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.1997年12月16日;36(50):15615-23.
doi:10.1021/bi9718752。

蛋白激酶CβII的C2结构域调控

附属公司

蛋白激酶CβII的C2结构域调控

A S爱德华兹等。 生物化学. .

摘要

C2结构域在包括传统蛋白激酶Cs的各种蛋白质组中充当膜靶向模块。这项工作研究了C2结构域将蛋白激酶C靶向膜的机制。分子模型确定了蛋白激酶Cβiotaiota C2结构域上的两个高电荷表面:含有五个天冬氨酸的Ca2+结合位点和位于含有七个赖氨酸残基的Ca2+位点后面的基本面。两个表面都发生突变,以评估它们在钙依赖性膜结合中的作用。令人惊讶的是,去除基本面上的四个正电荷对蛋白激酶C的脂质或Ca2+敏感性没有影响,这表明基本面不提供与脂质结合有关的决定因素,也没有靠近细胞膜以增强其电正性表面的非特异性募集。相反,用Ca2+结合位点中的两个正电荷替换两个负电荷会使蛋白激酶C对Ca2+和阴离子脂质的亲和力降低几个数量级。这种突变导致的电负性电位的急剧降低并没有在没有Ca2+的情况下提高蛋白激酶C对酸性膜的亲和力,这表明简单的电荷中和并不能解释Ca2+如何增加蛋白激酶C对于阴离子膜的亲和性。我们的数据表明:(1)C2结构域的膜相互作用表面局限于Ca2+结合位点,正表面远离膜,(2)Ca2+位点不是一个简单的静电开关。

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