未成对学生的t吨-测试。**（f）**，双向方差分析，然后是Sidak的多重比较测试。方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。凝胶源数据见补充图1。

**图4。iNOS基因抑制改善HFpEF表型并恢复HFpEF中IRE1α-Xbp1s信号通路。**
一，二尖瓣E波与A波比值（E/A），b条，二尖瓣E波与E’波的比值（E/E’），**c（c）**、运动疲劳试验期间的跑步距离，以及d日，野生型（WT）和iNOS敲除型（iNOS KO）小鼠在五周CHOW或HFD+L-NAME饮食后的湿肺和干肺重量（LW）之比（E/A比率，E/E'比率n=10只/组；跑步距离和LW湿/LW干比n=5只/组）。电子，对CHOW或HFD+L-NAME饮食五周后WT和iNOS KO小鼠左心室（LV）样本中剪接（s）和未剪接（u）Xbp1转录物的电泳分析。用膜粘连蛋白处理的新生大鼠心室肌细胞（TUN）作为阳性对照。图像是三个独立执行的实验的代表，具有类似的结果。**（f）**Xbp1s的LV mRNA水平（每组5只小鼠）和克CHOW或HFD+L-NAME饮食五周后，WT和iNOS KO小鼠LV样本中pIRE1α、IRE1β和GAPDH蛋白的免疫印迹图像（每组4只小鼠）。小时，pIRE1α和IRE1β蛋白带之间的密度分析比率（每组4只小鼠）。结果以平均值±S表示。E.M.公司。**a-d、f、h**双向方差分析，然后进行Sidak的多重比较检验。方括号上方的数字表示有效*P（P）*值。凝胶源数据见补充图1。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

中的注释

新的小鼠模型揭示了亚硝化应激是HFpEF的一种新的驱动因素。
Lim英国。 Lim英国。 Nat Rev Cardiol公司。2019年7月；16(7):383. doi:10.1038/s41569-019-0203-4。 Nat Rev Cardiol公司。2019 PMID：31019312 没有可用的摘要。

类似文章

Xbp1s-FoxO1轴控制射血分数保持的心力衰竭患者的脂质积累和收缩性能。
Schiattarella GG、Altamirano F、Kim SY、Tong D、Ferdous A、Piristine H、Dasgupta S、Wang X、French KM、Villalobos E、Spurgin SB、Waldman M、Jiang N、May HI、Hill TM、Luo Y、Yoo H、Zaha VG、Lavandero S、Gillette TG、Hill-JA。 Schiattarella GG等人。国家公社。2021年3月16日；12(1):1684. doi:10.1038/s41467-021-21931-9。国家公社。2021 PMID：33727534 免费PMC文章。
在射血分数保持的实验性心力衰竭中，受损的T细胞IRE1α/XBP1信号引导炎症反应。
Smolgovsky S、Bayer AL、Kaur K、Sanders E、Aronovitz M、Filipp ME、Thorp EB、Schiattarella GG、Hill JA、Blanton RM、Cubillos-Ruiz JR、Alcaide P。 Smolgovsky S等人。临床投资杂志。2023年12月15日；133（24）：e171874。doi:10.1172/JCI171874。临床投资杂志。2023 PMID：37874641 免费PMC文章。
亚硝酸钠和肼屈嗪联合治疗在“二次打击”小鼠模型中通过保留射血分数减轻心力衰竭。
LaPenna KB、Li Z、Doiron JE、Sharp TE 3rd、Xia H、Moles K、Koul K、Wang JS、Polhemus DJ、Goodchild TT、Patel RB、Shah SJ、Lefer DJ。 LaPenna KB等人。美国心脏协会杂志，2023年2月21日；12（4）：e028480。doi:10.1161/JAHA.122.028480。Epub 2023年2月8日。美国心脏协会杂志，2023年。 PMID：36752224 免费PMC文章。
肌醇需求酶1α-X-box结合蛋白1信号传导在神经退行性疾病中的双重作用。
王C，常毅，朱军，马锐，李刚。王C等。神经科学。2022年11月21日；505:157-170. doi:10.1016/j.neuroscience.2022.10.014。Epub 2022年10月22日。神经科学。2022 PMID：36280023 审查。
射血分数保持的心力衰竭的新模式：共病通过冠状微血管内皮炎症导致心肌功能障碍和重塑。
Paulus WJ、Tschöpe C。 Paulus WJ等人。美国心脏病杂志。2013年7月23日；62(4):263-71. doi:10.1016/j.jacc.2013.02.092。Epub 2013年5月15日。美国心脏病杂志。2013 PMID：23684677 审查。

查看所有类似文章

引用人

利用空间分辨多重成像技术解卷积一氧化氮-蛋白质相互作用。
李毅、潘凯、高毅、李杰、臧毅、李X。李毅等。化学科学。2024年4月8日；15(17):6562-6571. doi:10.1039/d4sc00767k。eCollection 2024年5月1日。化学科学。2024 PMID：38699271 免费PMC文章。
红细胞生成素调节小鼠心脏功能所需的神经型一氧化氮合酶。
Lee J、Rogers HM、Springer DA、Noguchi CT。 Lee J等人。前生理学。2024年4月2日；15:1338476。doi:10.3389/fphys.2024.1338476。eCollection 2024年。前生理学。2024 PMID：38628440 免费PMC文章。
Empagliflozin和liraglutide通过增强Erbb4信号通路改善小鼠HFpEF。
倪XY、冯晓杰、王志浩、张毅、小PJ、曹毅、徐世伟、唐立群、翁JP。 Ni XY等。药物学报。2024年4月8日。doi:10.1038/s41401-024-01265-0。打印前在线。药物学报。2024 PMID：38589689
他汀类药物通过上调circRNA-RBCK1，改善心脏内皮功能，预防心力衰竭，并保持射血分数。
李B、白WW、郭T、汤ZY、靖XJ、珊TC、尹S、李Y、王F、朱ML、卢JX、白YP、董B、李P、王SX。李B等。国家公社。2024年4月5日；15(1):2953. doi:10.1038/s41467-024-47327-z。国家公社。2024 PMID：38580662 免费PMC文章。
HBI-8000通过TGF-β1/MAPK信号通路改善心力衰竭，射血分数保持不变。
田杰、李伟、曾磊、李毅、杜杰、李勇、李斌、苏庚。田杰等。《细胞分子医学杂志》，2024年4月；28（7）：e18238。doi:10.1111/jcmm.18238。《细胞分子医学杂志》，2024年。 PMID：38509729 免费PMC文章。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Dunlay SM、Roger VL和Redfield MM，射血分数保持的心力衰竭流行病学。Nat Rev Cardiol，doi:10.1038/nrcardio.2017.65（2017）。-内政部-公共医学
1. Shah SJ等人，《保留射血分数的心衰表型特异性治疗：多器官路线图》。《循环》134，73–90，doi:10.1161/CIRCULATIONAHA.116.021884（2016）。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
1. Chirinos JA和Zamani P硝酸盐-亚硝酸盐-NO途径及其对心力衰竭和保留射血分数的影响。Curr Heart Fail Rep 13，47–59，doi:10.1007/s11897-016-0277-9（2016）。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
1. Butler J，Braunwald E&Gheorghiade M认识到慢性心力衰竭恶化是临床试验的一个实体和终点。JAMA 312789-790，doi:10.1001/JAMA.2014.6643（2014）。-内政部-公共医学
1. Roh J、Houstis N和Rosenzweig A为什么我们没有经过验证的HFpEF治疗方法？Circ Res 120，1243–1245，doi:10.1161/CIRCRESAHA.116310119（2017）。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

赠款和资金

LinkOut-更多资源

[1] Dunlay SM、Roger VL和Redfield MM，射血分数保持的心力衰竭流行病学。Nat Rev Cardiol，doi:10.1038/nrcardio.2017.65（2017）。-内政部-公共医学

[2] Dunlay SM、Roger VL和Redfield MM，射血分数保持的心力衰竭流行病学。Nat Rev Cardiol，doi:10.1038/nrcardio.2017.65（2017）。-内政部-公共医学

[3] Shah SJ等人，《保留射血分数的心衰表型特异性治疗：多器官路线图》。《循环》134，73–90，doi:10.1161/CIRCULATIONAHA.116.021884（2016）。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[4] Shah SJ等人，《保留射血分数的心衰表型特异性治疗：多器官路线图》。《循环》134，73–90，doi:10.1161/CIRCULATIONAHA.116.021884（2016）。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[5] Chirinos JA和Zamani P硝酸盐-亚硝酸盐-NO途径及其对心力衰竭和保留射血分数的影响。Curr Heart Fail Rep 13，47–59，doi:10.1007/s11897-016-0277-9（2016）。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[6] Chirinos JA和Zamani P硝酸盐-亚硝酸盐-NO途径及其对心力衰竭和保留射血分数的影响。Curr Heart Fail Rep 13，47–59，doi:10.1007/s11897-016-0277-9（2016）。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[7] Butler J，Braunwald E&Gheorghiade M认识到慢性心力衰竭恶化是临床试验的一个实体和终点。JAMA 312789-790，doi:10.1001/JAMA.2014.6643（2014）。-内政部-公共医学

[8] Butler J，Braunwald E&Gheorghiade M认识到慢性心力衰竭恶化是临床试验的一个实体和终点。JAMA 312789-790，doi:10.1001/JAMA.2014.6643（2014）。-内政部-公共医学

[9] Roh J、Houstis N和Rosenzweig A为什么我们没有经过验证的HFpEF治疗方法？Circ Res 120，1243–1245，doi:10.1161/CIRCRESAHA.116310119（2017）。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[10] Roh J、Houstis N和Rosenzweig A为什么我们没有经过验证的HFpEF治疗方法？Circ Res 120，1243–1245，doi:10.1161/CIRCRESAHA.116310119（2017）。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

亚硝化应激导致射血分数保持不变的心力衰竭

附属公司

亚硝化应激导致射血分数保持不变的心力衰竭

作者

附属公司

摘要

利益冲突声明

数字

中的注释

类似文章

引用人

工具书类

MeSH术语

物质

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

医疗

分子生物学数据库

研究材料

摘要

利益冲突声明

数字

中的注释

类似文章

引用人

工具书类

MeSH术语

物质

相关信息

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

医疗

分子生物学数据库

研究材料