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比较研究
.1996年2月23日;271(8):4230-5。
doi:10.1074/jbc.271.8.4230。

ERK1激活位点突变体的特征及其对MEK1和MEK2识别的影响

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比较研究

ERK1激活位点突变体的特征及其对MEK1和MEK2识别的影响

E R布奇等。 生物化学杂志. .
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摘要

为了识别MEK1和MEK2对其底物细胞外信号调节激酶(ERK)的特异性,对ERK1调节磷酸化位点两侧的氨基酸残基进行定点突变。分析这些ERK1突变体作为MEK1和MEK2底物的能力。根据磷酸化和活化分析,突变体可分为四类:1)磷酸化和激活显著降低,2)基础激酶活性增强,3)酪氨酸磷酸化优先增强,苏氨酸磷酸化降低,4)苏氨酸磷酸化随着活化程度的增加而增加。总的来说,ERK1调节性磷酸化位点附近的残基对磷酸化和活化都有较大的影响。这与MEK对ERK1调节位点的高度特异性识别一致。Arg-208或Thr-207突变为丙氨酸残基显著改变了Thr-202和Tyr-204的相对磷酸化。Arg-208转丙氨酸突变体使Tyr-204的磷酸化增加了约4倍,但几乎完全消除了Thr-202的磷酸化合。相反,Gly-199突变为丙氨酸导致Thr-202相对于Tyr-204的磷酸化增加。这表明Gly-199和Arg-208在决定Thr-202和Tyr-204的相对磷酸化方面都起着重要作用。我们的结果表明,ERK磷酸化唇中的残基在MEK的识别和磷酸化中起着重要作用。

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