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比较研究
.1994年6月17日;269(24):16821-8。

酵母中的蛋白激酶C。酿酒酵母PKC1基因产物的特性

附属公司
  • PMID: 8207004
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比较研究

酵母中的蛋白激酶C。酿酒酵母PKC1基因产物的特性

B安东森等。 生物化学杂志. .
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摘要

酿酒酵母PKC1基因编码哺乳动物蛋白激酶C的同源物(Levin,D.E.,Fields,F.O.,Kunisawa,R.,Bishop,J.M.和Thorner,J.(1990)Cell 62,213-224)。针对trpE-Pkc1融合蛋白制备的多克隆抗血清可识别150kDa的蛋白质。在亚细胞分馏中,Pkc1p与100000 x g颗粒组分相关。这种关联对高盐浓度、碱缓冲液或非离子洗涤剂的萃取具有抵抗力,这表明Pkc1p可能与大蛋白复合物有关。在其COOH末端修饰两个重复的金黄色葡萄球菌蛋白A IgG结合片段(ZZ序列标签)的Pkc1p能够在限制温度下完全恢复pkc1ts菌株的生长缺陷。ZZ标记的Pkc1p通过DEAE-Sepharose层析进行部分纯化,然后使用IgG-Sepharose进行纯化。在体外,Pkc1p磷酸化假底物肽和髓鞘碱性蛋白,但不磷酸化组蛋白。将异亮氨酸替换为底物肽中受体丝氨酸的精氨酸2氨基酸COOH末端,导致Km减少10倍。Pkc1p活性独立于磷脂、二酰甘油和Ca2+等辅助因子,已知这些辅助因子可激活几种哺乳动物蛋白激酶C同工酶,使其成为蛋白激酶C超家族的一个较远相关成员。

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