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.1999年4月1日;18(7):1905-14.
doi:10.1093/emboj/18.7.1905。

HLF和HIF1alpha在缺氧反应中转录激活的分子机制:它们的稳定性和氧化还原信号诱导的与CBP/p300的相互作用

附属公司

HLF和HIF1alpha在缺氧反应中转录激活的分子机制:它们的稳定性和氧化还原信号诱导的与CBP/p300的相互作用

M埃玛等。 欧洲工商管理硕士J. .

摘要

低氧诱导因子1α(HIF1alpha)及其相关因子HLF在低氧条件下激活一组基因的表达,如促红细胞生成素。使用GAL4DBD与两种因子的各种片段的融合基因的转染分析描绘了两个转录激活结构域,这两个转录激活结构域在缺氧反应中是可诱导的,并且定位在C末端的一半。它们的序列在HLF和HIF1alpha之间是保守的。一个是指定的NAD(N末端激活域),另一个是CAD(C末端活化域)。免疫印迹分析显示,NADs在常氧时很少检测到,但在缺氧时趋于稳定并积累,而CADs是组成性表达的。在哺乳动物双杂交系统中,CAD和NAD诱饵通过与CREB结合蛋白(CBP)猎物的联合转染增强了报告基因的荧光素酶表达,而CAD(而非NAD)通过CBP的联合表达增强了酵母中β-半乳糖苷酶的表达,表明NAD和CAD通过不同的机制与CBP/p300相互作用。共转染实验表明,Ref-1和硫氧还蛋白的表达进一步增强了CAD表达的荧光素酶活性,但NAD表达的荧光素酶活性没有增强。CAD序列中的氨基酸替换显示,一种特定的半胱氨酸对其低氧诱导与CBP的相互作用至关重要。降低O2浓度后,可以观察到硫氧还蛋白从细胞质的核移位。

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