• 细胞凋亡是细胞内高度调控的一种程序性细胞死亡。在疾病中，尤其是癌症中，细胞凋亡经常失调，从而中断了具有潜在有害突变的细胞的先天能力。
• 在3D细胞模型或细胞单层中评估凋亡包括测量Caspase-3和/或Caspase-7的存在或活性。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶是在细胞凋亡中起重要作用的蛋白酶。在凋亡过程中，Caspase-3被激活。进而裂解并激活Caspase-6和7[2]。
• 可以通过使用Caspase-3或Caspase-7的荧光探针、Caspase-3/7的免疫标记或其他分析格式，如末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记（TUNEL），来评估细胞凋亡。
• 凋亡诱导的评估是评价抗肿瘤药物对癌细胞疗效的重要终点。
• 凋亡细胞的检测和定量可以利用高含量筛选来成像荧光分子探针，荧光分子探针可渗透到细胞膜，是Caspase-3的底物。
• 结合其他分析终点，如细胞增殖或细胞活力，细胞凋亡的测量是一个有用的工具，可以用来检查抗癌药物的效果在体外。
• 3D细胞培养模型有效地再现了体内肿瘤环境，是评价有前景的抗癌药物化合物诱导凋亡作用的有效工具。
• 细胞凋亡评估对于评估受试化合物的安全性和毒性至关重要。在3D肝细胞模型中测定化合物的凋亡诱导是一种很好的方法，可以在药物发现过程的早期识别和消除具有毒性的先导化合物。
• 该分析可与最多两个其他基于图像的终点（例如细胞增殖和细胞活性）结合，或与免疫标记结合，以确定治疗后发生凋亡的细胞类型。

1. 3D细胞模型生成并生长到直径约200μm。粘附的单层生长到汇合处。
2. 试验化合物处理
3. 24小时后，用固定的凋亡探针标记细胞。
4. Nuclei标有DAPI
5. 对于3D模型，组织清除应用于渲染3D细胞模型透明
6. 在井板上进行高含量成像
7. 对图像进行分析以量化细胞总数和凋亡细胞总数

图1。通过fulvestrant治疗的木细胞肿瘤球体高含量成像获得的Z轴最大投影。数据通过自动图像分析进行量化，以计数细胞总数和凋亡细胞数

图2。具有代表性的数据显示，在使用各种抗肿瘤药物治疗的木细胞肿瘤球体中检测到的凋亡细胞比例

工具书类

1. Green，Douglas（2011）。 达到目的的方法：细胞凋亡和其他细胞死亡机制纽约州冷泉港：冷泉港实验室出版社。
2. 威利AH（1997）。《细胞凋亡：概述》。 英国医学通报. 53（3）：451–65。数字对象标识符：10.1093/oxfordjournals.bmb.a011623