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.2005年5月;5(8):2227-37.
doi:10.1002/pmic.200401093。

与丙型肝炎病毒核心蛋白相互作用的细胞蛋白的蛋白质组分析

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与丙型肝炎病毒核心蛋白相互作用的细胞蛋白的蛋白质组分析

苏敏康等。 蛋白质组学. 2005年5月.

摘要

丙型肝炎病毒(HCV)是慢性肝炎和肝细胞癌的病原体。丙型肝炎病毒的核心蛋白包裹病毒RNA基因组,形成核衣壳。除了作为结构蛋白的功能外,核心蛋白还参与细胞转录调控、病毒诱导的转化和发病机制。为了通过鉴定与核心蛋白相互作用的细胞蛋白来深入了解核心蛋白的细胞功能,我们采用了蛋白质组学方法。将肝细胞可溶性细胞质蛋白应用于Ni-硝基三乙酸树脂固定的核心蛋白上,通过2-DE对总结合细胞蛋白进行解析。通过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱分析相互作用蛋白,可以识别与核心蛋白结合的14种细胞蛋白。这些蛋白质包括DEAD-box多肽5,其功能与之前通过酵母双杂交筛选鉴定的已知蛋白质相似,以及13种新鉴定的细胞蛋白质。有趣的是,9个蛋白点被鉴定为中间微丝蛋白,包括细胞角蛋白(5个点用于细胞角蛋白8,2个点用于细胞角蛋白19,1个点用于胞角蛋白18)和波形蛋白。细胞角蛋白8和波形蛋白先前被证明参与其他病毒的感染过程,通过免疫印迹和免疫荧光显微镜进一步分析以确认它们与核心蛋白的体内相互作用。我们讨论了核心蛋白与新发现的细胞蛋白相互作用在HCV感染和发病机制中的功能意义。

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