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.2006年10月1日;119(第19部分):4059-70。
doi:10.1242/jcs.03097。 Epub 2006年9月12日。

14-3-3相互作用和磷酸化对极性激酶PAR-1/MARK的调节

附属公司

14-3-3相互作用和磷酸化对极性激酶PAR-1/MARK的调节

奥尔加·戈兰森等。 细胞科学杂志. .

摘要

PAR-1/MARK激酶家族成员在极性和细胞周期控制中发挥关键作用,并受14-3-3支架蛋白、LKB1抑癌激酶和非典型蛋白激酶C(PKC)的调节。在本研究中,我们首先研究了哺乳动物MARK3与14-3-3相互作用的机制。我们证明14-3-3与MARK3的结合依赖于磷酸化,并且需要14-3-3的磷酸结合囊。我们发现,与14-3-3的相互作用不是由先前特征化的MARK3磷酸化位点介导的,这导致我们确定了15个新的磷酸化位点。这些位点的单点突变,以及先前确定的LKB1-(T211)和非典型PKC位点(T564/S619),没有破坏14-3-3结合。然而,所有17个磷酸化位点都转化为丙氨酸残基的突变株(称为17A-MARK3)不再能够结合14-3-3。野生型MARK3存在于细胞质和质膜中,而17A-MARK2突变体显著定位于质膜。我们提供的数据表明,MARK3的膜定位需要一个高度保守的C末端结构域,该结构域被称为激酶相关结构域-1(KA-1)。我们还表明,14-3-3与MARK3的分离不影响催化活性,并且MARK2突变体(不能与14-3-3相互作用)通常是活性的。最后,我们确定在MARK亚型的亚细胞定位以及非典型PKC过度表达对14-3-3结合和定位的影响方面存在显著差异。总之,这些结果表明,14-3-3与MARK亚型的结合是由多个磷酸化位点介导的,并用于在细胞质中锚定MARK异构体。

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