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.1995年12月1日;5(12):1394-1403.
doi:10.1016/s0960-9822(95)00277-6。

蛋白激酶C在体内由三种功能不同的磷酸化调节

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蛋白激酶C在体内由三种功能不同的磷酸化调节

L M凯伦等。 当前生物. .
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摘要

背景:蛋白激酶Cs是一个酶家族,可传递促进脂质水解的过多信号。在这里,我们表明蛋白激酶C必须首先被三种不同的磷酸化处理,然后才能对第二信使作出反应。

结果:我们已经通过质谱法和来自细胞中洗涤剂可溶部分的天然激酶和磷酸酶处理激酶的肽序列测定,确定了蛋白激酶C体内磷酸化位点的位置和功能。具体而言,激活环上500位(T500)的苏氨酸以及蛋白激酶CβII羧基末端的T641和S660在体内被磷酸化。T500和S660在体外被蛋白磷酸酶2A选择性地去磷酸化,以产生仍然能够进行脂质依赖性激活的酶,而所有三个残基都被蛋白磷酸酯1去磷酸化以产生不活跃的酶。生化分析表明,蛋白激酶C在S660上自动磷酸化,S660上的自动磷酸化是在T641自动磷酸化之后进行的,S660的自磷酸化伴随着蛋白激酶C释放到胞浆中,T500不是自动磷酸化位点。

结论:天然和磷酸酶处理的蛋白激酶C的结构和生化分析表明,蛋白激酶C通过三种磷酸化处理。首先,活化环(T500)上的反磷酸化使其具有催化能力来进行自磷酸化。其次,羧基末端(T641)随后发生的自磷酸化保持催化能力。第三,羧基末端的第二次自磷酸化(S660)调节酶的亚细胞定位。这些残基(或酸性残基)在传统的、新型的和非典型的蛋白激酶C中的保存强调了每种残基在调节蛋白激酶C家族中的重要作用。

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