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.2013年12月1日;133(11):2737-43.
doi:10.1002/ijc.28282。 Epub 2013年6月14日。

磷酸蛋白质组分析在伊马替尼作用下胃肠道间质瘤中激酶转换的新发现

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磷酸蛋白质组分析在伊马替尼作用下胃肠道间质瘤中激酶转换的新发现

高桥桥桥等。 国际癌症杂志. .
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摘要

尽管伊马替尼对晚期胃肠道间质瘤(GISTs)具有革命性影响,但大多数患者最终在原发性耐药或继发性耐药突变驱动的获得性耐药后发生疾病进展。即使在影像学上消失的病变中,病理学也显示伊马替尼治疗期间存在持续存活的细胞,这可能导致耐药克隆的出现。为了揭示这些临床问题的潜在机制,我们使用定量酪氨酸磷酸蛋白质组分析方法,检测了伊马替尼诱导的GIST-T1细胞磷酸蛋白质组的改变,将磷酸酪氨酸肽的免疫亲和富集与等压标记结合起来,用于相对和绝对定量(iTRAQ)技术。使用这种方法,我们鉴定了171个酪氨酸磷酸化位点,横跨134个蛋白质,其中11个蛋白质的酪氨酸磷酸化增加了1.5倍以上。其中,我们评估了FYN和粘着斑激酶(FAK),据报道这两种蛋白都与肿瘤的增殖和恶性改变有关。我们通过蛋白质印迹证实了这两种激酶的酪氨酸磷酸化增加。FYN和FAK磷酸化的抑制均增加了肿瘤细胞对伊马替尼的敏感性。此外,FAK选择性抑制剂(TAG372)诱导伊马替尼耐药GIST-T1细胞凋亡,并降低伊马替尼IC50。这些结果表明,FYN或FAK可能是克服GIST患者对伊马替尼耐药性的潜在治疗靶点。此外,我们表明,基于iTRAQ的定量磷酸酪氨酸聚焦磷酸蛋白质组方法是筛选与耐药性相关的磷酸蛋白质的有力方法。

关键词:主旨;iTRAQ;伊马替尼;蛋白质组学。

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