毛细血管发育的形态学研究和与病理性新生血管相关的毛细血管变化的观察表明周细胞可能会抑制内皮细胞（EC）的生长。我们已经开发了系统，使我们能够在体外研究这种可能性。使用了两种模型：一种是允许周细胞和内皮细胞直接接触的共培养系统，另一种是防止物理接触但允许可溶性因子扩散的共培养体系。在这些研究中，在牛毛细血管内皮细胞和以下生长抑制细胞（以下简称调节细胞）之间建立了共培养：周细胞、平滑肌细胞（SMCs）、成纤维细胞、上皮细胞和3T3细胞。在与内皮细胞共培养之前，用丝裂霉素C处理可阻止调节细胞类型的生长。在直接共同培养细胞的实验中，通过比较共同培养中的平均细胞数与单独培养的每种细胞类型（EC和调节细胞）的平均数，确定共同培养对EC生长的影响。由于周细胞和其他调节细胞生长受阻，所以在共培养中的任何细胞数量变化都是由于EC生长所致。在共培养中，周细胞在整个14d时间过程中抑制所有EC增殖；在SMC-EC共培养中观察到类似程度的EC抑制。内皮细胞与成纤维细胞、上皮细胞和3T3细胞共培养在同一时间段内显著刺激内皮细胞生长（与单独培养的内皮细胞相比，为30-192%）。为了确定抑制是否需要细胞接触，使用Millicell培养箱（Millipore Corp.，Bedford，MA）共同培养细胞，该培养箱将细胞类型分开1-2 mm，但允许交换扩散材料。在这个共培养系统中，周细胞或SMC对EC增殖没有抑制作用。通过以1:1、2:1、5:1、10:1和20:1的EC/周细胞比率共同培养细胞来评估细胞比率对观察到的抑制的影响。在1:1到10:1的比例下观察到EC抑制的类似水平。当细胞以20个内皮细胞与1个周细胞的比例共同培养时，在第3天对内皮细胞生长的抑制与在其他比例下观察到的抑制相似。然而，在较高的比率下，抑制作用减弱，以至于在时间过程结束时，共同培养的内皮细胞的生长速度与对照组相同。这些结果表明，周细胞和SMC可以通过一种需要接触或接近的机制来调节EC的生长。我们假设类似的相互作用可能在体内调节血管生长。
